本发明属于稳定同位素示踪环境中有机污染物来源解析方面的分析方法领域，公开了一种测定有机胺单体氮稳定同位素的方法及其应用。该方法首先通过稀盐酸超声萃取环境样品中有机胺至水相，再利用含双(2‑乙基己基)磷酸酯的氯仿萃取至有机相中，采用氯甲酸异丁酯对有机胺的氨基进行衍生化生成氨基甲酸异丁酯，而后利用气相色谱/燃烧/稳定同位素比值质谱(GC/C/IRMS)实现混合有机胺中单体氮稳定同位素的分离和分析测定。本发明成功实现了对环境样品中有机胺单体氮稳定同位素的分离和分析测定，为示踪环境中有机胺源‑汇机制提供新兴有效的方法手段。