公开(公告)号：KR1019990065234A

公开(公告)日：1999-08-05

申请号：KR1019980000446

申请日：1998-01-10

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 탁동섭 ,  권준헌 ,  김병한 ,  송재영 ,  강신영 ,  안수환

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/33

Abstract: 돼지 전염성위장염바이러스(Transmissible gastroenteritis virus ; TGEV)의 구조 단백질 중 스파이크 단백질은 TGEV를 중화할 수 있는 중화항체 생산을 유도하는 단백질로 알려져 있다. 설사로 폐사한 돼지로부터 TGEV를 분리 동정한 후 스파이크 유전자의 염기서열을 분석하고 이 자료를 토대로 유전자재조합방법을 이용하여 곤충바이러스인 바큘로바이러스 유전자에 TGEV 스파이크 유전자를 삽입하여 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 곤충세로(Sf9)에서 발현 시켰다. 발현된 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 기니픽에 접종했을 때 TGEV에 대한 중화항체를 생산함을 혈청중화시험법을 이용하여 확인할 수 있었다. 따라서 재조합 TGEV 스파이크 단백질을 이용하여 TGEV에 대한 중화항체가를 TGEV 특이 단크론항체를 이용한 효소면역검사법(monoclonal antibody capture enzyme linked immunosorbent assay : MACELISA)으로 검출할 수 있다. 현재 TGEV에 대한 항체가를 측정하는 방법은 조직배양을 이용한 바이러스 중화시험법으로 까다로운 조직배양과 검사기간이 4-5일정도 소요되나 본 발명에서 사용된 MACELISA의 단계를 재조합단백질 반응 단계까지를 장치(kit)화 할 경우 TGEV에 재한 중화항체를 3시간 이내에 검사할 수 있다.