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公开(公告)号:CN103205431B
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201310099114.1
申请日:2013-03-26
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , C12Q1/68 , C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种核酸适配体,其序列包含序列1、序列2中任意一条序列所示的DNA片段。本发明的核酸适配体还可以是各种同源性较高的类似序列或由本发明序列得到的衍生物。本发明还公开了该核酸适配体的筛选方法,先合成随机单链DNA文库和引物,再Cell-SELEX筛选,PCR扩增文库,制备DNA单链文库,最后经重复筛选、阴性筛选和多轮筛选得到核酸适配体。本发明的核酸适配体及其衍生物可在识别人胆管癌细胞株QBC-939或者制备检测人胆管癌细胞株QBC-939的试剂盒中应用,具有比蛋白抗体更高的亲和力与特异性、无免疫原性、能够化学合成、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。
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公开(公告)号:CN104480114A
公开(公告)日:2015-04-01
申请号:CN201410852323.3
申请日:2014-12-31
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/115 , C12N15/10 , G01N30/02 , A61K47/48 , A61K47/36 , A61K31/337 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种高效液相色谱筛选核酸适配体的方法及核酸适配体和应用,其中高效液相色谱筛选核酸适配体的方法,包括以下步骤:从随机文库RS36中筛选与多西紫杉醇特异性结合的核酸适体的核酸文库;采用高效液相色谱法筛选核酸文库得到核酸适配体;高效液相色谱法中,固定相为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱;流动相采用水-乙腈梯度洗脱;检测波长为260nm;检测器为二极管阵列检测器。按照高效液相色谱法筛选的核酸适配体具有能够与多西紫杉醇高特异性和高亲和力结合、无免疫原性、能够化学合成、生物相容性好、分子量小、稳定、易于保存等优点,可应用于药物载体、药物分离与纯化、制备多西紫杉醇检测探针或靶点探针等。
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公开(公告)号:CN101907556B
公开(公告)日:2013-02-27
申请号:CN201010230079.9
申请日:2010-07-19
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明涉及一种大肠杆菌的检测方法,具体公开了利用磁纳米颗粒富集结合双色流式细胞术检测大肠杆菌的方法,其步骤是:首先利用磁纳米颗粒与待测样品共培育并富集,该富集是指所述磁纳米颗粒与待测样品形成的复合物在外加磁场作用下富集起来;然后以荧光纳米颗粒标记的大肠杆菌抗体与富集后的待测样品进行免疫共培育并二次富集,再以核酸染料对二次富集后的待测样品进行染色,最后采用多参数流式细胞术和激光共聚焦显微镜对染色后的待测样品进行检测和观察,根据检测到的具有荧光双阳性信号的对象的数量来对待测样品中大肠杆菌的检测结果进行分析和判断。本发明的检测方法具有快速、准确、灵敏且假阳性率低等优点。
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公开(公告)号:CN102321616B
公开(公告)日:2012-11-21
申请号:CN201110273017.0
申请日:2011-09-15
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种利用微流控芯片筛选蛋白质的核酸适体的方法,包括以下步骤:将预先设定的起始核酸文库先与非靶标蛋白质孵育,得到优化核酸文库;然后将靶标蛋白质先与微珠孵育,将修饰有靶标蛋白质的微珠置入一微流控芯片通道内;再将优化核酸文库通入微流控芯片通道内,经过冲洗、洗脱,得到初筛核酸文库;对初筛核酸文库进行PCR扩增,扩增产物通过亲和柱分离,变性解链、脱盐后形成次一级核酸文库;以次一级核酸文库替代起始核酸文库并重复前述步骤,直至得到含目标核酸适体的核酸文库。本发明的方法具有通用性强、筛选时间短、筛选效率高、筛选效果好等优点。
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公开(公告)号:CN101817495B
公开(公告)日:2012-03-14
申请号:CN201010132139.3
申请日:2010-03-25
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明属于微流控技术领域,具体公开了一种微流控芯片及其制备方法和应用,该芯片一侧设有多个进样孔,每个进样孔连通有一进样流道,各个进样流道交汇后与一主流道相连通,主流道上设有一狭窄流道,狭窄流道入口前填充有0.5~1.5mm的微珠,主流道的出口连通至芯片另一侧设置的废液池中;其制备方法主要是先制作一PDMS基片,再制作一带上凹槽的PDMS盖片,然后将基片和盖片贴合得到芯片半成品,再对芯片半成品中的各个流道进行改性处理,最后置入微珠并控制其装入量,完成制作。本发明微流控芯片的溶液混合效率高、溶液流速稳定、体积小、携带方便,其制作也相对简单容易,在检测三磷酸腺苷浓度的应用中具有不受环境湿度影响、灵敏度高、检测效果好等优点。
