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公开(公告)号:CN109402188B
公开(公告)日:2020-11-06
申请号:CN201811219769.7
申请日:2018-10-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种来自短小芽孢杆菌的ω‑转氨酶及在生物胺化中的应用,属于生物工程技术领域。本发明首次从Bacillus pumilus W3中分离、鉴定了ω‑转氨酶基因,并选用大肠杆菌重组表达系统生产密码子优化后的ω‑转氨酶能大幅提高其产量,使更易达到工业化应用要求。本发明发现该ω‑转氨酶以(R)‑α‑phenethylamine为底物时,最适作用pH为7.0,最适作用温度为45℃;同时,该R‑ω‑转氨酶pH稳定性及温度稳定性都非常好,对实验组(以(R)‑α‑phenethylamine为底物)的催化活性优于对照组(以(S)‑α‑phenethylamine为底物),表明该重组ω‑转氨酶具有很好选择性合成R‑手性胺的功能,具有较大应用潜力。
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公开(公告)号:CN110038250A
公开(公告)日:2019-07-23
申请号:CN201910360374.7
申请日:2019-04-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降解含金属离子或有机溶剂的邻苯二甲酸酯类的方法,属于酶工程领域。本发明将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的羧酸酯酶BaCEs01在大肠杆菌中异源表达,得到的羧酸酯酶BaCEs01最适反应温度为40℃,在40℃下放置1小时后,酶活性保持在40%以上,具有良好的温度稳定性。纯化得到的羧酸酯酶BaCEs01对邻苯二甲酸酯类(邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二异丁酯)的降解率分别高达84.2%、89.6%、81.3%,提供了一种高效降解塑化剂邻苯二甲酸酯类的方法。
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公开(公告)号:CN109486780A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201811350818.0
申请日:2018-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的ω-转氨酶突变体,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω-转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变,即将ω-转氨酶215位置处的I突变成M,得到了一种催化效率得到提高的ω-转氨酶突变体。本发明突变体I215M催化效率Kcat/Km提高了17.39倍,催化(R)-phenethylamine生成acetophenone时,突变体的acetophenone最大转化率比天然酶提高了6.99倍。本发明得到的突变体比天然ω-转氨酶更适用于在工业上的应用。
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公开(公告)号:CN109294936A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811266756.5
申请日:2018-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种异源重组毕赤酵母工程菌GS115-pPIC9K-LacGWLF,所述异源重组毕赤酵母工程菌携带来源于短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CotA漆酶优良突变体GWLF的目的基因;将优化的GWLF漆酶基因重组进毕赤酵母GS115基因组得到的所述工程菌。本发明重组毕赤酵母阳性菌株经过甲醇诱导培养、发酵条件优化和5L发酵罐高密度发酵,可用于制备重组GWLF漆酶。
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公开(公告)号:CN104745567B
公开(公告)日:2018-08-24
申请号:CN201510166951.0
申请日:2015-04-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/12 , C02F3/34 , C02F103/30
Abstract: 本发明公开了一种固定化芽孢漆酶及其制备与应用,属于固定化技术领域和废水处理领域。本发明固定化芽孢漆酶是由芽孢杆菌属菌株所产的芽孢漆酶通过离子键和氢键固定在DEAE‑纤维素上形成的,它保留了芽孢漆酶广泛的pH适应能力和耐热性;在含有机溶剂、金属离子或抑制剂的溶液中,固定化芽孢漆酶具有比游离芽孢漆酶更强的稳定性。其制备过程主要包含芽孢的制备、载体预处理、吸附和收集四个步骤,操作简便,固定化率高。本发明提供的固定化芽孢漆酶具有很强的染料脱色能力,将其应用于纺织染料如甲基绿、甲基红、酸性红1和结晶紫的脱色处理,最高脱色率可达到95%左右。载体也可以选择性地吸附染料,与漆酶形成互补作用。
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公开(公告)号:CN105146642B
公开(公告)日:2018-08-21
申请号:CN201510125458.4
