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公开(公告)号:CN104558182A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410829812.7
申请日:2014-12-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种能识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的特异性单克隆抗体,本发明还公开了一种用于检测邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯的酶联免疫方法及试剂盒。本发明的单克隆抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201497的杂交瘤细胞株DBP3B2所分泌的。与现有技术相比,本发明制备的单克隆抗体可以同时识别邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸甲苯基丁酯,对DBP的最低检测限(IC50)仅为44.33μg/L,对BBP的最低检测限仅为62.59μg/L,而且对BBP具有较高的交叉反应率,因此对DBP和BBP这两种邻苯二甲酸酯塑化剂有较高的检测灵敏度和特异性。
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公开(公告)号:CN103288960B
公开(公告)日:2015-01-07
申请号:CN201210049798.X
申请日:2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N15/13 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用,其步骤:A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9,提取脾细胞总RNA,得到mRNA,在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因;以重链和轻链抗体片段互为引物,利用多肽链将抗体重链和轻链连接;C、将酶切scFv连接入E.coliTG1中,加入M13K07培养,得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的E.coliHB2151中,IPTG诱导,得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序,得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行,操作简便,便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测,提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。
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公开(公告)号:CN104130197A
公开(公告)日:2014-11-05
申请号:CN201410368086.3
申请日:2014-07-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D239/50
CPC classification number: C07D239/50
Abstract: 本发明属于化学合成技术领域,具体涉及一种2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶的化学合成方法。该产物是动物专用体外抗寄生虫药地昔尼尔在体内代谢物。本发明的特征是,以双氰胺钠和丙二腈为原料,经过亲核加成反应得到1-氨基-1-氰氨基-2,2-二氰基乙烯钠盐,在酸性条件下经环化后得到2-氯-4,6-二氨基-5-氰基嘧啶,最后氨解反应得到2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶。本发明具有合成工艺路线设计合理、操作简单和产率较高等优点。
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公开(公告)号:CN104119413A
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201410366468.2
申请日:2014-07-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于化学合成技术领域,具体涉及一种土拉霉素残留标示物,名称为3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A的化学合成方法。本发明的特征是,以红霉素A(E)肟为原料,经过贝克曼重排反应得到红霉素A6,9-亚胺醚,经硼氢化钠还原即得氮红霉素,然后在酸性条件下水解脱掉克拉定糖得到3-脱克拉定糖-9-脱氧-9-二氢-9a-氮杂-9a-同型红霉素A粗品,经反复重结晶后制得其纯品,HPLC纯度达99.5%以上。本发明工艺简便,反应产率高,产品纯度高,可以作为土拉霉素残留标示物的标准物质候选物。
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公开(公告)号:CN102766212B
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201210176496.9
申请日:2012-05-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种能识别氟喹诺酮类药物的特异性单克隆抗体,所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞5B11所分泌的,该杂交瘤细胞保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC?NO:C201149。本发明还公开了检测氟喹诺酮类药物残留的酶联免疫方法与试剂盒及其在氟喹诺酮类药物残留检测中的应用。与现有技术相比,本发明制备得到的单克隆抗体能识别15种氟喹诺酮类药物,特别是能够同时识别二氟沙星和沙拉沙星,因此适用范围广。本发明建立的酶联免疫方法与试剂盒灵敏度、精密度高、准确性好。
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公开(公告)号:CN103421856A
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201210246546.6
申请日:2012-07-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12P17/18 , C07D493/10 , C12R1/77
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明属于兽医药理学技术领域,具体涉及一种T-2毒素的制备方法。以玉米颗粒为原料,经产毒镰刀菌复苏,产分生孢子,接种玉米产毒培养基培养,在产毒高峰期对培养基采用乙醇液提取、二氯甲烷萃取、一步柱层析和结晶等工艺过程,获得T-2毒素结晶的提取方法。整个提取效率可达89%,所得毒素经核磁和质谱结构鉴定正确无误,测定含量不低于95.66%,稳定性至少4个月以上。与传统提取工艺比较,本发明采用一步法柱层析即可分离纯化出大量T-2毒素,步骤简单快捷产量高,所制备的毒素性质稳定纯度高,整个提取方法极大的降低了毒素合成成本,简化了毒素合成工艺,合成的毒素可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素相关科研领域。
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公开(公告)号:CN103421019A
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201210434826.X
申请日:2012-11-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D493/10
Abstract: 本发明涉及生物毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇的微量氚标记的制备法。其包括以脱氧雪腐镰刀菌烯醇为原料,以苯硼酸保护7α,15位的两个羟基,通过斯文氧化(Swern Oxidation)将3位羟基氧化。然后以异丙醇为溶剂,采用氚标记硼氢化钠选择性还原3位羰基,得到氚标记脱氧雪腐镰刀菌烯醇。本发明的合成方法原料易得、反应条件温和、易操作,获得的氚标记化合物标记位点明确、稳定。产物的化学纯度和放化纯度均不低于98%,比活度为2.52Ci/mmol。本发明为深入开展脱氧雪腐镰刀菌烯醇的毒作用机制及食品安全性评价提供了重要的物质基础。
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公开(公告)号:CN103420934A
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201310226349.2
申请日:2013-06-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D263/26
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域,具体涉及一种用于兽药残留检测的呋喃它酮残留标志物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮的化学合成新方法,其特征在于:以水合肼与吗啉基环氧丙烷为原料,在碱性条件下反应,得到中间体1-肼基-3-吗啉-2-丙醇,接着在碱性条件下与取代的甲酸酯反应,得到目标产物5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮。本发明首次提供了5-甲基吗啉-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)的完整合成方法,其合成步骤简单,易操作,反应条件温和。
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公开(公告)号:CN103420927A
公开(公告)日:2013-12-04
申请号:CN201310226391.4
申请日:2013-06-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07D241/44
Abstract: 本发明属于兽药制备技术领域,具体涉及一种用于兽药残留检测的卡巴氧残留标志物喹噁啉-2-羧酸的合成方法。其制备步骤包括:1)以邻苯二胺为原料,与丙酮醛缩合,即得中间产物2-甲基喹噁啉;2)将所得中间体2-甲基喹噁啉用二氧化硒进行氧化反应,即生成喹噁啉-2-甲醛;3)将所得喹噁啉-2-甲醛用酸性高锰酸钾进一步氧化,即得目标产物喹噁啉-2-羧酸。本发明的合成方法具有反应路线设计合理、操作简单和产率较高等优点。
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公开(公告)号:CN103288964A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201210049837.6
申请日:2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种阿苯达唑-2-氨基砜残留检测用单克隆抗体及制备方法和应用,杂交瘤细胞GA/2A11,CCTCCNO:C201142。其步骤是:a、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与牛血清白蛋白偶联得到免疫原;b、将半抗原阿苯达唑-2-氨基砜与卵清蛋白偶联得到包被原;c、利用免疫原制备得到杂交瘤细胞株;d、用包被原包被固相载体;e、将待测样品用乙酸乙酯在氢氧化钾条件下提取得到待测物;f、对待测物进行酶联免疫检测;试剂盒包括:⑴包被有包被原ABZSO2NH2-GA-OVA的酶标板;⑵ABZSO2NH2标准品溶液;⑷辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG抗体工作液;⑸浓缩磷酸盐缓冲液;⑹浓缩洗涤液;⑺底物混合液;⑼终止液。试剂盒在阿苯达唑-2-氨基砜残留检测中的应用。具有简便、快速、灵敏、准确的特点。
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