基于UPLC/LTQ-Orbitrap Velos MS检测石斛生物碱成分的方法

    公开(公告)号:CN106501437A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201611221950.2

    申请日:2016-12-27

    CPC classification number: G01N30/88 G01N30/06

    Abstract: 本发明提供了基于UPLC/LTQ-Orbitrap Velos MS检测石斛生物碱成分的方法,通过超声处理,并用纯甲醇溶液进行提取,针对生物碱成分的化学性质,采用酸水溶解甲醇提取物,并进一步碱化,使生物碱盐转变为游离的生物碱,利用二氯甲烷溶液进行萃取,用超高效液相色谱分离所述游离生物碱待测样品,将分离后的生物碱成分用质谱检测;采用OSI/SMMS软件完成未知代谢物定性。本发明首次采用UPLC/LTQ-Orbitrap Velos MS技术对石斛中生物碱成分进行定性检测,共鉴定出22种生物碱成分,且均首次在石斛中被分离检测出,明确了石斛生物碱成分的类型,为研究其药理作用奠定了理论基础。

    一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法

    公开(公告)号:CN105400887A

    公开(公告)日:2016-03-16

    申请号:CN201510962652.8

    申请日:2015-12-16

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/156

    Abstract: 一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法,具体步骤是:(1)提取授粉梨品种叶片的DNA;(2)进行SCoT-PCR反应,计算遗传相似系数,构建授粉梨品种之间的亲缘关系聚类图;(3)根据聚类分析结果,选取亲缘关系远、中、近的授粉品种树给砀山酥梨进行授粉;(4)对每个授粉品种所结成熟果实果肉组织的石细胞团数目及面积进行显微观察、计算;并测定石细胞含量;(5)通过步骤(4)的分析结果,筛选出最优亲缘关系授粉梨品种。本发明可以快速准确的从分子层面揭示不同梨品种资源间的亲缘关系,通过分析不同亲缘关系授粉品种对砀山酥梨果实石细胞大小及含量的影响,进而筛选出适宜亲缘关系的优良授粉品种,改善砀山酥梨果实的石细胞含量,提高砀山酥梨果实品质。

    甲基营养型芽孢杆菌株及其应用

    公开(公告)号:CN105039204A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510336656.5

    申请日:2015-06-16

    Abstract: 甲基营养型芽孢杆菌株,其保藏号为:CGMCC No.10779。本发明还提供甲基营养型芽孢杆菌株CGMCC No.10779在拮抗植物病原菌中的应用,尤其是在拮抗麦冬炭疽病病原菌中的应用。本发明有益效果体现在:1.本发明甲基营养型芽孢杆菌株CGMCC No.10779对多种植物病原菌,如西瓜枯萎病、棉花枯萎病、玉米小斑病病原菌具有拮抗作用,尤其是对麦冬炭疽病病原菌具有非常高效的拮抗作用,是一种防治植物病害效果高、环境友好、生物防治大的拮抗菌株,具有良好的开发应用前景。2.本发明甲基营养型芽孢杆菌株CGMCC No.10779耐盐能力强,在氯化钠含量达9%的培养基上依然能够生长,抗逆能力强,可适用于环境较为恶劣的土地,潜在应用价值高。

    一种Spot-9-UDP-葡萄糖脱氢酶基因片段的构建获得方法

    公开(公告)号:CN103352044A

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201310282227.5

    申请日:2013-07-05

    Abstract: 本发明公开了一种Spot-9-UDP-葡萄糖脱氢酶基因片段的构建获得方法,步骤包括:提取棉花雄性不育系与可育系的花药总DNA,设计并合成如SEQ ID NO:1所示的上游引物和如SEQ ID NO:2所示的下游引物,以花药总DNA为模板进行PCR扩增,分离出编码棉花Spot-9-UDP-葡萄糖脱氢酶的基因。本发明的突出优势是设计并合成了Spot-9-UDP-葡萄糖脱氢酶基因片段特异性引物,同时提供了该基因PCR扩增的最佳反应条件,首次在棉花雄性不育系中克隆了该基因片段;通过比较该基因在不育系与可育系植株中表达的差异性,为进一步探讨该基因与棉花不育性状之间的关系奠定了基础。

