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公开(公告)号:CN104017070A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410291378.1
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K1/107 , C07K16/44 , G01N33/53
CPC classification number: C07K19/00 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K14/795 , C07K16/44
Abstract: 一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明中合成了由多菌灵的类似物2-氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到的具有羧基的半抗原H1,与载体蛋白偶联制备免疫原;基于异源包被可以进一步提高抗体的灵敏度,所以在ELISA操作中,用多菌灵的类似物氨基氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到半抗原H2与OVA偶联得到偶联物作为包被原。本发明制备的完全抗原呈现出特异性的多菌灵抗原决定簇,使得筛选出高特异性的多菌灵单克隆抗体成为可能。产生的抗体特异性高、灵敏度高,可用于建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,从而用于快速检测食品中的多菌灵残留。
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公开(公告)号:CN104130195B
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201410291510.9
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: C07D235/30 , C07K16/44 , G01N33/531 , G01N33/53
Abstract: 一种多菌灵半抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以2-氨基苯并咪唑为原料,经过3步化学反应得到多菌灵半抗原,采用液质联用技术和核磁共振技术对重要的中间产物和终产物进行鉴定和分析。本方法成功地合成了多菌灵半抗原,合成步骤安全有效,为建立多菌灵的酶联免疫分析方法提供了有利的条件,满足了国内对该研究的需要。
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公开(公告)号:CN104017070B
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201410291378.1
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/765 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07K1/107 , C07K16/44 , G01N33/53
Abstract: 一种高灵敏度的多菌灵完全抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明中合成了由多菌灵的类似物2-氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到的具有羧基的半抗原H1,与载体蛋白偶联制备免疫原;基于异源包被可以进一步提高抗体的灵敏度,所以在ELISA操作中,用多菌灵的类似物氨基氯苯并咪唑和6-氨基己酸反应得到半抗原H2与OVA偶联得到偶联物作为包被原。本发明制备的完全抗原呈现出特异性的多菌灵抗原决定簇,使得筛选出高特异性的多菌灵单克隆抗体成为可能。产生的抗体特异性高、灵敏度高,可用于建立酶联免疫吸附分析方法和胶体金试纸快速检测法,从而用于快速检测食品中的多菌灵残留。
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公开(公告)号:CN104130195A
公开(公告)日:2014-11-05
申请号:CN201410291510.9
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: C07D235/30 , C07K16/44 , G01N33/531 , G01N33/53
CPC classification number: C07D235/30 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/531 , G01N33/577 , G01N2430/00
Abstract: 一种多菌灵半抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以2-氨基苯并咪唑为原料,经过3步化学反应得到多菌灵半抗原,采用液质联用技术和核磁共振技术对重要的中间产物和终产物进行鉴定和分析。本方法成功地合成了多菌灵半抗原,合成步骤安全有效,为建立多菌灵的酶联免疫分析方法提供了有利的条件,满足了国内对该研究的需要。
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公开(公告)号:CN103833845B
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201310644040.5
申请日:2013-12-05
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/77 , C07K14/765 , G01N33/68 , G01N33/53
Abstract: 一种百菌清人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以百菌清原药与6-氨基己酸反应得到具有羧基产物为半抗原CTNH,再用碳二亚胺法将CTNH与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联得偶联物CTNH-BSA用作免疫抗原,将CTNH与载体蛋白鸡卵清白蛋白OVA偶联得偶联物CTNH-OVA用作包被抗原,用紫外法测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了百菌清人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析中,为以后人们的研究提供了必需的人工抗原。
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公开(公告)号:CN104020290A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410291523.6
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/54386
Abstract: 一种百菌清酶联免疫检测方法,属于酶联免疫检测(ELISA)技术领域。本发明公开了一种百菌清单克隆抗体酶联免疫检测方法,利用合成的百菌清免疫原免疫BALB/c小鼠得到单克隆抗体,以百菌清为标准品,以百菌清半抗原与OVA的偶联物作为包被原,建立了百菌清的间接ELISA方法,为百菌清的残留检测提供了快速高效的检测方法,最低检测限为0.06ng/mL、半数抑制量(IC50)为0.3ng/mL。免疫反应的高特异性和亲和性使ELISA检测百菌清具有极高的选择性和灵敏度。
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公开(公告)号:CN104017774A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410291522.1
申请日:2014-06-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 一株抗百菌清单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于食品安全免疫学检测技术领域。本发明的一株抗百菌清单克隆抗体杂交瘤细胞株D号,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.9304。通过百菌清完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化后,通过背部皮下注射免疫BALB/c小鼠。第一次免疫用完全弗氏佐剂,之后都用不完全弗氏佐剂。将高效价IC50的小鼠的脾细胞通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合,经过间接竞争ELISA筛选和三次亚克隆,得到一株杂交瘤细胞株D号。此细胞株D号分泌的单克隆抗体,对百菌清具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为1.5μg/L),可以用于食品安全中百菌清的残留检测。
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公开(公告)号:CN103833845A
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201310644040.5
申请日:2013-12-05
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/77 , C07K14/765 , G01N33/68 , G01N33/53
CPC classification number: C07K14/77 , C07K14/765 , C07K19/00 , G01N33/68 , G01N2430/00
Abstract: 一种百菌清人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以百菌清原药与6-氨基己酸反应得到具有羧基产物为半抗原CTNH,再用碳二亚胺法将CTNH与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联得偶联物CTNH-BSA用作免疫抗原,将CTNH与载体蛋白鸡卵清白蛋白OVA偶联得偶联物CTNH-OVA用作包被抗原,用紫外法测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了百菌清人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析中,为以后人们的研究提供了必需的人工抗原。
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