黑胫病菌效应因子的克隆方法

    公开(公告)号:CN109971750A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201910165403.4

    申请日:2019-03-05

    Abstract: 本发明公开了黑胫病菌效应因子的克隆方法,通过设计引物;烟草黑胫病菌基因组DNA的提取;PCR扩增烟草黑胫病菌效应因子基因;PCR产物的回收纯化;大肠杆菌DH5α感受态的制备;扩增产物连接pMDTM 19-T Vector并转化大肠杆菌DH5α;转化大肠杆菌;阳性克隆子筛选及菌液的PCR鉴定;筛选到的阳性克隆子进行测序鉴定,最终得到黑胫病菌效应因子。本发明的有益效果是克隆了烟草黑胫病菌的效应因子并分析其功能。

    一种生防菌挥发性代谢物的检测方法

    公开(公告)号:CN106596774B

    公开(公告)日:2019-04-19

    申请号:CN201611177548.9

    申请日:2016-12-19

    Abstract: 本发明公开了一种生防菌AR30挥发性代谢物的检测方法,包括:(1)将细菌发酵液涂布于培养基上,所述培养基置于顶空瓶中;(2)采用固相微萃取技术收集细菌挥发物;(3)用配置多模式进样口的气相色谱‑质谱联用仪,在全扫描模式下结合商业谱库检索和正构烷烃保留指数匹配的方式对细菌挥发物进行鉴定,根据化合物分子鉴定结果,对细菌挥发物含量进行定量分析。该方法能够有效解决不稳定、易降解的活性挥发物的收集、鉴定及定量检测问题,掌握细菌胞外挥发性代谢物分子时空动态信息,为研究生防菌的抗菌机理、作用方式及其在生物防治领域中的应用提供支持,为丰富抗菌物质种类和挖掘新的抗菌基因提供理论基础。

    烟草赤星病的人工接种方法

    公开(公告)号:CN104818222A

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201510224644.3

    申请日:2015-05-05

    CPC classification number: C12N1/14

    Abstract: 本发明公开了烟草赤星病菌的人工接种方法。本发明所提供的烟草赤星病菌的人工接种方法,利用赤星病菌孢子悬浮液经离体叶片伤口注射对成熟叶片进行接种,病菌的分生孢子可以直接进入叶片内,借助水分及寄主叶肉组织营养萌发、扩繁,向细胞间扩展,局部组织死亡形成的病斑会得到大面积扩大。可达到接种率高,发病程度适中的效果,这为鉴定我国烟草主产区不同赤星病菌致病性及小种差异及烟草赤星病抗性品种的筛选提供了一种简易、方便、快速、准确的人工接种方法,具有较好的应用价值。

    公丁香提取物及其应用
    36.
    发明公开

    公开(公告)号:CN104247719A

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201410348099.4

    申请日:2014-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种公丁香提取物,由下述步骤制备:(1)将公丁香叶片于40~65℃烘干,粉碎;(2)按质量体积比1∶3~9加入95%的乙醇,微波处理同时500~600W电加热70~120s,过滤得滤液;(3)按质量体积比1∶3~9加入95%的乙醇,浸泡4~6d,过滤得滤液;(4)按质量体积比1∶3~9加入95%的乙醇,功率为500~650W的超声波提取1~1.5h,过滤得滤液;(5)合并步骤(2)、(3)和(4)的滤液,在40~55℃和400~600毫米汞柱下浓缩,得浸膏;及其在防治烟草青枯病方面的应用。本发明能抑制青枯病菌的生长,处理后,青枯菌鞭毛消失破、菌体消解,抑制菌体蛋白合成,降低POD、CAT、SDH酶活。此外,烟草青枯病的温室和田间防效分别达到71.5%和59.7%,具有较大应用价值。

    快速鉴定烟草炭疽病抗性的方法

    公开(公告)号:CN103399143A

    公开(公告)日:2013-11-20

    申请号:CN201310317628.X

    申请日:2013-07-25

    Abstract: 本发明“快速鉴定烟草炭疽病抗性的方法”,属于植物抗病性鉴定技术,其特征在于利用炭疽菌毒素浸叶圆片,通过测量和统计病斑扩展程度,衡量材料抗性,与传统的炭疽病人工接种抗性鉴定方法比较,本发明在人工控制的稳定条件下进行,发病条件一致;操作过程简单,鉴定周期短,接种效率高,可同时分别鉴定同一材料对不同病原菌的抗性,且不影响正常幼苗生长发育和开花结实;达到了简单、高通量、快速准确的鉴定烟草及其种质对炭疽病抗性的目的,在烟草炭疽病抗性筛选上具有很大的应用价值。

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