两个花药发育特异启动子及应用

    公开(公告)号:CN107541512B

    公开(公告)日:2020-01-31

    申请号:CN201610481110.3

    申请日:2016-06-26

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,具体涉及两个花药发育特异启动子及应用。从拟南芥哥伦比亚野生型中得到两个花药后期高效特异表达并能受到高温诱导表达的启动子PAtCKL2和PAtCKL7,这两个启动子的核酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。这两个启动子在花药发育后期特异高效表达。通过高温处理启动子PAtCKL2和PAtCKL7的转基因拟南芥植株,表明在高温胁迫下PAtCKL2和PAtCKL7启动子能驱动GUS基因在拟南芥花药的早期组织中表达。还公开了所述启动子构建的表达盒的结构以及其在拟南芥和各作物中的基因工程改良,以最终创制雄性不育系或者改良高温胁迫下对雄性生殖器官发育的调控的应用。

    陆地棉基因组的精确高效编辑方法

    公开(公告)号:CN110283840A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910290886.0

    申请日:2019-04-11

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及陆地棉基因组的精确高效编辑方法。本发明对含有棉花内源启动子pGhU6-7的pRGEB32-GhU6.7-NPTⅡ载体进行改造,以LbCpf1蛋白取代原有的Cas9蛋白,构建在棉花中具有编辑能力的载体GhRBE3。选取GhCLA为目标基因验证GhRBE3在棉花中的应用。设计1个靶标,利用农杆菌介导的遗传转化将Cpf1基因编辑系统导入棉花基因组,对转基因植株进行Sanger测序和高通量测序,检测本发明在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率及脱靶效应。本发明具有良好的编辑效率和特异性。

    一种常温或高温下花粉活性快速定量的方法及应用

    公开(公告)号:CN109752226A

    公开(公告)日:2019-05-14

    申请号:CN201910010240.2

    申请日:2019-01-05

    Abstract: 本发明属于植物生理生化技术应用领域。具体涉及一种常温或高温下花粉活性快速定量的方法及应用。确定了常温和高温下花粉TTC染色液的配方、染色浓度和最适染色时间和适用范围,制备了组合染色溶液配方:1mol/L磷酸二氢钾5.23g,磷酸氢二钾14.03g,pH为7的磷酸钾缓冲液;再将8g的2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶于所得的磷酸钾缓冲液中,用蒸馏水定容至1L,使其终浓度为8g/L。本发明可用于对大批量材料进行花粉活性定量检测,省略了染色后的镜检操作,简化了大批量材料花粉活性鉴定的流程,适用于棉花,水稻等多种作物花粉活性鉴定。

    一种棉花抗枯萎病基因及其应用

    公开(公告)号:CN109295074A

    公开(公告)日:2019-02-01

    申请号:CN201811411360.5

    申请日:2018-11-24

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种棉花抗枯萎病基因及其应用。从棉花群体抗枯萎病鉴定和全基因组关联分析将陆地棉抗枯萎病基因定位在17号染色体1.7-2.1Mb的400kb的基因组区间内。利用病毒介导的基因沉默技术对这一基因组区间所有基因的表达进行抑制并接种鉴定后筛选得到棉花抗枯萎病主效基因GhFov1。该基因编码一种谷氨酸受体蛋白激酶,抗病的陆地棉中被沉默后极显著地降低了对枯萎病的抗性。转化烟草发现GhFov1蛋白可识别棉花枯萎病菌并激活免疫反应产生过敏性坏死。开发了一对能检测陆地棉中GhFov1基因型的引物,利用该引物和优化的PCR反应体系可对棉花种质资源和品种的枯萎病抗性进行评价。

    GhEXLB<base:Sub>2</base:Sub>基因在增强植物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN104694552B

    公开(公告)日:2017-06-23

    申请号:CN201510145634.0

    申请日:2015-03-30

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一个GhEXLB2基因在增强植物抗旱性中的应用。从棉花中克隆得到一个GhEXLB2基因,对其进行了相关的功能验证及应用。GhEXLB2基因cDNA序列如SEQ ID NO:1中第1‑1151位碱基对应的序列所示,其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还涉及构建一个超表达该基因的载体,通过遗传转化能提高棉花对干旱的耐受性。

    超表达GhJAZ1基因增强植物抗低温胁迫

    公开(公告)号:CN106497935A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201510562445.3

    申请日:2015-09-06

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。具体涉及超表达GhJAZ1基因增强植物抗低温胁迫。从棉花中克隆得到JAZ(JASMONATE-ZIM DOMAIN)家族蛋白基因GhJAZ1,该GhJAZ1基因的cDNA序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质序列如SEQ IDNO:2所示。本发明构建该基因的超表达载体,通过遗传转化方法获得转基因植株,验证表明本发明克隆的基因能提高棉花对低温胁迫的耐受性。

    一种棉花Phytosulfokine前体基因GhPSKP及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN103571850A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210260715.1

    申请日:2012-07-26

    Abstract: 本发明公开了一种棉花Phytosulfokine前体基因GhPSKP及制备方法和应用,从棉花纤维发育不同时期表达谱中分离出一条与其它植物PSKP基因高度同源的EST,生物信息学分析表明,该EST包含一个完整的ORF,将其命名为GhPSKP。该基因在纤维伸长各个时期高效表达,从陆地棉品种YZ1中提取10DPA纤维总RNA,利用反转录酶SuperscriptⅢ将其反转录合成cDNA,用引物GhPSKPF和GhPSKPR扩增出GhPSKP基因的全长cDNA。将扩增获得的PCR产物连入pGEM-T载体,筛选阳性克隆并测序,获得所需的基因全长cDNA。进一步证实该基因在棉花纤维快速伸长阶段优势表达。运用转基因手段在棉花体内超量表达该基因能够有效促进纤维的伸长。利用本发明可以有效促进棉花纤维的伸长,改良棉花纤维品质。

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