    大水榕、小水榕、尖叶榕、燕尾榕离体快繁体系构建方法

    公开(公告)号:CN102232360A

    公开(公告)日:2011-11-09

    申请号:CN201110104408.X

    申请日:2011-04-25

    Abstract: 本发明公开了一种大水榕、小水榕、尖叶榕、燕尾榕离体快繁体系构建方法,其技术要点是以水榕的腋芽或由腋芽新生出来的侧芽作为外植体,诱导产生不定芽,将不定芽接种到固体培养基上继代培养,得到大量的丛生芽,并且,本技术培养的大水榕、小水榕试管苗在培养过程中均能自然生根,不需要转移到生根培养基上;燕尾榕、尖叶榕试管苗在培养过程中需要转移到生根培养基上,用组织培养的方法培养的四种水榕均能在短时间内得到大量健壮的完整植株并出瓶移栽。本技术通过组织培养的方法,既提高了四种水榕的增殖倍数,又缩短了培养时间,简化了培养的程序,并且不受季节影响,可大批供应种苗,从而降低成本。

    基于VIGS的石菖蒲根状茎基因沉默体系及其构建方法

    公开(公告)号:CN116004711B

    公开(公告)日:2023-12-22

    申请号:CN202211476454.7

    申请日:2022-11-23

    Abstract: 本发明提供了一种基于VIGS的石菖蒲根状茎基因沉默体系,包括辅助载体以及重组载体;所述辅助载体为烟草脆裂病毒PTRV1,重组载体为含目的基因片段的烟草脆裂病毒PTRV2;所述目的基因片段来源于石菖蒲根状茎。本发明还提供了一种基于VIGS的石菖蒲根状茎基因沉默体系的构建方法。本发明具有时间短、速度快、高通量,不需要依赖于稳定的遗传转化的特点,通过所述方法对石菖蒲根状茎进行侵染,可使目标基因表达水平降低,为下一步石菖蒲功能基因组学的研究提供技术平台,为下一步验证石菖蒲基因功能奠定基础。

    一种基于Y2H筛选梨石细胞负调控因子互作蛋白的方法

    公开(公告)号:CN115948414A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211187647.0

    申请日:2022-09-28

    Abstract: 本发明提供了一种基于Y2H筛选梨石细胞负调控因子互作蛋白的方法,包括如下步骤:获取梨石细胞负调控转录因子;构建重组文库载体;通过同源重组将筛选的梨石细胞负调控转录因子基因连接到pGBKT7载体,形成“重组诱饵载体”;自激活验证;酵母双杂交文库筛选;阳性鉴定;筛选并确定目的序列;点对点阳性验证,如菌落变为蓝色则说明阳性验证成功,蓝色的深浅反映互作能力强弱。本发明方法可快速筛选出与梨石细胞抑制转录因子相互作用的蛋白质、并鉴定其可能的生物学功能,还可以判断出梨石细胞抑制转录因子与互作蛋白的相互作用强弱,为改善梨果实石细胞含量,提高果实口感提供分子生物学基础。

    一种用于鉴定黄精属种质资源的CDDP分子标记引物组及其应用

    公开(公告)号:CN115820899A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202210953145.8

    申请日:2022-08-09

    Abstract: 本发明属于植物种质资源鉴定技术领域,具体涉及一种用于鉴定黄精属种质资源的CDDP分子标记引物组及其应用。该CDDP分子标记引物组针对WRKY、MYB、ERF、KNOX和MADS设计得到。本发明以WRKY、MYB、ERF、KNOX和MADS五个保守氨基酸序列所对应的保守基因序列为参考序列设计引物,这些短的保守基因序列存在于植物基因组中的多个位置,并提供多个引物结合位点,此种引物设计专注于基因区域,较随机标记有优势。同时,以设计得到的引物对黄精属种质的基因组DNA进行扩增,可以用于黄精属种质资源的鉴定、区分和遗传多样性分析。

    一种多花黄精的遗传转化方法及应用

    公开(公告)号:CN115725644A

    公开(公告)日:2023-03-03

    申请号:CN202211592302.3

    申请日:2022-12-13

    Abstract: 本发明提供了一种多花黄精的遗传转化方法及应用,涉及遗传转化技术领域。本发明以毛状根为媒介的高效遗传转化体系,利用含有工程菌菌液侵染多花黄精外植体,获得了转基因毛状根,侵染过程简单易学,结果高效直观,能够稳定获得多花黄精转基因毛状根。利用本发明所述遗传转化方法,在最优条件下可将诱导率提高至88.8%,可应用于多花黄精的基因功能验证。

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