Abstract:
본 발명은 구제역 O형 백신주 Manisa의 전체 유전자 부위 중에서, 상기 구제역 O형 백신주 Manisa의 방어 항원인 P1 단백질을 코딩하는 유전자가, 구제역 SAT1형 WZ 지역형 바이러스의 방어 항원인 P1 단백질을 코딩하는 유전자로 치환된 재조합 유전자가 삽입된 플라스미드를 포함하는 재조합 구제역 바이러스 및 그의 제조방법을 제공한다.
Abstract:
본 발명은 구제역바이러스 유전자를 플라스미드에 클로닝한 후 실험실에서 재조합바이러스를 만들어 그 바이러스를 불활화 백신 종독주로 이용하는 것이다. 본 발명의 목적은 구제역 바이러스 한국 2002년 발생된 O형 돼지 유래바이러스를 기초로 하여 클로닝한 후 구조단백질(방어단백질 코딩 P1 부위)을 Cathay 주로 교체하는 것이며, 구제역 감염축과의 감별이 가능하다. 구제역 감염축과의 감별은 비구조단백질 (NSP)에 대한 항체를 검출함으로 감염임을 알수 있는 데 제작된 바이러스는 NSP 부위인 (3B region)의 일부가 결손되어 백신과 감별이 가능하다. 이 바이러스는 인위적인 서열을 삽입하여 바이러스를 제작하였고, 숙주동물로 알려진 돼지에서 증상을 나타내지 않아 돼지에서 병원성이 약화된 바이러스이다. 이 병원성이 약화된 바이러스를 이용하여 실험실내에서 배양하여 백신으로 제작이 가능하며, O형 중 Cathay 지역형 (홍콩, 중국 등지 발생되는 구제역 지역형)에 대하여 방어가 가능하며, 최초 1-2주내에 1회 접종만으로 방어될 수 있는 높은 양의 항체가 형성되는 장점을 지니고 있다.
Abstract:
본 발명은 구제역바이러스 유전자를 조작하여 야외주와 감별이 가능하고 실험실에서 병원성이 약화된 구제역 재조합바이러스에 관한 것이다. 본 발명의 목적은 구제역 바이러스 한국 2002년 발생된 O형 돼지 유래바이러스를 기초로하여 클로닝한 후 비구조단백질(3B 부위) 일부를 제거하고, 비구조단백질(3B 부위) 일부 서열을 인위적으로 교체하여 야외바이러스와 감별이 가능한 바이러스로 제작하였다. 구제역 감염축과의 감별은 비구조단백질 (NSP)에 대한 항체를 검출함으로 감염임을 알수 있는 데 제작된 바이러스는 NSP 부위인 (3B region)의 일부를 결손 또는 대체시켜 백신과 감별토록 하였다. 이 바이러스는 인위적인 서열을 삽입하여 바이러스를 제작하였고, 원래 돼지에서 분리된 2002년 구제역 바이러스는 돼지에서 숙주동물로 알려져 있으나, 본 재조합 바이러스는 돼지에서 증상을 나타내지 않은 병원성이 약화된 바이러스이다. 이 바이러스는 동물에서 병원성이 약화되어 소독제 실험 또는 항바이러스 실험 등 실험실내에서 다루기에 병원성 바이러스 보다 더욱 안전한 장점을 지니고 있다.
Abstract:
본 발명은 구제역 바이러스의 O형, A형 및 Asia 1형에 공통적인 면역반응성을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 구제역 바이러스 O형 VP1 사이트 A에 대한 특이적인 면역반응성과 바이러스 중화능을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 구제역 바이러스 A형 VP1 사이트 A에 대한 특이적인 면역반응성과 바이러스 중화능을 나타내는 단클론항체를 생산하는 하이브리도마 세포주, 상기 각 하이브리도마 세포주에 의해 생산되는 단클론항체, 상기 단클론항체를 포함하는 구제역 진단 시약, 상기 구제역 진단 시약을 포함하는 구제역 진단 키트 및 구제역 바이러스 중화항체 검출방법 또는 구제역 진단방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면 구제역 바이러스 혈청형에 대한 각각의 항체를 이용하여 구제역 바이러스 진단용 항원을 포획할 필요가 없고, 유전자 재조합 구제역 바이러스 구조단백질을 진단용 항원으로 사용함으로써 종래 차폐시설을 갖춘 실험실에서만 배양이 가능한 구제역 바이러스를 사용하던 방법에 비해 매우 편리하며, 구제역 바이러스 혈청형에 특이적인 단클론항체를 사용하여 각 축종별 이차항체를 따로 사용하는 번거로움 없이 중화항체 검출이 가능하다. 그리고 본 발명의 진단방법은 종래 기술에 비해 검출 민감도와 특이도가 우수하다. 구제역 바이러스, 하이브리도마, 단클론항체, 중화항체, 진단 시약, 진단 키트, 진단방법, 유전자 재조합 구조단백질
Abstract:
PURPOSE: A hybridoma cell line producing monoclonal antibody to foot-and-mouth disease virus and a method for detecting foot-and-mouth disease virus neutralization antibody are provided to ensure detection convenience without capture of antigen. CONSTITUTION: A hybridoma cell line(KCTC 11337BP) produces monoclonal antibody having common immunoreactivity to virus type O, A and Asia 1. A method for detecting foot-and-mouth disease virus neutralization antibody comprises: a step of fixing monoclonal antibody on a solid support; a step of washing to remove antibodies which are not fixed on the solid support; a step of reacting antigen for diagnosing foot-and-mouth disease virus on the solid support; a step of washing the antigens to remove antigens which are not bound to the solid support; and a step of reacting probe-conjugated monoclonal antibody with the antigen.