公开(公告)号：KR1020040095824A

公开(公告)日：2004-11-16

申请号：KR1020030026809

申请日：2003-04-28

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장) ,  프린스톤바이오메디테크코포레이션 ,  (주)피비엠이스트

Inventor： 조인수 ,  현방훈 ,  이광녕 ,  엄재구 ,  계수정 ,  고영준 ,  구복경 ,  주이석 ,  안수환 ,  김인중 ,  김옥경 ,  김희정 ,  장기용 ,  신남규 ,  황서하 ,  강제모 ,  김창호 ,  고송우

IPC: G01N33/543

CPC classification number: G01N33/56983 ,  G01N33/526 ,  G01N33/558 ,  G01N2333/09 ,  Y10S436/811

Abstract: PURPOSE: A method for diagnosis of foot and mouth disease and a diagnostic kit are provided, thereby rapidly and accurately diagnosing foot and mouth disease with a small amount of a sample, and easily and rapidly diagnosing foot and mouth disease of domestic animals in the field. CONSTITUTION: The method for diagnosis of foot and mouth disease comprises the steps of: (1) introducing a testing sample into a loading area of a strip; (2) combining a detecting reagent with a marker with a target material in the sample to prepare a complex; (3) developing the complex on a membrane; and (4) measuring the appearance change of a reaction portion having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV in a certain region of the membrane. The diagnostic kit comprises a reaction portion(13) having one or more fixing phase selected from antigen, antibody or hapten which is obtainable through the immune reaction from FMDV; a strip(1') having a control portion for determining normal operation on a certain region; a testing sample introducing portion; and a housing with a displaying window(4) for displaying reaction results in the reaction portion(13) and the control portion. on the strip(1').

Abstract translation: 目的：提供口蹄疫诊断方法和诊断试剂盒，用少量样品快速，准确地诊断口蹄疫，容易快速诊断现场家畜的口蹄疫 。 规定：口蹄疫诊断方法包括以下步骤：（1）将检测样品引入条带的装载区域; （2）将检测试剂与标记物与样品中的靶材料组合以制备复合物; （3）在膜上显影复合物; 和（4）测量具有一个或多个定影相的反应部分的外观变化，所述固定相选自抗原，抗体或半抗原，所述抗原，抗体或半抗原可通过膜的某一区域中的FMDV通过免疫反应获得。 诊断试剂盒包括具有选自抗原，抗体或半抗原的一个或多个固定相的反应部分（13），其可通过FMDV的免疫反应获得; 具有用于确定某一区域正常操作的控制部分的条带（1'）; 测试样品引入部分; 以及具有用于在反应部（13）和控制部显示反应结果的显示窗（4）的壳体。 在条带（1'）上。

公开(公告)号：KR100267749B1

公开(公告)日：2000-11-01

申请号：KR1019980025039

申请日：1998-06-29

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 박종현 ,  송재영 ,  현방훈 ,  안동준 ,  차상호 ,  안수환

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/63

Abstract: 본 발명은 국내 돼지 사육농가에 심각한 경제적 피해를 야기시키는 돼지의 주요 전염병의 백신제조에 사용될 수 있는 발현 벡터 및 이를 이용하여 재조합 바이러스를 제조하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 발현벡터는 돼지아데노바이러스 4형의 E3 유전자 부위를 제거하여 E3 프로모터하에 삽입된 외래 유전자가 발현될 수 있도록 제작한 플라스미드이고, 유전자 재조합 돼지아데노바이러스 4형은 발현벡터에 외래 유전자를 삽입한 후, 이를 돼지아데노바이러스 4형 게놈 유전자와 대장균내에서 동질성 재조합(homologous recombination)하고, 이를 리포펙틴을 사용하여 돼지신장세포(porcine kindey)에 형질도입시켜 바이러스를 선발한 것이다. 한편, 본 발명의 발현벡터에 삽입될 수 있는 외래 유전자는 최대 약 4.0kb의 크기를 갖는 것으로, 예를 들면 돼지 유행성 설사병 바이러스 스파이크(spike) 유전자, 돼지 전염성 위장염 바이러스 스파이크 유전자 등이 있다.

