一种妥布霉素单克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN104312978B

    公开(公告)日:2017-03-01

    申请号:CN201410510516.0

    申请日:2014-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种妥布霉素单克隆抗体及其制备方法与应用,属于食品安全免疫检测领域。该单克隆抗体是由保藏编号为CGMCC No.9307的小鼠杂交瘤细胞株G号(1A10)产生的。其制备方法为:(1)用戊二醛法将妥布霉素上的氨基活化后再与载体蛋白上的氨基偶联,得到的偶联物用硼氢化钠将戊二醛与氨基形成的西弗氏碱的C=N还原成稳定的C-N结构,即最终稳定的偶联物,作完全抗原。2)将步骤(1)的完全抗原经免疫、融合、筛选;扩大培养、小鼠腹腔诱导产腹水,得到用于特异性检测妥布霉素的单克隆抗体。(3)用DCC法活化丁二酸的羧基,将活化液与卵清蛋白氨基反应得到卵清蛋白-丁二酸的羧基化蛋白,透析后再应用EDC法将妥布霉素与蛋白上的羧基缩合制备筛选抗体的包被。

    一种基于手性自组装纳米传感器实现胞内端粒酶活性检测的方法

    公开(公告)号:CN106434852A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610832776.9

    申请日:2016-09-20

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种基于手性自组装纳米传感器实现胞内端粒酶活性检测的方法,属于材料化学技术领域。本发明包括端粒酶引物TE primer序列组装构建的手性大小金二聚体传感器,端粒酶引物错配TE mismatch序列组装构建的手性大小金二聚体传感器,两种大小金二聚体修饰穿膜肽,两种大小金二聚体传感器在细胞内手性信号随时间的变化,基于大小金二聚体的手性信号实现胞内端粒酶活性的检测,建立标准曲线等步骤实现。本发明提供了能够通过手性信号检测胞内端粒酶活性的方法,制备出了手性产率高,细胞中分散性好的金纳米粒子二聚体。

    一种基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B免疫检测方法

    公开(公告)号:CN105929150A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610273197.5

    申请日:2016-04-28

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: G01N33/54346 G01N21/658

    Abstract: 一种基于金银核壳结构拉曼增强效应的金黄色葡萄球菌肠毒素B免疫检测方法,属于免疫分析技术领域。包括:具有强拉曼增强效应的金银核壳结构的合成,检测肠毒素B的免疫分析方法的建立。以对硝基苯硫酚(4‑NTP)修饰15 nm金纳米粒子,用柠檬酸在金纳米粒子表面还原硝酸银形成9nm的银壳,从而得到内嵌拉曼信标4‑NTP的金银核壳结构。该结构本身具有很强的拉曼增强效应,且拉曼信号稳定均一,不易丢失。在金银核壳纳米粒子上标记肠毒素B单抗,微孔板上预先包被金黄色葡萄球菌肠毒素B的捕获抗体。样品中的肠毒素B首先被微孔板上的抗体捕获,再与金银核壳纳米粒子标记的抗体结合,板上的拉曼信号通过拉曼光谱仪扫描得到。本方法肠毒素B的检测限0.002ng/mL,显著低于传统的酶联免疫方法。

    一种液相制备手性银纳米链的方法

    公开(公告)号:CN104259477B

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201410510831.3

    申请日:2014-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种液相制备手性银纳米链的方法,属于材料化学技术领域。本发明先将反应瓶用王水浸泡洗净,晾干;在反应瓶中配制含有L?半胱氨酸或D?半胱氨酸和聚乙烯吡咯烷酮的水溶液;震荡混匀后,加入硝酸银水溶液孵育后,震荡条件下加入抗坏血酸水溶液,继续震荡,即得到手性银纳米链;整个反应控制在室温下进行。本发明制备手性银纳米链的方法简单快捷,成功制备出了手性银纳米链。

    一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法

    公开(公告)号:CN104017070B

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201410291378.1

    申请日:2014-06-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明中合成了由多菌灵的类似物2-氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到的具有羧基的半抗原H1,与载体蛋白偶联制备免疫原;基于异源包被可以进一步提高抗体的灵敏度,所以在ELISA操作中,用多菌灵的类似物氨基氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到半抗原H2与OVA偶联得到偶联物作为包被原。本发明制备的完全抗原呈现出特异性的多菌灵抗原决定簇,使得筛选出高特异性的多菌灵单克隆抗体成为可能。产生的抗体特异性高、灵敏度高,可用于建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,从而用于快速检测食品中的多菌灵残留。

    一株特异性抗头孢喹肟单克隆抗体杂交瘤细胞株2D4及其应用

    公开(公告)号:CN105567645A

    公开(公告)日:2016-05-11

    申请号:CN201610056172.X

    申请日:2016-01-28

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C07K16/44 C07K2317/92

    Abstract: 一株特异性抗头孢喹肟单克隆抗体杂交瘤细胞株2D4及其应用,属于食品安全免疫检测领域。本发明单克隆细胞株2D4已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC,保藏编号为CGMCC No.10872。本发明采用活化酯法将原药头孢喹肟与BSA偶联制备免疫原,头孢喹肟与OVA偶联制备包被原。经免疫后得到一株特异性抗头孢喹肟杂交瘤细胞株2D4。此细胞株分泌的单克隆抗体,仅特异性针对头孢喹肟,与其他头孢类抗生素头孢氨苄、头孢噻呋的交叉率分别为2.13%、6.31%,与其它头孢类抗菌素的交叉率均小于0.1%,因此具有很高的特异性。本发明获得的抗头孢喹肟单克隆抗体杂交瘤细胞株,不仅有较好的检测灵敏度和亲和力,且对其它头孢类抗菌素的交叉反应率低,可以达到特异性检测头孢喹肟的目的。

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