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公开(公告)号:CN115896215A
公开(公告)日:2023-04-04
申请号:CN202211296616.9
申请日:2022-10-21
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
Abstract: 本发明提供了一种阿糖类核苷一锅法生物合成的方法及组合物。其中,阿糖类核苷一锅法生物合成的方法包括:底物、尿嘧啶核苷磷酸化酶或嘧啶核苷磷酸化酶、以及嘌呤核苷磷酸化酶,共同混合后进行生物合成,一锅法直接制备获得阿糖类核苷。尿嘧啶核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:1所示的UP;嘧啶核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:2所示的PyNP;嘌呤核苷磷酸化酶包括SEQ ID NO:3所示的PNP;底物包括阿糖尿苷和底物碱基。能够解决现有技术中生物合成两步法制备阿糖类核苷操作复杂的问题,适用于酶催化领域。
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公开(公告)号:CN114875006A
公开(公告)日:2022-08-09
申请号:CN202210707289.5
申请日:2022-06-21
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
Abstract: 本发明提供了一种转氨酶突变体及手性胺化合物的制备方法。其中,该转氨酶突变体,包括(a)具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的蛋白质;或(b)具有SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的蛋白质;或(c)在(b)中的氨基酸序列的如下至少一个位点:Y89、L380、N86、Y85、T91、P83、K90、S417、S424、F301、G164、T452等,经过氨基酸突变且具有转氨酶功能的蛋白质;(d)与(a)、(b)或(c)中任一项限定的氨基酸序列具有80%以上同源性且具有转氨酶功能的蛋白质。能够解决现有技术中的转氨酶活性低的问题,适用于酶催化领域。
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公开(公告)号:CN114369583A
公开(公告)日:2022-04-19
申请号:CN202210033913.8
申请日:2022-01-12
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
IPC: C12N9/02 , C12N9/06 , C12N11/091
Abstract: 本发明提供了一种固定化酶及其在连续化生产中的应用。其中,固定化酶为聚乙烯亚胺修饰的固定化酶,包括:酶,酶包括胺脱氢酶和/或甲酸脱氢酶;以及载体,该载体为三聚氯氰活化的氨基型载体。解决了现有技术中固定化酶性能较差的问题,提高了固定化酶的催化活性和重复使用性,适用于酶固定化领域。
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公开(公告)号:CN106834244B
公开(公告)日:2021-07-06
申请号:CN201610971207.2
申请日:2016-11-04
Applicant: 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 , 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司 , 凯莱英医药化学(阜新)技术有限公司 , 吉林凯莱英医药化学有限公司
Abstract: 本发明提供了一种脯氨酸羟化酶及其应用。脯氨酸羟化酶包括(a)具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质;(b)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸的突变且具有脯氨酸羟化酶活性的蛋白质;或者(c)保留(b)中的一个或多个氨基酸的突变,具有脯氨酸羟化酶活性,且与(b)中蛋白质的氨基酸序列至少具有78%的同源性的蛋白质。以SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的蛋白质以及利用基因工程手段对其改造得到的突变体,具有比现有的脯氨酸羟化酶更高的催化专一性或者显著提高的催化活性。
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公开(公告)号:CN112430585B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202110107053.3
申请日:2021-01-27
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
Abstract: 本发明公开了一种酯酶突变体及其应用。其中,该酯酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生氨基酸突变的序列,发生氨基酸突变的位点包括N51G位点。本发明的酯酶突变体是在SEQ ID NO:1所示的酯酶的基础上,通过定点突变的方法进行突变,从而改变其氨基酸序列,实现蛋白质结构和功能的改变,再通过定向筛选的方法,得到具有上述突变位点的酯酶,因此这些酯酶突变体具有酶特异性大幅度提高的优势,并且酶活性也有相应提高,从而大幅度降低了酶的使用量,降低了工业生产中的成本。
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公开(公告)号:CN106497996B
公开(公告)日:2021-01-12
