表达DNase I、AIF或整合有该毒素的重组单链抗体的载体菌株及该菌株的应用
Abstract:
本发明提供了一种表达DNase I、AIF或整合有该毒素的重组单链抗体的载体菌株及该菌株的应用。该技术方案依托于一种特异性识别TEM1蛋白的单链抗体,结合减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009的肿瘤内特异性聚集及胞内侵袭的特性,携带人源毒素DNase I和Aif达到特异性杀伤肿瘤的效果。具体来看,本发明首先构建了Abvec‑Igk‑DNase I、Abvec‑Igk‑T18‑DNase I、Abvec‑Igk‑Aif、Abvec‑Igk‑T18‑Aif重组质粒,经扩增后通过电击转化的方式导入鼠伤寒沙门氏菌VNP20009株,利用减毒鼠伤寒沙门氏菌胞内侵袭的特性,以HEK293‑T细胞为宿主实现蛋白的表达,最后利用含青霉素、链霉素的血清培养基杀死细胞内外的减毒鼠伤寒沙门氏菌,使重组质粒释放至真核细胞中,经细胞破碎后即得到含有目的蛋白的上清液。
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