Invention Publication
- Patent Title: 一种GHR基因敲除的胰岛β细胞系及其构建方法和应用
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Application No.: CN202311796280.7Application Date: 2023-12-25
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Publication No.: CN117683727APublication Date: 2024-03-12
- Inventor: 吴英杰 , 孙杰 , 刘传宇 , 王宁 , 郭美华 , 刘波 , 姜如娇
- Applicant: 大连医科大学
- Applicant Address: 辽宁省大连市旅顺口区南路西段9号
- Assignee: 大连医科大学
- Current Assignee: 大连医科大学
- Current Assignee Address: 辽宁省大连市旅顺口区南路西段9号
- Agency: 北京品源专利代理有限公司
- Agent 宫美玲
- Main IPC: C12N5/10
- IPC: C12N5/10 ; C12N15/113 ; C12N15/55 ; A61K35/39 ; A61P3/10 ; C12R1/91
Abstract:
本发明公开了一种GHR基因敲除的胰岛β细胞系及其构建方法和应用。所述构建方法包括：设计sgRNA构建CRISPR/Cas9质粒载体，培养细胞进行细胞转染，提取基因组进行基因编辑的检测，PCR扩增后进行PCR扩增产物测序及T载体连接测序；所述细胞转染包括培养细胞至融合度为70‑80％时更换新鲜培养基，使用小分子转染试剂溶解质粒DNA。本发明成功构建了GHR基因敲除的胰岛β细胞系，操作方法简单高效。
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