-
公开(公告)号：CN119662505A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411878199.8
申请日：2024-12-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/31 , C07K14/195 , A61K39/102 , A61K39/39 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种无抗性标记的猪霍乱沙门氏菌三基因缺失株(保藏号为CCTCC M 20242059)。该菌株先后缺失了毒力调节基因crp、介导二氨基庚二酸(DAP)合成的重要营养代谢基因asd、介导编码甘露糖‑6‑磷酸异构酶的重要碳代谢基因manA。本发明采用自杀载体以及SacB反向遗传构建猪霍乱沙门氏菌基因缺失突变株，得到无抗性的三基因缺失突变株。该三基因缺失突变株遗传背景清晰、无抗性标记，对小鼠的安全性和免疫保护性较好，能够帮助小鼠抵抗高致死剂量的猪霍乱沙门氏菌的攻击，由于缺失株中asd基因完全无痕缺失，将平衡致死系统质粒pya3493‑ApxIAN电转进入，重组菌株不仅能在无DAP的培养基中生长，还能够稳定表达外源蛋白ApxIAN，具有广阔的应用前景。
-
公开(公告)号：CN116555201A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310461880.1
申请日：2023-04-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域，公开了一种特异性结合MopdhD重组蛋白的单克隆抗体及应用，分泌特异性结合MopdhD重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株Mo‑F2于2023年3月15日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO:C202332。特异性结合MopdhD重组蛋白的单克隆抗体与Mo pdhD蛋白特异性结合，与Mo阳性血清竞争性结合pdhD蛋白。检测Mo血清抗体的竞争ELISA试剂盒以MopdhD重组蛋白为抗原、特异性结合MopdhD重组蛋白的单克隆抗体为竞争抗体制备而成。本发明的ELISA抗体检测试剂盒比用于检测Mo血清抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性。
-
公开(公告)号：CN110819684B
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN201910834074.8
申请日：2019-09-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开一种简单比较山羊支原体山羊肺炎亚种菌株毒力的方法。发明的方法就将等浓度的经复苏的山羊支原体山羊肺炎亚种接种于鸡胚上，再将接种后的鸡胚置于恒温箱内培养，定时检测鸡胚状态及死亡情况，统计各个菌株的鸡胚致死率，以此进行比较判定。本发明的方法具有操作简单、成本低、无需复杂动物饲养条件、实验动物易得、耗时短、重复性好等优点，大大减少动物试验工作量，避免了现有技术实验动物山羊存在价格较为昂贵、个体差异较大且饲养要求较高、试验操作复杂、试验周期长、工作量大等不足。
-
公开(公告)号：CN111323602A
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN202010178953.2
申请日：2020-03-15
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种筛选绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊肺炎亚种血清学阴性羊的iELISA方法，包括如下步骤：(1)将山羊支原体山羊肺炎亚种1801菌株接于MTB培养基中扩培后，菌液离心、灭菌、PBS超声重悬，分离得到抗原；(2)用所述抗原包被酶标板，37℃温箱1h后4℃过夜；加入封闭液，37℃封闭2h；加入200倍稀释的血清样品，37℃孵育1h；加入用5％脱脂奶粉稀释5000倍的兔抗羊二抗，37℃孵育1h；(3)用PBST洗板后加入TMB显色液，37℃孵育10min；加入终止液终止反应；酶标仪读取OD450nm值。本发明iELISA方法敏感性可达98％，操作简单，样本处理量大，不仅可用于Mccp和Mo两种病原血清学阴性羊的筛选，还可用于实验中Mccp抗体水平的监测。
-
公开(公告)号：CN106350472B
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201611072164.0
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种牛支原体液体培养基及其制备方法，涉及兽医生物技术领域。本发明的牛支原体液体培养基由基础培养基和辅助培养基混合构成，培养基的组成为：蛋白胨、葡萄糖、丙酮酸钠、新鲜酵母浸出液、L‑谷氨酰胺、L‑半胱氨酸、水解乳蛋白、转铁蛋白、胰岛素、少量马血清、青霉素、酚红、去离子水。本发明的牛支原体培养基有利于牛支原体的生长，活菌滴度达1010CCU/ml，明显高于现有技术培养基。此外，本发明培养基中血清含量仅为5%，为现有技术培养基血清含量的1/4～1/2。与现有技术相比，本发明培养基具有血清含量低、生长迅速和活菌滴度高的特点。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110256555A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910483526.2
