Abstract:
본 발명은 유전자의 초기 코돈(initial codon), 즉 +2 내지 +13 코돈 중 하나 이상, 특히 +2 및 +3 코돈을 무작위로 변화시킨 후 이들을 세포 내로 도입하여 개별 유전자로 분리하고 콜로니 PCR에 의해 증폭한 후, 무세포 단백질 합성 시스템을 이용하여 각각의 유전자를 단백질로 발현시킴으로써, 목적하는 단백질 발현 수준을 제공하는 초기 코돈을 발굴하는 방법, 및 이를 이용한 재조합 단백질의 발현 조절 방법 및 생산 방법에 관한 것으로서, 단백질 생산에 있어 체계적이고 정확한 조절 수단이 될 수 있으며, 활성 단백질을 원하는 수준으로 고속으로 발현할 수 있다. 역단백질체학, 리버스 프로테오믹스, 초기 코돈, 고속 단백질 발현, 무세포 단백질 합성
Abstract:
A method for screening an initial codon, which provides target protein level is provided to express an active protein at high speed and synthesize signal peptide having expression intensity by regulating the expression intensity of signal peptide. A method for screening an initial codon, which provides expression level of target protein comprises: a step of changing the target gene in one or more site of +2 to +13 codon in random; a step of isolating individual gene and amplifying the isolated gene through colony PCR; a step of performing cell-free protein synthesis; and a step of selecting a codon by irradiating.