Abstract:
본 발명은 심근세포 특이적 발현을 유도하는 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 제1 리포터 유전자, 그리고 혈관내피세포 특이적 발현을 유도하는 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 제2 리포터 유전자를 함께 포함하는 심근세포 및 혈관내피세포 분화 모니터링용 재조합 발현벡터에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 심근 및 혈관내피세포로의 분화능을 가지고 있어 심혈관질환의 유전자 및 세포 치료 연구에 널리 이용되고 있는 중간엽 줄기세포내로 심근 또는 혈관내피세포 프로모터의 활성을 동시에 모니터링할 수 있는 이중 프로모터 기반 리포터유전자 발현벡터들을 도입한 후 심근세포 분화의 특이적인 모니터링을 하여 심혈관질환의 세포치료 후 이식된 세포의 분화 탐지 및 안전성 검증에 크게 기여할 수 있고, 더 나아가 심근 및 혈관내피세포 특이적인 발현이 확인된 본 발명의 프로모터 영역에 양전자 방사 단층 X선 사진법(PET) 또는 자기공명영상(MRI) 표지자들을 부착하여 생체내로 이식된 줄기세포의 심근 및 혈관내피세포로의 분화 추적 연구에 응용할 수 있어 심혈관질환의 줄기세포 치료 효능 및 안전성 확보에 크게 기여할 수 있다.
Abstract:
본 발명은 줄기세포에서 심근세포로의 분화 모니터링을 위한 재조합 발현벡터에 관한 것으로, 구체적으로 심근세포 특이적 발현을 유도하는 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 리포터 유전자를 포함하는 심근세포로의 분화 모니터링용 재조합 발현벡터 및 이를 이용한 심근세포로의 분화 모니터링 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 줄기세포가 심근세포계통으로 분화되었는가를 탐지할 수 있는 심근세포 특이 프로모터 서열에 리포터유전자가 부착된 발현벡터들을 구축할 수 있으며, 구축된 발현벡터를 줄기세포로 도입한 후 5-아자시티딘 처리에 의해 심근세포로 분화를 유도하고, 이어 리포터유전자의 발현이 심근세포로 분화된 세포에서만 발현되어짐을 면역염색법에 의해 입증함으로써, 줄기세포가 심근세포계통으로 분화되었는가를 탐지할 수 있음을 확인하였다.
Abstract:
PURPOSE: A biomarker containing MIG protein for diagnosing cardiovascular diseases is provided to minimize medical expenses and to simply diagnose or predict cardiovascular disease by once blood collection. CONSTITUTION: A biomarker for diagnosing cardiovascular diseases contains MIG protein(GenBank accession NM_002416) of which expression level is increased in blood. A composition for diagnosing cardiovascular diseases contains the MIG gene. A kit for diagnosing cardiovascular diseases contains the MIG gene. A composition for detecting the biomarker contains an agent for measuring blood MIG concentration.
Abstract:
A method for inducing the differentiation of the embryo bud cancer stem cell into the blood vessel endothelial cell is provided to induce the differentiation without adding a differentiation inhibitor by using cheap blood serum. A method for inducing the differentiation of the embryo bud cancer stem cell into the blood vessel endothelial cell comprises the steps of cultivating the embryo bud cancer stem cell in the culture medium comprising the basic medium and blood serum to form embryoid; and treating the embryoid with the vascular endothelial growth factor to induce the differentiation into the blood vessel endothelial cell.
Abstract:
본 발명은 혈관내피세포 특이적 발현을 유도하는 프로모터 및 이와 작동가능하게 연결된 리포터 유전자를 포함하는 혈관내피세포 분화 모니터링용 재조합 발현벡터 및 이를 이용한 혈관내피세포로의 분화 모니터링 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 줄기세포가 혈관내피세포계통으로 분화되었는가를 탐지할 수 있는 혈관내피세포 특이 프로모터 서열에 리포터유전자가 부착된 발현벡터들을 구축할 수 있으며, 구축된 발현벡터를 줄기세포로 도입한 후 VEGF 처리에 의해 혈관내피세포로 분화를 유도하고, 이어 리포터유전자가 혈관내피세포로 분화된 세포에서만 발현되어짐을 면역염색법에 의해 입증함으로써, 줄기세포가 혈관내피세포계통으로 분화되었는가를 탐지할 수 있음을 확인하였다.
Abstract:
A monitoring method of the differentiation to an endothelial cell using a recombinant expression vector containing a promoter and reporter gene inducing the endothelial cell is provided to treat as a gene therapy of cardiovascular disease and stem cell therapy. A recombinant expression vector pEGFP/Flk-1 or pEGFP/Tie-2 for monitoring the differentiation of endothelial cell comprises a promoter which induces the endothelial cell-specific expression and reporter gene which is connected to be operatable. The endothelial cell-specific promoter is the Flk-1 promoter of sequence number 1 (SEQ ID NO:1) and Tie-2 promoter of sequence number 2. The reporter gene is green fluorescence protein(GFP), CFP, YFP, or DsRed. A method for monitoring the differentiation of the endothelial cell comprises: a step of preparing a mesenchymal stem cell; a step of inducing a recombinant expression vector for monitoring the differentiation of endothelial cell into the mesenchymal stem cell; and a step of confirming the expression of reporter gene in the transformed mesenchymal stem cell.