申请日：2019-06-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种丝状支原体簇单克隆抗体及其制备方法和应用，所述丝状支原体单克隆抗体通过支原体培养和免疫原制备、动物免疫、细胞融合及阳性杂交瘤细胞筛选和克隆获得，所述支原体为山羊支原体山羊肺炎亚种M1601，细胞融合时髓瘤细胞和脾细胞的数量比为1/5～1/10，得到的丝状支原体簇单克隆抗体杂交瘤细胞株为5E5，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为C201972。所述的丝状支原体簇单克隆抗体可用于区分丝状支原体簇和细菌/病毒类病原体。本发明的杂交瘤细胞株能够分泌稳定的丝状支原体簇单克隆抗体特异性好，能够有效区分丝状支原体簇和其他常见反刍动物支原体。
-
公开(公告)号：CN106479936B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201611071307.6
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种绵羊肺炎支原体低血清培养基，含有以下组分：PPLO肉汤、丙酮酸钠、酚红、去离子水、乳糖、胰蛋白胨、新鲜酵母浸出液、胰岛素、L‑谷氨酰胺、L‑半胱氨酸、水解乳蛋白、转铁蛋白、青霉素和少量马血清；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的绵羊肺炎支原体培养基血清含量仅为5%，是现有技术培养基血清含量的1/4；培养绵羊肺炎支原体活菌滴度达7×109 CCU/ml，明显高于现有技术培养基。与现有技术相比，本发明的绵羊肺炎支原体低血清培养基具有血清含量低、生长迅速和活菌滴度高的特点。
-
公开(公告)号：CN109536625A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811514557.1
申请日：2018-12-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2527/101
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体的iiPCR检测方法及检测试剂盒。本发明通过以牛支原体的P80基因序列为模板，从P80基因克隆出包含R1序列的M.b序列，以该R1序列为目标设计探针M.b-specific-Probe；其中，所述M.b序列如SEQ ID NO：1所示。相应的，本发明的检测试剂盒，其成分除了商品化的Premix Ex Taq外，主要包括特别设计的牛支原体特异性的引物、探针及配套试剂：M.b-specific-Forward，M.b-specific-Reverse，M.b-specific-Probe，Nuclease-free water，阳性对照模板。本发明除了用于实验室常规检测牛支原体核酸外，特别适用于无实验室条件下(如基层兽医部门、养殖场等)的现场检测，具有高特异性和灵敏性，是一种快速、准确的牛支原体核酸检测试剂盒，具有良好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN105462884B
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201510950317.6
申请日：2015-12-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供鸭支原体培养基，由液体培养基和固体培养基组成，液体培养基由以下组分组成：去离子水，10%的醋酸铊溶液，PPLO肉汤，葡萄糖，蛋白胨，胰蛋白胨，1%的酚红，含L‑谷氨酰胺的CMRL‑1066培养基，灭活的马血清，酵母浸出液，青霉素，L‑半胱氨酸盐酸盐和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸；除添加琼脂粉，去掉酚红外，固体培养基其余组分与液体培养基相同。利用上述培养基对鸭支原体分离纯化：在固体培养基上分离菌落，将分离的菌落置于液体培养基中生长，然后进行液体培养物的过滤、稀释、涂板和挑单菌落增殖的纯化步骤，重复上述步骤直至得到纯化的鸭支原体。本发明的培养基可促进鸭支原体的生长，且分离纯化鸭支原体的成功率高。
-
公开(公告)号：CN103992974A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410217804.7
申请日：2014-05-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种绵羊肺炎支原体体外培养基，以及这种培养基的制备方法。本发明的绵羊肺炎支原体体外培养基制备方法是将：胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、乳糖、酵母浸出液和酚红混合后高压灭菌,待前述混合物晾凉至37℃以下后再在其中加入灭活健康猪血清100-200mL/L和经过灭菌水溶解的青霉素20万U/L，然后再用NaOH调pH值到7.4-7.8，得到培养基。本发明的培养基培养绵羊肺炎支原体仅24小时即可生长，生长滴度可达到10-10ccu，而且培养基的组成相比现有技术简单，成本更加低廉。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
108
records
(took 0.04 seconds)