申请日:2015-03-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种利用蜜源菌发酵制备果蔬蜂蜜酵素饮料的方法,其工艺特点是以果蔬为主要原料,辅以蜂蜜及水以2013年6月24日保存于武汉大学中国典型培养物保藏中心的保藏编号为:CCTCC NO:M2013283的Bacillus amyloliquefaciens H47的解淀粉芽孢杆菌为发酵菌株,发酵过程分为好氧发酵和厌氧发酵两步。好氧发酵时按照果菜浆、蜂蜜、水4~6∶1~3∶5~1的比例和三种原料总重量0.01%‑0.05%的蜜源菌冻干粉,保持PH=5~8,温度20‑35℃,转速220rpm。在发酵罐中通气搅拌好氧发酵7‑15天。好氧发酵结束后加入总体积1%‑3%的乳酸菌,搅拌均匀,在通二氧化碳或氮气的条件下静置15‑30天进行厌氧发酵。
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公开(公告)号:CN105063008B
公开(公告)日:2018-08-07
申请号:CN201510455681.5
申请日:2015-07-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/14 , C02F3/34 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了种固定化芽胞漆酶及其制备方法与应用,属于固定化技术领域和废水处理领域。本发明公开的固定化芽胞漆酶由芽胞杆菌属菌株所产的芽胞漆酶通过酰胺键固定在硅藻土表面或孔隙中得来;其制备过程包含芽胞的制备、硅藻土改性、固定和收集四个步骤,操作简便,酶活回收率高;其结合力强,载体资源丰富,价格低廉,是种理想的固定化载体。本发明提供的固定化芽胞漆酶可直接用于染料的脱色处理,并且具有较高的可重复利用能力。
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公开(公告)号:CN107227302A
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201710437791.8
申请日:2017-06-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C02F3/34 , C02F2101/308 , C12Y110/03002
Abstract: 本发明公开了一种可溶性表达量提高的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus W3)CotA漆酶突变体,属于生物工程领域。本发明以本实验室前期构建的催化效率(ABTS为底物)大大提高的复合突变体L386W/G417L/G57F(WLF)CotA漆酶基因为模板,进一步将复合突变体的第501位Asp突变为Gly。本发明所述的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体的可溶性表达量是WT‑CotA的3.75倍,是WLF的4.48倍,催化效率为WT‑CotA的4.4倍,为WLF的0.993倍,并保持良好的pH、温度稳定性。本发明所得CotA漆酶突变体将更适合工业化应用,具有更广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106967756A
公开(公告)日:2017-07-21
申请号:CN201710243609.5
申请日:2017-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种制备生物源杀虫剂的技术。其工艺特点是以番茄为原料,利用保存于中国典型培养物保藏中心的,保藏编号为:CCTCCNO:M2013283的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)H47和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌混合发酵。原料适当打碎后加菌种100mL,加水10L,25℃—30℃发酵3‑12d,过滤后获得成品。本发明制备方法及过程中无污染安全可靠,发酵时间周期短,工艺环节少,简单易操作,可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比,其具绿色安全,环境友好等优势,且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用,拥有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106929537A
公开(公告)日:2017-07-07
申请号:CN201710243596.1
申请日:2017-04-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: Y02A50/351 , C12P1/04 , A01N65/00 , A01N65/30 , C12R1/07
Abstract: 本发明提供了一种发酵水蓼制备杀虫剂的方法,其工艺特点是以水蓼为主要原料,辅以生活垃圾、淀粉类物质及水,以市售短小芽孢杆菌、苏云杆菌和解淀粉芽孢杆菌H47为发酵菌株,按照水蓼:生活垃圾:淀粉类物质:纯净水=5:1~2:0.01:3~4的比例和体系3%的菌株接种量,发酵温度为25~35℃,转速为100~200rpm,保持pH=5~8,发酵时间6~9d。本发明完全发酵,使其中的多种酶、维生素、氨基酸和微量元素充分释放出来,使产品提高杀虫剂的药效及其功能。而且又不影响植物性杀虫剂的生理活性物质。
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