吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103288960B

    公开(公告)日:2015-01-07

    申请号:CN201210049798.X

    申请日:2012-02-29

    Abstract: 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用,其步骤:A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9,提取脾细胞总RNA,得到mRNA,在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因;以重链和轻链抗体片段互为引物,利用多肽链将抗体重链和轻链连接;C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中,加入M13K07培养,得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中,IPTG诱导,得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序,得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行,操作简便,便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测,提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。

    一种土拉霉素残留标示物的合成方法

    公开(公告)号:CN104119413A

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201410366468.2

    申请日:2014-07-29

    Abstract: 本发明属于化学合成技术领域,具体涉及一种土拉霉素残留标示物,名称为3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A的化学合成方法。本发明的特征是,以红霉素A(E)肟为原料,经过贝克曼重排反应得到红霉素A6,9-亚胺醚,经硼氢化钠还原即得氮红霉素,然后在酸性条件下水解脱掉克拉定糖得到3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A粗品,经反复重结晶后制得其纯品,HPLC纯度达99.5%以上。本发明工艺简便,反应产率高,产品纯度高,可以作为土拉霉素残留标示物的标准物质候选物。

    用于检测氟喹诺酮类药物残留的单克隆抗体及酶联免疫方法与试剂盒

    公开(公告)号:CN102766212B

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201210176496.9

    申请日:2012-05-31

    Abstract: 本发明公开了一种能识别氟喹诺酮类药物的特异性单克隆抗体,所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞5B11所分泌的,该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC?NO:C201149。本发明还公开了检测氟喹诺酮类药物残留的酶联免疫方法与试剂盒及其在氟喹诺酮类药物残留检测中的应用。与现有技术相比,本发明制备得到的单克隆抗体能识别15种氟喹诺酮类药物,特别是能够同时识别二氟沙星和沙拉沙星,因此适用范围广。本发明建立的酶联免疫方法与试剂盒灵敏度、精密度高、准确性好。

    一种T-2毒素的生物合成方法

    公开(公告)号:CN103421856A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210246546.6

    申请日:2012-07-17

    CPC classification number: Y02P20/582

    Abstract: 本发明属于兽医药理学技术领域,具体涉及一种T-2毒素的制备方法。以玉米颗粒为原料,经产毒镰刀菌复苏,产分生孢子,接种玉米产毒培养基培养,在产毒高峰期对培养基采用乙醇液提取、二氯甲烷萃取、一步柱层析和结晶等工艺过程,获得T-2毒素结晶的提取方法。整个提取效率可达89%,所得毒素经核磁和质谱结构鉴定正确无误,测定含量不低于95.66%,稳定性至少4个月以上。与传统提取工艺比较,本发明采用一步法柱层析即可分离纯化出大量T-2毒素,步骤简单快捷产量高,所制备的毒素性质稳定纯度高,整个提取方法极大的降低了毒素合成成本,简化了毒素合成工艺,合成的毒素可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素相关科研领域。

    5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮的合成方法

    公开(公告)号:CN103420934A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310226349.2

    申请日:2013-06-07

    Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域,具体涉及一种用于兽药残留检测的呋喃它酮残留标志物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮的化学合成新方法,其特征在于:以水合肼与吗啉基环氧丙烷为原料,在碱性条件下反应,得到中间体1-肼基-3-吗啉-2-丙醇,接着在碱性条件下与取代的甲酸酯反应,得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮。本发明首次提供了5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)的完整合成方法,其合成步骤简单,易操作,反应条件温和。

    一种喹噁啉-2-羧酸的合成方法

    公开(公告)号:CN103420927A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201310226391.4

    申请日:2013-06-07

    Abstract: 本发明属于兽药制备技术领域,具体涉及一种用于兽药残留检测的卡巴氧残留标志物喹噁啉-2-羧酸的合成方法。其制备步骤包括:1)以邻苯二胺为原料,与丙酮醛缩合,即得中间产物2-甲基喹噁啉;2)将所得中间体2-甲基喹噁啉用二氧化硒进行氧化反应,即生成喹噁啉-2-甲醛;3)将所得喹噁啉-2-甲醛用酸性高锰酸钾进一步氧化,即得目标产物喹噁啉-2-羧酸。本发明的合成方法具有反应路线设计合理、操作简单和产率较高等优点。

    阿苯达唑–2–氨基砜残留检测单克隆抗体及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103288964A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201210049837.6

    申请日:2012-02-29

    Abstract: 本发明公开了一种阿苯达唑-2-氨基砜残留检测用单克隆抗体及制备方法和应用,杂交瘤细胞GA/2A11,CCTCCNO:C201142。其步骤是:a、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与牛血清白蛋白偶联得到免疫原;b、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与卵清蛋白偶联得到包被原;c、利用免疫原制备得到杂交瘤细胞株;d、用包被原包被固相载体;e、将待测样品用乙酸乙酯在氢氧化钾条件下提取得到待测物;f、对待测物进行酶联免疫检测;试剂盒包括:⑴包被有包被原ABZSO2NH2-GA-OVA的酶标板;⑵ABZSO2NH2标准品溶液;⑷辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液;⑸浓缩磷酸盐缓冲液;⑹浓缩洗涤液;⑺底物混合液;⑼终止液。试剂盒在阿苯达唑-2-氨基砜残留检测中的应用。具有简便、快速、灵敏、准确的特点。

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