Abstract:
본 발명은 무세포 단백질 합성 시스템을 이용한 아미노산의 정량 방법에 관한 것으로, 구체적으로 (a) 목적 아미노산이 포함되지 않은 무세포 단백질 합성 반응 혼합물을 준비하는 단계; (b) 상기 무세포 단백질 합성 반응 혼합물에 목적 아미노산이 포함된 분석 시료를 혼합하여 무세포 단백질 합성을 수행하는 단계; (c) 상기 합성된 단백질의 신호를 측정하는 단계; 및 (d) 상기 측정된 신호의 세기를 표준 시료를 이용하여 제작한, 단백질의 신호에 따른 각 아미노산에 대한 표준 농도 곡선과 비교하여 목적 아미노산의 농도를 산출하는 단계를 포함하는 아미노산의 정량 방법, 상기 정량 방법을 이용하는 아미노산 대사 관련 질환의 진단을 위한 정보의 제공 방법, 아미노산 대사 관련 질환의 예방 또는 치료 물질의 스크리닝 방법, 및 트랜스아미나제 기질의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 아미노산의 정량 방법은 저렴한 비용으로 짧은 시간에 아미노산을 정량할 수 있으므로, 다양한 산업에서 유용하게 활용될 수 있다.
Abstract:
본 발명은 효소를 이용하여 pH를 조절하는 것을 특징으로 하는 무세포 단백질 합성 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 아미노산 탈카르복실화 효소를 이용하여 ATP의 재생 시 생성되는 수소이온을 제거함으로써, pH를 조절하는 것을 특징으로 하는 무세포 단백질 합성 방법에 관한 것이다. 본 발명의 무세포 단백질 합성 방법은 단백질의 발현량을 향상시킬 뿐만 아니라 발현된 단백질의 분리정제 없이 바로 활성분석에 활용할 수 있는 이점이 있다.
Abstract:
본 발명은 타겟 유전자 주형이 접합된 제 1 포획체 및 Ni-NTA(nitrilotriacetic acid)가 접합된 제 2 포획체가 결합된 마이크로비드가 담지된 하이드로 겔을 포함하는 동소 고정( in
situ ) 단백질 합성용 겔-매트릭스, 이의 제조방법, 상기 제조방법에 따른 단백질 동소 고정 어레이 및 이를 이용한 단백질의 검출 또는 분석방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 겔-매트릭스는 하나 또는 다종의 유전자를 단백질로 빠르게 합성할 뿐만 아니라, 복잡한 분리정제 과정을 필요로 하지 않는 특징이 있다. 또한, 단백질의 3차원적 구조를 유지할 수 있으므로, 항원항체 반응 등 단백질 검출 및 분석에서 유용하게 사용될 수 있는 것이다. 아울러, 다종의 유전자 접합이 가능하므로, 동시에 다양한 단백질을 합성할 수 있는 특징이 있으므로 단백질 개량기술, 생체 분자합성, 분자진단 및 합성 생물학 분야 등 단백질 관련 연구 및 산업분야에 유용하게 사용될 수 있다.
Abstract:
본 발명은 유전자의 초기 코돈(initial codon), 즉 +2 내지 +13 코돈 중 하나 이상, 특히 +2 및 +3 코돈을 무작위로 변화시킨 후 이들을 세포 내로 도입하여 개별 유전자로 분리하고 콜로니 PCR에 의해 증폭한 후, 무세포 단백질 합성 시스템을 이용하여 각각의 유전자를 단백질로 발현시킴으로써, 목적하는 단백질 발현 수준을 제공하는 초기 코돈을 발굴하는 방법, 및 이를 이용한 재조합 단백질의 발현 조절 방법 및 생산 방법에 관한 것으로서, 단백질 생산에 있어 체계적이고 정확한 조절 수단이 될 수 있으며, 활성 단백질을 원하는 수준으로 고속으로 발현할 수 있다. 역단백질체학, 리버스 프로테오믹스, 초기 코돈, 고속 단백질 발현, 무세포 단백질 합성
Abstract:
PURPOSE: A support and gene array for in situ generation of protein array is provided to quickly convert various kinds of DNA or mRNA to active protein of array form and enhance protein array analysis sensitivity. CONSTITUTION: A support for in situ generation of protein array contains a solid support and hydrogel which is coated on the solid support and comprise protein biosynthesis machinery. The hydrogel is agarose gel. The hydrogel is manufactured by spin coating in a film form. A gene array for in situ generation of protein array comprises the support for in situ generation of protein array and a genetic template spotted on the support.