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公开(公告)号：CN104673935A
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201510075885.6
申请日：2015-02-12
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625
Abstract: 本发明公开了基因II型草鱼呼肠孤病毒的检测方法，包括下述步骤：1)提取草鱼样品的RNA，加入到预混反应液中利用两对引物对基因II型草鱼呼肠孤病毒的保守区序列进行环介导等温核酸扩增，其中所用的引物分别为引物GCRVII-F3序列SEQ ID No：1、引物GCRVII-B3序列SEQ ID No：2；引物GCRVII-FIP序列SEQ ID No：3、引物GCRVII-BIP序列SEQ ID No：4；并标记FITC探针，探针GCRVII-FITC-Probe序列SEQ ID No：5；2)将扩增产物滴加到LFD试纸的点样位置上，然后在点样处前端滴缓冲液，待缓冲液移动到试纸的另一端至反应结束，根据试纸条上的显色带判定检测结果。本发明的检测方法及其试剂盒结合了等温扩增和核酸试纸条快速检测技术，具有操作简单、检测可靠性高、特异性好、灵敏度高的特点。
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公开(公告)号：CN104450962A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410684920.X
申请日：2014-11-25
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q1/70 , C12Q2531/119 , C12Q2563/107
Abstract: 草鱼呼肠孤病毒I型II型III型RT-LAMP荧光检测试剂盒及其检测方法，属于靶DNA片断的检测技术领域。该试剂盒包括病毒RNA提取试剂和RT-LAMP荧光反应试剂，所述的RT-LAMP荧光反应试剂中含有用于检测草鱼呼肠孤病毒I型、II型和III型的RT-LAMP扩增用核酸引物组和荧光染料，该荧光染料为SYTO9。该试剂盒检测特异性强，敏感性高，检测时间短（最快15分钟可出结果），具有巨大的优势和创新性。
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公开(公告)号：CN103571950B
公开(公告)日：2015-03-18
申请号：CN201310482323.4
申请日：2013-10-15
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 一种舒伯特气单胞菌快速检测试剂盒，组成：（1）DNA提取试剂：5-15mMTris、0.5-1.5mM EDTA的TE缓冲液；蛋白酶K，浓度15-20mg/mL；100%的氯仿；100%的异丙醇；乙醇，浓度70%；双蒸水；（2）PCR反应试剂，每个PCR反应管中含有10×PCR反应缓冲液2.5μL，浓度为10μM的dNTPs0.5μL，浓度为5U/μL的Taq DNA聚合酶0.3μL，10μM的特异性寡核苷酸引物A0.5μL，10μM的特异性寡核苷酸引物B0.5μL，灭菌去离子水19.2μL，引物A：5’-CAGCGAGGAGGAAAGGTTGGTGGT-3’,引物B：5’-AAGCCACGCCTCAAGGGCACAA-3’。本发明用于检测舒伯特气单胞菌。
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公开(公告)号：CN102796829B
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201210304572.X
申请日：2012-08-24
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 罗氏沼虾诺蒂病毒的LAMP检测试剂盒及其检测方法，属于靶DNA片断的检测技术领域。该LAMP检测试剂盒包括病毒DNA提取试剂和LAMP反应试剂，所述的LAMP反应试剂中含有用于检测罗氏沼虾诺蒂病毒的LAMP扩增用核酸引物组，该引物组包含引物MRNuV-FIP、引物MRNuV-BIP、引物MRNuV-F3、引物MRNuV-B3、引物MRNuV-LF和引物MRNuV-LB。发明的试剂盒特异性强，敏感性高；本发明罗氏沼虾诺蒂病毒的LAMP检测方法利用所述试剂盒检测，该方法方便、灵敏、准确、快速。
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公开(公告)号：CN102018711B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201010565142.4
申请日：2010-11-30
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: A61K31/4741 , A61P33/14
Abstract: 白屈菜红碱在制备杀灭水产动物体外寄生虫药物中的应用及防治剂属于化学产品用途技术领域。其特征在于由重量百分含量的以下物质组成：白屈菜红碱5％-25％，表面活性剂5％-10％，溶解剂10%-20％，余量为溶剂；所述的表面活性剂为吐温-20，所述的溶解剂为二甲基亚砜，所述的溶剂为无水乙醇。白屈菜红碱对水产动物体外寄生虫的灭杀效果好，且还具有低毒、低残留、对非靶标生物毒害较低，对环境无污染等优点，使用安全可靠。该防治剂以天然植物提取的白屈菜红碱为有效成分，制备方法简单，生产成本低，使用方法简单，直接按1-2mL/m3 的剂量泼洒于池塘中即可有效防治或杀灭水产动物体外寄生虫，防治或杀灭效果好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102277453B
