本发明提供了一种提高基因载体转染效率和/或转染精度的转染辅助试剂及其应用，所述转染辅助试剂包括聚乙二醇和/或其衍生物。本发明创造性地利用聚乙二醇作为辅助试剂进行基因转染，发现：(1)聚乙二醇或其衍生物可显著提高基因载体对体外细胞的转染效率，其中包括一些基因载体无法转染的细胞；(2)聚乙二醇或其衍生物可显著提高基因载体对活体组织的转染效率，并促进基因载体在活体组织中局域表达，从而在目标组织中实现高效、精准转基因表达；(3)聚乙二醇或其衍生物可长期促进基因载体高效、精准转染活体组织，并不会在活体组织中引发显著的副作用，例如细胞凋亡、严重的免疫反应、动物行为功能显著改变。