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公开(公告)号：CN104987361A
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201510418522.8
申请日：2015-07-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与苯噻菌酯抗体特异性结合的多肽，包括所述多肽在检测苯噻菌酯中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用蛋白A柱纯化的苯噻菌酯抗体对噬菌体展示随机环八肽库进行3轮淘选，淘选出与苯噻菌酯抗体结合的噬菌体克隆；随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增和质粒提取，通过噬菌体ELISA方法选择阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序获得多肽序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在苯噻菌酯检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的噬菌体酶联免疫分析方法可用于快速、灵敏、简便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。
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公开(公告)号：CN103613563B
公开(公告)日：2015-05-13
申请号：CN201310667544.9
申请日：2013-12-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D277/74 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及苯噻菌酯抗原、抗体的制备及其应用，属于免疫化学分析技术领域。苯噻菌酯化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸甲酯。在碱性条件下，通过对苯噻菌酯结构中羧酸酯进行水解，合成了人工半抗原，其化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸，将其分别于牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制备人工抗原。将人工抗原免疫BALB／c雌性小鼠，制得苯噻菌酯的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。
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公开(公告)号：CN103102415B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201210238321.6
申请日：2012-07-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及同时识别吡虫啉和甲基对硫磷农药的双特异性单克隆抗体及其制备方法，属于生物技术领域。用杂交-杂交瘤技术将分泌抗甲基对硫磷单克隆抗体的杂交瘤细胞和经吡虫啉抗原免疫的小鼠脾细胞进行融合，获得了能稳定分泌同时抗甲基对硫磷和吡虫啉农药的双特异性单克隆抗体FQ-D6。此抗体经过有效性验证证明可用于农业生产环境和农产品中甲基对硫磷和吡虫啉残留的快速灵敏检测。本发明涉及的同时抗甲基对硫磷及吡虫啉农药双特异性单克隆抗体制备技术简便可行，抗体的整个制备过程无需特别的仪器设备，容易工厂化规模生产。
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公开(公告)号：CN113999866B
公开(公告)日：2023-09-05
申请号：CN202111298003.4
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种高密度展示的噬菌粒载体，包括所述载体在随机多肽文库构建中的应用。本发明通过分子克隆技术，基于pIII展示的噬菌粒pComb3xss，构建了可用于高密度展示外源蛋白的噬菌粒载体pComb‑pVIII。该载体将外源蛋白展示于丝状噬菌体pVIII蛋白N端，通过柔性连接臂GGGSS将二者连接，由乳糖启动子和操纵子调控下游外源蛋白基因的表达。该载体引入了无法切割随机多肽编码序列的限制性核酸酶切位点，避免了随机多肽库多样性的丢失。本发明还涉及该噬菌粒载体在随机多肽文库构建中的应用。基于该噬菌粒构建的噬菌体展示随机多肽库，具有空载率低、库容量大、展示密度高等优点，在具有生物功能的多肽的筛选方面具有良好的应用价值。
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公开(公告)号：CN113831253B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202111298004.9
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07C229/42 , C07C227/08 , C07C51/353 , C07C57/60 , C07C51/36 , C07C57/58 , C07C201/08 , C07C205/56 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了二甲戊灵半抗原及其制备方法和应用。二甲戊灵半抗原采用从头合成法，五种半抗原分别从二甲戊灵的苯甲基、苯氨基、戊烷基末端引入带有羧基的连接臂。通过试验比较，在二甲戊灵母体苯环三号位甲基上引入连接臂的半抗原效果最好。利用该半抗原制备的单克隆抗体灵敏度高，特异性强。用间接竞争酶联免疫测定(ic‑ELISA)的方法测得其灵敏度(IC50)为0.53μg/L，检测范围(IC10‑IC90)为0.11‑2.59μg/L。该单克隆抗体与其他二硝基苯类除草剂均无交叉反应(CR＜1.1％)。此外，利用该单克隆抗体制备了检测灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低的二甲戊灵胶体金快速检测试纸条。该试纸条可用于检测农产品中二甲戊灵的残留，其检测限达25μg/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113563292B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202110682788.9
