一种能促进蛋白可溶性表达及提高表达量的重组表达载体

    公开(公告)号:CN106834324A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710038807.8

    申请日:2017-01-19

    Abstract: 本申请属于基因工程技术领域,具体涉及一种能促进蛋白可溶性表达及提高蛋白表达量的重组表达载体。重组表达载体pET21b‑HEMBP(Pyr)为原核表达载体,在pET21b的基础上双酶切后,重组连接有HE‑MBP(Pyr)‑TEV 序列;具体通过构建重组质粒pUC57‑HEMBP(Pyr)‑Nb、酶切、连接、转化、筛选等步骤构建获得。该重组表达载体在蛋白表达中的应用,可用于表达单克隆抗体、抗原、多聚蛋白、c‑di‑GMP和c‑GAMP合成酶等多种蛋白。本申请通过构建改造、构建新的重组表达载体,可以较好地提高蛋白表达量和提高蛋白的可溶度,在基因工程、蛋白工程中具有较好地实用价值和推广应用意义。

    一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段

    公开(公告)号:CN104531699B

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201410525824.0

    申请日:2014-10-09

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种增强外源基因表达的猪的UCOE调控元件片段。所述UCOE调控元件片段的碱基序列如序列表所示。该调控元件片段在外源蛋白表达的方面,通过构建重组质粒表达载体pCpG-Mini-GFP-UCOE,转染HEK293T细胞,可以增强GFP表达。本发明以人的1.5kbUCOE片段作为对照,利用酶切方法和RT-PCR方法将猪UCOE片段分割成不同长度的片段,构建不同表达载体,转染HEK293T细胞,通过实时荧光定量PCR和Western blot技术检测报告基因GFP的相对表达量筛选出最佳的能够增强外源基因表达的UCOE片段序列,即本发明所请求保护的基因序列。

    一种连续化生产c-di-AMP的方法

    公开(公告)号:CN104946705A

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201510281173.X

    申请日:2015-05-28

    Abstract: 本发明属于基因工程和酶工程技术领域,具体涉及一种采用固定化DisA蛋白连续生产c-di-AMP的方法。该方法步骤:1、DisA基因改造,通过基因工程手段,将DisA基因与cbm基因融合构建重组质粒载体;2、重组质粒转化,CBM-DAC融合蛋白的表达;3、一步纯化和固定化DAC酶;4、连续化生产c-di-AMP;5、反应产物分离浓缩与纯化。本发明特异性的利用了CBM结构域与纤维素结合但无水解功能的特点,工艺较为成熟,生产成本低廉,环境友好,所制备的DAC酶类型多样,来源广泛,而且浓度、纯度较高,酶促反应效率较高,因而具有较好的开发应用价值。

    一种检测乳品中过氧化物酶(LPO)的方法

    公开(公告)号:CN101210264A

    公开(公告)日:2008-07-02

    申请号:CN200610128488.1

    申请日:2006-12-29

    Inventor: 杨国宇 韩立强

    Abstract: 本发明的目的是提供一种较高灵敏度,误差小,简易、快速的检测乳过氧化物酶的方法。一种检测乳品中过氧化物酶(LPO)的方法,包括下列步骤:1)取两个比色杯,各为对照管和测试管,各加入2.2ml的磷酸盐缓冲液调整pH=5-6;2)各加入0.5-4mm的ABTS溶液0.7ml;3)各管中加入1-30mm的H2O20.1ml。颠倒混匀,放置于比色槽中;4)对照管中加入0.2mm的磷酸氢二钾溶液0.05ml,测试管中加入0.05ml的样品;5)混匀后,在室温下,立即用分光光度计在416nm处采用动力学曲线模式,空白管调零后,取前120s进行连续性检测。输出打印,每检测一次就得到一条近似直线的曲线,计算该条近似直线的斜率y,由x=256.4y+0.0256计算酶活力x。采用ABTS法试剂成本较低适用于推广应用。

    一种剥离式长期血管瘘及其套针

    公开(公告)号:CN203314973U

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201320310148.6

    申请日:2013-05-31

    Abstract: 本实用新型公开了一种剥离式长期血管瘘及其套针,血管瘘包括轴线沿前后方向延伸的采血管,所述采血管的外周面上套设有沿采血管轴向导向滑动的套针,套针包括与采血管滑动配合的呈管状的套针本体,套针本体的前端具有由斜切口端面形成的、用于刺破血管壁的针尖,套针本体上还具有对套针施加前后移动的作用力的施力部。该结构的血管瘘,由于采血管在套针退出之前进入到血管内,采血管与套针之间具有动作的连续性,能够保证采血管快速、准确插入到血管内。

