公开(公告)号：CN104046702B

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201410272493.4

申请日：2014-06-17

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  王鸣华 ,  刘凤权 ,  施海燕

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明涉及一种噬菌体免疫环介导等温扩增检测法，首先将噬菌体展示多肽与分析物共同竞争捕获抗体的结合位点，然后环介导等温扩增结合在捕获抗体上的噬菌体，最后对免疫环介导等温扩增反应产物进行分析及结果判定。本发明提供的方法利用噬菌体展示多肽，将免疫竞争和环介导等温扩增结合，实现对不含有核酸的小分子化合物的环介导等温扩增检测。本发明灵敏度高、实用性强，不需要昂贵的精密仪器。

公开(公告)号：CN103613563A

公开(公告)日：2014-03-05

申请号：CN201310667544.9

申请日：2013-12-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  袁玉龙 ,  华修德 ,  施海燕

IPC: C07D277/74 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577

CPC classification number: C07D277/74 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  C07K19/00 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及苯噻菌酯抗原、抗体的制备及其应用，属于免疫化学分析技术领域。苯噻菌酯化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸甲酯。在碱性条件下，通过对苯噻菌酯结构中羧酸酯进行水解，合成了人工半抗原，其化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸，将其分别于牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制备人工抗原。将人工抗原免疫BALB／c雌性小鼠，制得苯噻菌酯的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。

公开(公告)号：CN102875671A

公开(公告)日：2013-01-16

申请号：CN201210363827.X

申请日：2012-09-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  李明 ,  施海燕

IPC: C07K16/06 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明涉及噻虫胺抗原、抗体及其应用，属于免疫化学分析技术领域。专用于噻虫胺特异性多克隆抗体制备和酶联免疫吸附分析方法(ELISA)，及其在环境和农产品中噻虫胺残留的高灵敏快速检测。通过对噻虫胺噻唑环上氯原子进行取代，合成了半抗原，化学名为3-(5-((3-甲基-2-硝基胍)-基甲基)噻唑-2-巯基)丙酸，将其分别于牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制备免疫抗原和包被抗原。用免疫抗原免疫新西兰大白兔，获得噻虫胺的特异性多克隆抗体。建立的ELISA线性范围为1.1μg/L-2mg/L，检测限为1.1μg/L。本发明半抗原合成技术简便可行，抗体特异性高，适用于环境和农产品中大批量样品检测和现场监测。

公开(公告)号：CN101135683B

公开(公告)日：2011-06-01

申请号：CN200710133285.6

申请日：2007-10-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  施海燕 ,  李波

IPC: G01N33/53 ,  C07C69/40 ,  C07C63/331

Abstract: 本发明公开了一种联苯菊酯抗原、抗体及其应用，属于免疫化学分析技术领域，专用于联苯菊酯特异性抗体的制备及酶联免疫检测方法。合成了半抗原2-甲基-3-苯基苄基丁二酸酯(简称LBc)和2-甲基-3-苯基苯甲酸(简称LBy)，再将LBc与蛋白质偶联制备人工免疫抗原，免疫兔子获得联苯菊酯的特异性多克隆抗体，然后将LBy与蛋白质偶联制备包被抗原，最后利用合成的包被抗原和特异性抗体建立酶联免疫分析方法，联苯菊酯检测限达0.016mg/L，线性范围为0.01～50mg/kg，对大部分拟除虫菊酯及其代谢产物无明显的交叉反应。

公开(公告)号：CN101135683A

公开(公告)日：2008-03-05

申请号：CN200710133285.6

申请日：2007-10-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  施海燕 ,  李波

IPC: G01N33/53 ,  C07C69/40 ,  C07C63/331

Abstract: 本发明公开了一种联苯菊酯抗原、抗体及其应用，属于免疫化学分析技术领域，专用于联苯菊酯特异性抗体的制备及酶联免疫检测方法。合成了半抗原2－甲基－3－苯基苄基丁二酸酯(简称LBc)和2－甲基－3－苯基苯甲酸(简称LBy)，再将LBc与蛋白质偶联制备人工免疫抗原，免疫兔子获得联苯菊酯的特异性多克隆抗体，然后将LBy与蛋白质偶联制备包被抗原，最后利用合成的包被抗原和特异性抗体建立酶联免疫分析方法，联苯菊酯检测限达0.016mg/L，线性范围为0.01～50mg/kg，对大部分拟除虫菊酯及其代谢产物无明显的交叉反应。

公开(公告)号：CN113845570A

公开(公告)日：2021-12-28

申请号：CN202111125287.7

申请日：2021-09-24

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 华修德 ,  王鸣华 ,  尤天阳 ,  丁园 ,  施海燕 ,  周亮亮

IPC: C07K7/08 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与噻虫胺免疫复合体特异性结合的多肽，包括所述多肽在噻虫胺检测中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用噻虫胺免疫复合体对噬菌体展示随机十肽库进行淘选，筛选与噻虫胺免疫复合体特异性结合的噬菌体展示多肽；三轮淘选后，随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增，通过噬菌体ELISA方法验证阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序，获得多肽的氨基酸序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在噻虫胺检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的非竞争噬菌体酶联免疫分析方法可用于灵敏、准确、便捷、低成本的检测环境和农产品中噻虫胺残留。

公开(公告)号：CN103820360A

公开(公告)日：2014-05-28

申请号：CN201410017230.9

申请日：2014-01-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  赵百萍 ,  华修德 ,  施海燕

IPC: C12N1/20 ,  A62D3/02 ,  C02F3/34 ,  B09C1/10 ,  C12R1/01 ,  A62D101/04 ,  A62D101/28 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明属于微生物领域，涉及一株炔苯酰草胺降解菌W1，属于丛毛单胞菌属(Comamonas？sp.)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2013年10月11日，保藏号为CCTCC？NO：M2013464，16S？rRNA基因序列在Genebank登录号为1680505。该菌可以在8h内降解100mg/L的炔本酰草胺达到90％。用途为：该菌株用于降解除草剂炔苯酰草胺，可用于受炔苯酰草胺污染的水体、土壤和农产品的生物净化。