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公开(公告)号:CN100497521C
公开(公告)日:2009-06-10
申请号:CN200610136754.5
申请日:2006-11-28
Applicant: 湖南大学
IPC: C09K11/88
Abstract: 一种制备脂溶性硒化镉量子点溶液的方法,包括以下步骤:将硒粉和三正辛基膦加入到溶剂二芳基烷中,反应生成硒的储备液;氮气保护下,将镉原料和硬脂酸依次加入溶剂二芳基烷中,磁力搅拌下,缓慢加热,使镉原料全部溶解,得镉溶液;继续加热至260~28O℃,去除加热装置,将硒的储备液快速加入到剧烈搅拌的高温镉溶液中;维持反应体系的温度在240 ℃,取样,以氯仿作为溶剂,从而得到CdSe量子点溶液,随着取样时间的延长,所得量子点的荧光最大发射波长红移。本发明方法的优点为:所用溶剂价格便宜,稳定性强,该方法可获得不同尺寸的纳米粒子,且每种粒子都具有良好的单分散性能。
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公开(公告)号:CN101333436A
公开(公告)日:2008-12-31
申请号:CN200810032009.5
申请日:2008-08-06
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种多色光学编码硅壳纳米棒,该多色光学编码硅壳纳米棒为核壳型结构,其外壳材料为二氧化硅,内核材料为荧光编码的多聚赖氨酸,荧光编码的多聚赖氨酸含有荧光染料A和荧光染料B,荧光染料A和荧光染料B是荧光共振能量转移供体-受体对。本发明还公开了一种多色光学编码硅壳纳米棒的制备方法,它是将荧光染料A和荧光染料B与多聚赖氨酸反应制备荧光编码的多聚赖氨酸,以荧光编码的多聚赖氨酸为内核材料采用反向微乳液法将其包裹在二氧化硅基质中制备成多色光学编码硅壳纳米棒。本发明的多色光学编码硅壳纳米棒具有荧光强、生物相容性好、亲水性好、染料泄露少、性质稳定等优点。
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公开(公告)号:CN101002942A
公开(公告)日:2007-07-25
申请号:CN200710034215.5
申请日:2007-01-08
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明涉及一种PEG化脂质体纳米颗粒。本发明为颗粒表面PEG层中的一小部分末端修饰了对硝基苯碳酸酯(pNP)基团的脂质体纳米颗粒;本发明以氯甲酸对硝基苯酯(pNPC)对聚乙二醇两端进行活化,合成DPPE-PEG-pNP,将大豆磷脂,胆固醇,DPPE-PEG,DPPE-PEG-pNP以一定的摩尔百分比溶于有机溶剂中,用超声薄膜法制备脂质体纳米颗粒,在pH7.5~8.5的条件下,室温搅拌4~5小时,连接上活性分子;本发明的脂质体纳米颗粒制备过程简单易行,连接活性分子的条件温和,而且不影响物质的活性,连接的带氨基的活性分子具有广泛性。
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公开(公告)号:CN1978588A
公开(公告)日:2007-06-13
申请号:CN200610136754.5
申请日:2006-11-28
Applicant: 湖南大学
IPC: C09K11/88
Abstract: 一种制备脂溶性硒化镉量子点溶液的方法,包括以下步骤:将硒粉和三正辛基膦加入到溶剂二芳基烷中,反应生成硒的储备液;氮气保护下,将镉原料和硬脂酸依次加入溶剂二芳基烷中,磁力搅拌下,缓慢加热,使镉原料全部溶解,得镉溶液;继续加热至260~280℃,去除加热装置,将硒的储备液快速加入到剧烈搅拌的高温镉溶液中;维持反应体系的温度在240℃,取样,以氯仿作为溶剂,从而得到CdSe量子点溶液,随着取样时间的延长,所得量子点的荧光最大发射波长红移。本发明方法的优点为:所用溶剂价格便宜,稳定性强,该方法可获得不同尺寸的纳米粒子,且每种粒子都具有良好的单分散性能。
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公开(公告)号:CN1876673A
公开(公告)日:2006-12-13
申请号:CN200610031922.4
申请日:2006-07-04
Applicant: 湖南大学
IPC: C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种基于静电吸附原理,利用带电荷的超顺磁性硅壳纳米颗粒分离蛋白质的方法。本发明主要涉及两种超顺磁性硅壳纳米颗粒:带有负电荷的超顺磁性纯硅壳纳米颗粒和带有正电荷的超顺磁性氨基化硅壳纳米颗粒。通过控制溶液pH值,利用前者实现对目标碱性蛋白质(细胞色素C)的分离提取,利用后者实现对目标酸性蛋白质(牛血清白蛋白)的分离提取。与传统的分离技术相比较,该方法将分离和富集结合于一体,利用超顺磁性硅壳纳米颗粒较大的比表面积,提高了分离过程中颗粒与蛋白质分子间的作用速度,并且通过颗粒的超顺磁性降低了操作强度。该方法具有廉价、快速、简便等优点,在一般的实验条件下即可实现。
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