公开(公告)号：KR100318093B1

公开(公告)日：2002-09-26

申请号：KR1019980037509

申请日：1998-09-11

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/86

Abstract: 본 발명은 돼지의 주요 전염병을 예방하기 위한 벡터백신으로 사용될 수 있는 재조합 돼지오제스키병 바이러스에 관한 것으로, 돼지오제스키병 바이러스 양산주(KFCC-11048)의 TK(Thymidine kinase)유전자를 결실시키고, TK 프로모터하에서 돼지 인터류킨-2(Interleukin-2; IL-2) 유전자가 발현될 수 있도록 삽입하는 것에 의해 병원성이 감소되고 세포면역 향상능을 갖는 벡터백신을 제공할 수 있다. 더구나, TK 유전자 결실 및 IL-2 유전자의 삽입에 더하여, gI 유전자를 결실시키고, β-갈락토시다제 유전자를 마커(marker) 유전자로 하여 삽입, 발현시킴으로써, β-갈락토시다제 유전자 대신 바이러스 병원체에 대한 방어항원을 코딩하는 유전자를 외래 유전자로 삽입, 발현할 수 있는 다가 벡터백신을 제공할 수 있다. 따라서, 본 발명의 벡터백신은 종래 예방약보다 면역 효과가 우수한 돼지 오제스키병의 예방약 생산에 사용될 수 있으며, 다른 바이러스등의 병원체에 대한 항원을 코딩하는 유전자를 외래유전자로 삽입하는 경우 다른 병원체의 예방약 생산에도 사용될 수 있다.

公开(公告)号：KR100293572B1

公开(公告)日：2001-07-12

申请号：KR1019980025041

申请日：1998-06-29

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 안수환 ,  정용찬 ,  정종문 ,  송재영

IPC: A61K9/127

Abstract: 본 발명은 pH 조절에 의해 리포좀의 막을 구성하는 분자 내의 탄화수소 사슬 말단을 서로 화학결합으로 결합시켜 안정성이 우수한 고분자화 리포좀을 제조하는 방법 및 약물전달체제에 있어 분해되지 않고 정확하게 발병부위에 도달하여 장시간에 걸쳐 서서히 약물을 투약할 수 있는 약물전달체로 유용하게 사용될 수 있는 그 용도에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR1020010056362A

公开(公告)日：2001-07-04

申请号：KR1019990057805

申请日：1999-12-15

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

IPC: A61K39/15

Abstract: PURPOSE: Provided is a diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) using a recombinant protein consisting of gp53 protein of bovine viral diarrhea virus(BVDV) expressed in an insect cell, as an antigen. CONSTITUTION: The diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) detects a neutralization antibody of BVDV by indirect Sandwich enzyme linked immunosorbent assay(IS-ELISA) using gp53 protein of BVD expressed in an insect cell. The recombinant protein is produced by an expression vector of gp53 protein of BVD in a transformed insect cells.

Abstract translation: 目的：提供使用由在昆虫细胞中表达的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的gp53蛋白质构成的重组蛋白作为抗原的牛病毒性腹泻（BVD）的诊断方法。 构成：牛病毒性腹泻（BVD）的诊断方法使用在昆虫细胞中表达的BVD的gp53蛋白通过间接夹心酶联免疫吸附测定（IS-ELISA）检测BVDV的中和抗体。 重组蛋白由转化的昆虫细胞中BVD的gp53蛋白的表达载体产生。

公开(公告)号：KR100272697B1

公开(公告)日：2000-11-15

申请号：KR1019980004830

申请日：1998-02-17

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

IPC: C12N15/86 ,  C12N15/33

Abstract: PURPOSE: Provided is a method for detecting the infectious bovine rhinotracheitis virus(IBRV)-specific neutralizing antibody by ELISA using gD protein of IBRV, thereby the IBRV-specific neutralizing antibody can be rapidly and exactly detected. CONSTITUTION: The recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV is produced by the steps of: inserting the K gene fragment of an IBRV PQ strain into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare a plasmid pPQ8H; inserting the fragment of pPQ8H into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare pPQM1.3; inserting the universal stop sequence 5'- TAATTAATTAA- 3' and a simian virus 40 polyadenylation signal into a plasmid pVL1393 to prepare a vector pVL-SV40p(A); ligating pVL-SV40p(A) with pPQ1.3 to produce the recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV. The method for detecting the IBRV-specific neutralizing antibody comprises the steps of: coating the purified anti-gD monoclonal antibody using a coating buffer and blocking-reacting with a blocking solution; coating-reacting gD protein of IBRV, which is produced by the recombinant baculovirus, by diluting it in PBS; reacting the coating-reacted gD protein with bovine serum and washing it with water; subjecting it to the anti-bovine conjugate-reaction with a serum diluting solution; and coloring it and measuring its optical density.