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201110239776.5
申请日：2011-08-19
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 罗氏沼虾双顺反子病毒的LAMP检测试剂盒及检测方法，属于靶DNA片断的检测技术领域。该检测试剂盒包括RNA提取试剂和RT-LAMP反应试剂，该检测方法包括：1）罗氏沼虾RNA抽提；2）罗氏沼虾双顺反子病毒的RT-LAMP扩增：3）显色检测。该检测试剂盒特异性强，敏感性高，该检测方法方便、灵敏、准确、快速，为罗氏沼虾幼体综合症的预防奠定基础。
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公开(公告)号：CN101736073B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN200810122380.0
申请日：2008-11-24
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测试剂盒，包括：(1)DNA提取试剂：TE缓冲液，5-15mM Tris，0.5-1.5mM EDTA；10-20mg/mL溶菌酶水溶液；10-20mg/mL蛋白酶K水溶液；Tris饱和酚；2-5mol/L乙酸钠水溶液；95％乙醇；(2)PCR反应试剂管：PCR反应液49μL，包括10×PCR反应缓冲液5μL，dNTPs(10uM/L)0.5μL，Taq DNA聚合酶(5U/μL)0.5μL，特异性寡核苷酸引物引物1、引物2、引物3、引物4，用灭菌去离子水定容。一种气单胞菌和嗜水气单胞菌双重PCR快速检测方法：(1)DNA抽提，(2)PCR扩增反应，(3)被检测样品目的PCR扩增产物和电泳检验。本发明适用于水产生物致病菌的快速检测。
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公开(公告)号：CN102140512A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201010611571.0
申请日：2010-12-29
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 使用方便，检测快速的致病性嗜水气单胞菌的LAMP检测试剂盒，包括细菌DNA提取试剂和LAMP反应试剂，反应试剂中含引物FIP：GTTTCCCCCATCAGATCCGTGGTTTACGCCACCCAGTTTCTTG、BIP：TCCGGCCTGTATACCTGTATCAGGTTAAACCAGGGTGTCATCGCT、F3：TGATGGCACGAGACATCCA、B3：TGCTTGATCCCCTTGCTACT；致病性嗜水气单胞菌的LAMP检测方法：(1)DNA抽提；(2)致病性嗜水气单胞菌的LAMP扩增；(3)显色检测。本发明适合检测致病性嗜水气单胞菌。
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公开(公告)号：CN102018711A
公开(公告)日：2011-04-20
申请号：CN201010565142.4
申请日：2010-11-30
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
IPC: A61K31/4741 , A61P33/14
Abstract: 白屈菜红碱在制备杀灭水产动物体外寄生虫药物中的应用及防治剂属于化学产品用途技术领域。其特征在于由重量百分含量的以下物质组成：白屈菜红碱5％-25％，表面活性剂5％-10％，溶解剂10%-20％，余量为溶剂；所述的表面活性剂为吐温-20，所述的溶解剂为二甲基亚砜，所述的溶剂为无水乙醇。白屈菜红碱对水产动物体外寄生虫的灭杀效果好，且还具有低毒、低残留、对非靶标生物毒害较低，对环境无污染等优点，使用安全可靠。该防治剂以天然植物提取的白屈菜红碱为有效成分，制备方法简单，生产成本低，使用方法简单，直接按1-2mL/m3 的剂量泼洒于池塘中即可有效防治或杀灭水产动物体外寄生虫，防治或杀灭效果好。
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公开(公告)号：CN101906482A
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN200910099037.3
申请日：2009-06-04
Applicant: 浙江省淡水水产研究所
Abstract: 一种草鱼呼肠孤病毒基因诊断试剂盒，包括：1.内脏组织中病毒RNA提取试剂：DEPC水；蛋白酶K(1mg/mL，pH8.0)；SDS(1％)；酚/氯仿/异戊醇(25/24/1)；氯仿/异戊醇(24/1)；异丙醇；70％乙醇；2.细胞感染病毒的RNA提取试剂：Trizol；氯仿；异丙醇；70％乙醇；DEPC水；3.RT反应试剂成分：5×AMV Buffer，dNTP，DEPC水，反向引物R1，RNA酶抑制剂RNAsin(RI)，反转录酶AMV；4.PCR反应试剂成分：10×PCRbuffer(含Mg2+)，dNTPMixture(各2.5mmol/L)；特异性寡核苷酸引物F1和引物R1；DEPC水和Taq E(5U/uL)，所述正向引物F1：5’-ATCCCGTATATCTATGGCTT-3’；所述反向引物R1：5’TTGGAGACGAACATAGACGC-3。本发明用于草鱼呼肠孤病毒基因诊断。
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