    粪尿自分离代谢笼
    46.
    实用新型

    公开(公告)号:CN201563470U

    公开(公告)日:2010-09-01

    申请号:CN200920314804.3

    申请日:2009-11-16

    Abstract: 本实用新型涉及一种粪尿自分离代谢笼,包括笼体,笼体的底部为漏粪板,所述漏粪板的下方对应设置有向下倾斜的集尿盘,该集尿盘向下倾斜的末端设置有出尿口,所述集尿盘的上方对应设置有滤网槽。本实用新型的粪尿自分离代谢笼在使用时,将实验用动物圈养于该代谢笼内,动物的代谢物抓粪便及尿液从笼体底部的漏粪板直接落到滤网槽上,粪便经倾斜的滤网槽向下滚落,并最终落入收粪槽内,而尿液通过滤网槽落入集尿盘内,并向下流淌进入集尿沟后经出尿口流入收尿容器内。这样就很容易地对动物的排泄物进行分类收集取样,而不会对动物造成任何的影响,适用于所有个体大小及性别的羊,大大降低了劳动强度。

    一种组织采样器
    47.
    实用新型

    公开(公告)号:CN204789014U

    公开(公告)日:2015-11-18

    申请号:CN201520447041.5

    申请日:2015-06-26

    Abstract: 本实用新型提供一种组织采样器,包括沿前后方向延伸的针芯采样组件,针芯采样组件具有设置于前端的采样部,组织采样器还包括用于随采样部一同进入采样体中的观察定位装置,观察定位装置包括用于照射采样体的待采集区域的照明装置和用于采集所述待采集区域图像的摄像头,所述组织采样器还包括用于显示摄像头采集图像以供使用者观察的显示屏。在进行活体采样时,观察定位装置随针芯采样组件一同进入采样体中,照明装置打开,摄像头采集图像传输至显示屏上,以供使用者确认采样位置。由于在采样时可利用摄像头确保采样目标位置和深度,这样可以避免出现错采和漏采的问题,进而可以提高采样正确性。

    组织采样器
    48.
    实用新型

    公开(公告)号:CN202027618U

    公开(公告)日:2011-11-09

    申请号:CN201120091707.X

    申请日:2011-03-31

    Abstract: 本实用新型涉及一种组织采样器,包括针芯及其外套设的针管,所述的针芯包括针头、组织取样段和拉杆,所述的针头、组织取样段和拉杆依次同轴连接,所述的组织取样段的外周面上开设有用于组织取样的凹槽,所述的针管临近针头一端的环形端面上沿针管长度延伸方向设置有刀刃,所述的刀刃上设有用于组织切割的工作段,所述的工作段的刀刃的延长线或刀刃延长线的切线与所述凹槽的槽沿间有夹角,且夹角不为0°,本实用新型通过斜刃剪切原理解决了现有组织采样器采样效果不理想的问题。

    自控复合血管瘘
    49.
    实用新型

    公开(公告)号:CN202005757U

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201120080869.3

    申请日:2011-03-24

    Abstract: 本实用新型公开了一种自控复合血管瘘,该血管瘘包括管体,管体前端设有入血孔,且管体的外壁上还设有用于夹持血管壁的夹持机构,所述夹持机构包括在管体上前后套装的防脱件、止推件,防脱件与止推件之间连接有滑动设于管体上的连接滑套,所述防脱件是前端固连于管体外壁靠近入血孔处并与管体密封、后端固连于连接滑套并与连接滑套密封的变形套,防脱件具有在受到连接滑套施加的向前作用力下沿管体径向向外隆起变形时形成的前段筒体和后段筒体,所述防脱件前段筒体和后段筒体均为一体相接的软质材料,所述止推件为连接在连接滑套后端的用于与血管壁止推配合的套状结构。该血管瘘非常方便地将血管瘘固定在血管壁上,降低了固定瘘管的难度,缩短了手术时间,减小了对动物的创伤。

    自控复合血管瘘
    50.
    实用新型

    公开(公告)号:CN201996549U

    公开(公告)日:2011-10-05

    申请号:CN201120014258.9

    申请日:2011-01-18

    Abstract: 本实用新型公开了一种自控复合血管瘘,该血管瘘包括用于在工作时插入血管的管体,所述管体前端的外壁上设有入血孔,管体内设有用于控制入血孔打开或关闭的弹性球囊,所述管体的外壁上还设有用于夹持血管壁的夹持机构,所述夹持机构包括防脱弹性球囊和止推弹性球囊,所述管体内设有与防脱弹性球囊连通的防脱控制管,防脱控制管伸出管体外连通有防脱控制阀囊,所述止推弹性球囊位于所述防脱弹性球囊后面,防脱弹性球囊和止推弹性球囊之间设置有用于夹持血管壁的间隙,所述管体内还设有一止推控制管,止推控制管的一端与止推弹性球囊连通,另一端连通有止推控制阀囊。该血管瘘在采血完毕后,试验人员可以轻松的将血管瘘从动物体内拔出。

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