Abstract translation: 目的：提供使用IBRV的gD蛋白通过ELISA检测感染性牛鼻气管炎病毒（IBRV）特异性中和抗体的方法，从而可快速准确地检测IBRV特异性中和抗体。 构成：通过以下步骤产生产生IBRV的gD蛋白的重组杆状病毒：将IBRV PQ菌株的K基因片段插入质粒pBluescript SK（+）中以制备质粒pPQ8H; 将pPQ8H的片段插入质粒pBluescript SK（+）中以制备pPQM1.3; 将通用终止序列5'-TAATTAATTAA-3'和猿病毒40多聚腺苷酸化信号插入质粒pVL1393中以制备载体pVL-SV40p（A）; 将pVL-SV40p（A）与pPQ1.3连接以产生产生IBRV的gD蛋白的重组杆状病毒。 用于检测IBRV特异性中和抗体的方法包括以下步骤：使用涂布缓冲液涂覆纯化的抗gD单克隆抗体并与封闭溶液进行封闭反应; 由重组杆状病毒产生的IBRV的包被反应gD蛋白通过在PBS中稀释; 将涂覆反应的gD蛋白与牛血清反应并用水洗涤; 用血清稀释液进行抗牛共轭反应; 并着色并测量其光密度。

公开(公告)号：KR100267750B1

公开(公告)日：2000-11-01

申请号：KR1019980025040

申请日：1998-06-29

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

IPC: C12N15/86 ,  C12N15/33

Abstract: 본 발명은 국내 돼지 사육농가에 심각한 경제적 피해를 야기시키는 돼지의 주요 전염병 중 하나인 돼지 오제스키병의 백신 제조에 사용될 수 있는 발현 벡터 및 이를 이용하여 재조합 바이러스를 선발하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 발현벡터는 사람아데노바이러스 2형의 E3 유전자 부위를 제거하여 E3 프로모터 또는 메이져 래이트 프로모터(major late promoter; MLP)하에 삽입된 외래 유전자가 발현될 수 있도록 제작한 플라스미드이고, 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 발현벡터에 외래 유전자로서 돼지 오제스키병 바이러스 중요 방어 항원을 코딩하는 gp50 유전자를 삽입한 후, 이를 사람아데노바이러스 2형 게놈 유전자와 대장균내에서 동질성 재조합(homologous recombination)하고, 이를 리포펙틴을 사용하여 포유동물세포에 형질도입시켜 gp50 유전� � 재조합 바이러스를 선발한 것이다.
본 발명에 의해 선발된 gp50 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 축산 현장에서 많은 경제적 손실을 주는 돼지 오제스키병의 예방에 이용될 수 있다.

公开(公告)号：KR1019990065231A

公开(公告)日：1999-08-05

申请号：KR1019980000443

申请日：1998-01-10

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 송재영 ,  차상호 ,  박종현 ,  현방훈 ,  안동준 ,  안수환

IPC: G01N33/53

Abstract: 면역크로마토그라피법 이용 돼지오제스키병 항체검출은 항체에 감작된 골드 또는 라텍스 입자를 사용하며 오제스키바이러스 항원이 고정된 나이트로셀룰로우스막을 항체가 포함된 완충액에 침지하여 단시간내에 특정 항체를 검출하는 방법으로 돼지의 혈액으로부터 신속하게 오제스키바이러스에 대한 항체를 검사할 수 있다. 이는 야외에서도 항체검사가 가능하므로 돼지오제스키병을 검색하고 진단하는데 유용한 항체검사 킷트 제조방법을 제공한다. 특히 돼지오제스키병의 경우와 같이 항체검사를 신속하게 농장에서 실시할 수 있는 검사방법이 절실하게 필요하므로 면역크로마토그라피법을 이용한 항체검출법을 사용하면 개체검사를 실시하여 돼지의 오제스키병에 대한 항체보유 여부를 신속하게 판단할 수 있다.