申请日：2021-06-18
Applicant: 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) , 南京农业大学
IPC: C07D311/16 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53
Abstract: 本发明适用于质量检测技术领域，提供了一种莨菪亭半抗原、人工抗原及其制备方法、抗体、应用；其中，所述莨菪亭半抗原的结构式如下所示：所述n为2‑4中的任一整数。本发明通过在莨菪亭的羟基基团上直接引入羧基基团，最大限度的保留莨菪亭的化学结构和特征，并可直接与载体蛋白偶联，为后续制备强特异性和高灵敏度抗体奠定了基础；并且，以此莨菪亭半抗原为基础制备莨菪亭人工抗原，由该莨菪亭人工抗原得到的抗体具有较高的效价、特异性和亲和力，能应用于烟叶等农产品及相关食品中莨菪亭快速、特异性检测。
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公开(公告)号：CN112924669B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110170874.1
申请日：2021-02-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开一种基于光学三原色的多色测流免疫层析试纸条及制备方法，通过将竞争免疫分析和非竞争免疫分析分别标记不同示踪物，并集成在一张试纸条上，基于相加和相减三原色的原理实现随着分析物浓度的变化，在检测线（T线）上呈现出不同颜色，提高半定量分析的准确性和直观性，试纸条的控制线（C线）会随着T线结合标记物量的不同也呈现出不同颜色，可用于校正检测结果，在定量分析中，多色信号可互为内在参比，提高了多色试纸条定量检测的准确性。
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公开(公告)号：CN105153280B
公开(公告)日：2018-10-30
申请号：CN201510418524.7
申请日：2015-07-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与苯噻菌酯免疫复合体特异性结合的多肽，包括所述多肽在检测苯噻菌酯中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用苯噻菌酯免疫复合体对噬菌体展示随机环八肽库进行3轮淘选，淘选出与苯噻菌酯免疫复合体结合的噬菌体克隆；随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增和质粒提取，通过非竞争噬菌体ELISA方法选择阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序获得多肽序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在苯噻菌酯检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的非竞争噬菌体酶联免疫分析方法可用于快速、灵敏、简便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。
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公开(公告)号：CN103820360B
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201410017230.9
申请日：2014-01-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N1/20 , A62D3/02 , C02F3/34 , B09C1/10 , C12R1/01 , A62D101/04 , A62D101/28 , C02F101/38
Abstract: 本发明属于微生物领域，涉及一株炔苯酰草胺降解菌W1，属于丛毛单胞菌属(Comamonas sp.)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2013年10月11日，保藏号为CCTCC NO：M2013464，16S rRNA基因序列在Genebank登录号为1680505。该菌可以在8h内降解100mg/L的炔本酰草胺达到90％。用途为：该菌株用于降解除草剂炔苯酰草胺，可用于受炔苯酰草胺污染的水体、土壤和农产品的生物净化。
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公开(公告)号：CN104974256A
公开(公告)日：2015-10-14
申请号：CN201510174884.7
申请日：2015-04-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种抗噻虫啉单克隆抗体及其应用，尤其是一种可特异性识别噻虫啉的单克隆抗体，以及所述单克隆抗体的用途，属于生物学领域。将其人工抗原免疫BALB/c雌性小鼠，将骨髓瘤细胞SP2/0与小鼠脾脏细胞进行细胞融合，制备得到杂交瘤细胞；通过系列筛选和亚克隆得到能稳定分泌抗噻虫啉单克隆抗体的杂交瘤细胞株；再将该杂交瘤细胞株注射小鼠腹内制得腹水；采用辛酸-硫酸铵法纯化小鼠腹水，制得噻虫啉的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中噻虫啉残留。
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