一种制备可实时示踪iPSCs源性神经元的方法
Abstract:
本发明属于生物医学技术领域,具体涉及一种制备可实时示踪iPSCs源性神经元的方法。采用Crispr/Cas9基因编辑技术将报告基因mRFP敲入到TUBB3等位基因中,使TUBB3编码序列与mRFP编码序列通过2A肽链连接,并进而制得含有TUBB3‑2A‑mRFP序列的人iPSCs记为hiPSCs‑TUBB3‑mRFP;最终制得的hiPSCs‑TUBB3‑mRFP高效分化为神经元。本发明所述方法,通过定向诱导分化程序,把hiPSCs‑TUBB3‑mRFP高效分化为神经元,从而为流式细胞仪高通量、特异性分选神经元提供了实验基础,并进一步为筛选神经系统药物、检测化合物/环境毒素的神经遗传毒性提供技术平台。
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