公开(公告)号：KR1020130055038A

公开(公告)日：2013-05-28

申请号：KR1020110118179

申请日：2011-11-14

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 양동군 ,  오윤이 ,  조수동 ,  현방훈 ,  송재영 ,  안수환

IPC: C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  C07K16/08

Abstract: PURPOSE: A recombinant antibody for diagnosing porcine epidemic diarrhea virus is provided to easily maintain or store an antibody producing strain. CONSTITUTION: A method for preparing a recombinant antibody for diagnosing porcine epidemic diarrhea virus comprises: a step of preparing a recombinant baculovirus vector containing a DNA fragment of sequence number 1; a step of transfecting baculovirus full length DNA Bac-N-Blue and the recombinant baculovirus vector into an insect cell and preparing recombinant baculovirus; and a step of culturing the recombinant baculovirus in the insect cell. The vector is pBlueBac4.5His. The insect cell is sf-9 cell.

Abstract translation: 目的：提供用于诊断猪流行性腹泻病毒的重组抗体，以容易地维持或储存产生抗体的菌株。 构成：制备用于诊断猪流行性腹泻病毒的重组抗体的方法，包括：制备含有序列号1的DNA片段的重组杆状病毒载体的步骤; 将杆状病毒全长DNA Bac-N-Blue和重组杆状病毒载体转染入昆虫细胞并制备重组杆状病毒的步骤; 以及在昆虫细胞中培养重组杆状病毒的步骤。 载体是pBlueBac4.5His。 昆虫细胞是sf-9细胞。

公开(公告)号：KR100267744B1

公开(公告)日：2000-11-01

申请号：KR1019980000446

申请日：1998-01-10

Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

Inventor： 탁동섭 ,  권준헌 ,  김병한 ,  송재영 ,  강신영 ,  안수환

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/33

Abstract: PURPOSE: Provided are a genetic recombinant baculovirus and a recombinant spike protein of transmissible gastroenteritis virus(TGEV) manufactured therefrom. And a monoclonal antibody capture enzyme linked immunosorbent assay for detecting the antibody of TGEV using the same protein is also provided, thereby the antibody of TGEV can be rapidly detected. CONSTITUTION: The recombinant spike protein of TGEV is produced by the steps of: isolating and identifying TGEV from pigs died of diarrhea; analyzing the nucleotide sequence of spike protein of TGEV; inserting the TGEV spike gene into the baculovirus gene to produce a recombinant baculovirus(KFCC-11015); infecting the recombinant baculovirus into SF9 cells to express TGEV spike protein. The antibody of TGEV is produced by inoculating the expressed recombinant TGEV spike protein into Guinea pigs. The monoclonal antibody capture enzyme linked immunosorbent assay using TGEV spike protein that is produced from the recombinant baculovirus(KFCC-11015) in Guinea pigs as an antigen is used in detecting the neutralizing antibody of TGEV.

Abstract translation: 目的：提供遗传重组杆状病毒和由其制备的传染性胃肠炎病毒（TGEV）的重组穗蛋白。 还提供了使用相同蛋白质检测TGEV抗体的单克隆抗体捕获酶联免疫吸附测定法，从而可以快速检测TGEV抗体。 构成：TGEV的重组穗蛋白是通过以下步骤制备的：从腹泻死亡的猪中分离和鉴定TGEV; 分析TGEV刺突蛋白的核苷酸序列; 将TGEV刺突基因插入杆状病毒基因以产生重组杆状病毒（KFCC-11015）; 将重组杆状病毒感染到SF9细胞中以表达TGEV穗蛋白。 通过将表达的重组TGEV穗蛋白接种到豚鼠中来产生TGEV抗体。 使用从作为抗原的豚鼠中的重组杆状病毒（KFCC-11015）产生的TGEV尖峰蛋白的单克隆抗体捕获酶联免疫吸附测定用于检测TGEV的中和抗体。