申请号:CN201610887640.8
申请日:2016-10-11
Applicant: 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 , 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司 , 凯莱英医药化学(阜新)技术有限公司 , 吉林凯莱英医药化学有限公司
Abstract: 本发明公开了一种手性醇的酶催化制备方法,包括:将前手性酮化合物与本发明提供的酮还原酶、辅酶混合,控制体系pH和温度,进行还原反应。本发明提供的酮还原酶用于由前手性酮化合物不对称还原制备手性醇具有较高的转化率和立体选择性,产物的纯度高于95.0%,ee值可高于99%。本发明提供的手性醇的酶催化制备方法,反应步骤简单,缩短生产周期,节约生产成本;反应条件温和,收率高,工艺条件稳定,反应较安全,操作简单,具备规模化生产的能力;对环境友好,减少了有机溶剂对环境的污染。
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公开(公告)号:CN111235140A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010353558.3
申请日:2020-04-29
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
IPC: C12N11/089 , C12N11/098 , C12N11/18
Abstract: 本发明提供了一种固定化酶、其制备方法及其应用。该固定化酶包括活化的PEI以及共价结合在活化的PEI上的酶,酶选自如下任意一种:转氨酶、酮还原酶、单加氧酶、氨裂解酶、烯还原酶、亚胺还原酶、氨基酸脱氢酶及腈水解酶。通过将酶与PEI固定,将酶固定于PEI形成的多聚网状结构之间,提高了机械稳定性,实现了酶的固定化,而且避免了在固定化过程中酶直接与戊二醛等交联剂的直接共价结合而降低活性。
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公开(公告)号:CN109796434A
公开(公告)日:2019-05-24
申请号:CN201910074570.8
申请日:2019-01-25
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
IPC: C07D333/48 , C12P17/00
Abstract: 本发明公开了一种硫培南侧链的合成方法。该合成方法包括以下步骤:以 为原料采用酮还原酶还原生成进而通过单加氧酶氧化生成 对进行对甲苯磺酰基保护后,再通过硫酰基保护得到目标产物 应用本发明的技术方案,使用酮还原酶和单加氧酶,分别进行第一步和第二步两步生物转化,再将第二步氧化产物进行Ts(对甲苯磺酰基)保护后,最后通过硫酰基保护得到目标产物,由于第一步和第二步均为生物转化,不需要通过乙酸乙酯萃取,减少了乙酸乙酯的用量。
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公开(公告)号:CN109022381A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810942385.1
申请日:2018-08-17
Applicant: 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司
Abstract: 本发明公开了氨基酸脱氢酶突变体及其应用。该氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:第64位、第94位、第133位、第137位、第148位、第168位、第173位、第183位、第191位、第207位、第229位、第248位、第255位和第282位;或者氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点,且与发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列。本发明的氨基酸脱氢酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势,其酶活相对于野生型氨基酸脱氢酶提高了大于50倍,并且酶特异性也有相应提高。
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公开(公告)号:CN104531628B
公开(公告)日:2018-10-30
申请号:CN201410814234.X
申请日:2014-12-23
Applicant: 凯莱英医药集团(天津)股份有限公司 , 凯莱英生命科学技术(天津)有限公司 , 天津凯莱英制药有限公司 , 凯莱英医药化学(阜新)技术有限公司 , 吉林凯莱英医药化学有限公司
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用。该脱氢酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO:9所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列,发生突变的氨基酸序列具有如下至少1个突变位点:第40位、第87位、第194位和第331位,且第40位的T突变为S、A或C;第87位的W突变为F、Y或H;第194位的V突变为I、L或E;第331位的R突变为A、K或M;或者,醇脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点,且与发生突变的氨基酸序列具有90%以上同源性的氨基酸序列。具有上述至少一个突变位点或者保留上述突变位点且与其具有90%以上氨基酸序列同源性的醇脱氢酶突变体,其立体选择性和酶活性大大提高。
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