一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法

    公开(公告)号:CN104017070B

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201410291378.1

    申请日:2014-06-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明中合成了由多菌灵的类似物2-氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到的具有羧基的半抗原H1,与载体蛋白偶联制备免疫原;基于异源包被可以进一步提高抗体的灵敏度,所以在ELISA操作中,用多菌灵的类似物氨基氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到半抗原H2与OVA偶联得到偶联物作为包被原。本发明制备的完全抗原呈现出特异性的多菌灵抗原决定簇,使得筛选出高特异性的多菌灵单克隆抗体成为可能。产生的抗体特异性高、灵敏度高,可用于建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,从而用于快速检测食品中的多菌灵残留。

    一种百菌清人工抗原的合成方法

    公开(公告)号:CN103833845B

    公开(公告)日:2015-10-28

    申请号:CN201310644040.5

    申请日:2013-12-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种百菌清人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以百菌清原药与6-氨基己酸反应得到具有羧基产物为半抗原CTNH,再用碳二亚胺法将CTNH与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联得偶联物CTNH-BSA用作免疫抗原,将CTNH与载体蛋白鸡卵清白蛋白OVA偶联得偶联物CTNH-OVA用作包被抗原,用紫外法测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了百菌清人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析中,为以后人们的研究提供了必需的人工抗原。

    一种百菌清酶联免疫检测方法

    公开(公告)号:CN104020290A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410291523.6

    申请日:2014-06-26

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: G01N33/54386

    Abstract: 一种百菌清酶联免疫检测方法,属于酶联免疫检测(ELISA)技术领域。本发明公开了一种百菌清单克隆抗体酶联免疫检测方法,利用合成的百菌清免疫原免疫BALB/c小鼠得到单克隆抗体,以百菌清为标准品,以百菌清半抗原与OVA的偶联物作为包被原,建立了百菌清的间接ELISA方法,为百菌清的残留检测提供了快速高效的检测方法,最低检测限为0.06ng/mL、半数抑制量(IC50)为0.3ng/mL。免疫反应的高特异性和亲和性使ELISA检测百菌清具有极高的选择性和灵敏度。

    一株抗百菌清单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN104017774A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410291522.1

    申请日:2014-06-26

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一株抗百菌清单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于食品安全免疫学检测技术领域。本发明的一株抗百菌清单克隆抗体杂交瘤细胞株D号,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.9304。通过百菌清完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化后,通过背部皮下注射免疫BALB/c小鼠。第一次免疫用完全弗氏佐剂,之后都用不完全弗氏佐剂。将高效价IC50的小鼠的脾细胞通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合,经过间接竞争ELISA筛选和三次亚克隆,得到一株杂交瘤细胞株D号。此细胞株D号分泌的单克隆抗体,对百菌清具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为1.5μg/L),可以用于食品安全中百菌清的残留检测。

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