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公开(公告)号：KR1020140057790A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：KR1020120123980
申请日：2012-11-05
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
IPC: C12N15/63 , C12N15/85 , A01K67/027 , C12N5/10
Abstract: The present invention relates to a transgenic silkworm which produces a cocoon containing a bee venom-derived melittin antibiotic peptide and to a method for mass producing cocoons containing melittin antibiotic peptides using the same. More specifically, a recombinant expression vector which includes a gene construct is produced, wherein a marker gene regulating promoter, a marker gene, a silkworm-derived fibroin promoter, and a bee venom-derived melittin gene are mixed in order to be able to act; and a silkworm is transformed by means of the recombinant expression vector so that a transgenic silkworm which produces a cocoon containing melittin antibiotic peptide in silk can be produced. The transgenic silkworm produces the cocoon containing a large amount of melittin antibiotic peptides so as to be developed into a natural antibiotic agent which can be practically used as a livestock fodder additive and as a material for daily supplies such as cosmetics and toothpaste.
Abstract translation: 本发明涉及一种产生含蜂毒衍生的蜂毒素抗生素肽的茧的转基因蚕，以及一种大规模生产含有使用其的蜂毒肽抗生素肽的茧的方法。 更具体地，制备包含基因构建体的重组表达载体，其中混合标记基因调节启动子，标记基因，蚕源性丝氨蛋白启动子和蜂毒衍生的蜂毒素基因，以便能够起作用 ; 并通过重组表达载体转化蚕，从而可以生产在丝中产生含有蜂毒素抗生素肽的茧的转基因蚕。 转基因蚕产生含有大量蜂毒素抗生素肽的茧，以发育成天然抗生素，其可以实际用作牲畜饲料添加剂，并且作为日用品如化妆品和牙膏的材料。
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公开(公告)号：KR101374683B1
公开(公告)日：2014-03-17
申请号：KR1020120065146
申请日：2012-06-18
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 누에 유래 Dpp 단백질을 유효성분으로 함유하는 뼈 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 누에 유래 Dpp단백질 또는 상기 아미노산 서열을 코딩하는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 뼈 관련 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 의해, Dpp 유전자를 누에에서 분리해 내고, 이를 통해 뼈 형성에 필요한 조골세포 분화를 증가시켜 뼈 형성을 유도하는 누에 유래 Dpp 단백질을 포함하는 뼈 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물이 제공된다.-
23.发明授权인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 ＢＭＰ2/7-ＰＴＤ 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법 有权使用稳定细胞系编码人BMP2 / 7-PTD的稳定细胞系以有效地诱导和发展3维细胞培养
公开(公告)号：KR101359485B1
公开(公告)日：2014-02-10
申请号：KR1020110125546
申请日：2011-11-29
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 BMP2/7-PTD 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법에 관한 것이다.
본 발명의 인간 뼈 형성촉진인자 발현벡터 pCEP4-rhBMP2/7-PTD는 인간 BMP 단백질 유전자인 BMP2유전자와 BMP7유전자; 및 단백질 전달 펩타이드(PTD)를 포함하며, 도 4의 구조를 갖으며, 본 발명의 형질전환된 세포주는 상기의 인간 뼈 형성촉진인자 발현벡터 pCEP4-rhBMP2/7-PTD로 이루어지며, 인간 BMP 단백질 유전자의 지속발현 효과를 갖는 것이 특징이다.
또한, 본 발명의 3차원 세포배양방법은 상기의 형질전환된 세포주와 타겟(target)세포를 혼합하여 인간 BMP 단백질 유전자를 발현시킴으로써 타겟(target) 세포를 뼈 세포로 분화시키는 것이 특징이다.
본 발명에 의해, 고가인 BMP 단백질 사용을 획기적으로 줄일 수 있어 경제적이며, 인간 BMP 단백질과 동일한 고품질의 BMP 생산체계 구축을 통한 인공 뼈 발명에 효과적이며, 3차원 배양방법 발명으로 인공 뼈 발명을 위한 시간, 비용, 효율성 증대의 효과를 얻을 수 있다.-
公开(公告)号：KR101303695B1
公开(公告)日：2013-09-09
申请号：KR1020100101541
申请日：2010-10-18
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 저분자 실크 피브로인과 아가로스 겔을 이용한 3차원 지지체 및 그 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 3차원 지지체는 저분자 실크 피브로인과 아가로스 겔을 포함하는 것으로써, 상기 저분자 실크 피브로인은 전체중량에 대하여 0.01 ~ 0.05 중량%가 함유되는 것이 특징이다.
본 발명의 3차원 지지체의 제조방법은 아가로스를 준비한 후, 이를 액체 상태로 하이드로 겔화하여 아가로스 겔을 제조하는 단계와, 상기 아가로스 겔에 지지체 전체중량대비 0.01 ~ 0.05 중량%의 저분자 실크 피브로인 파우더를 넣고 혼합한 후, 이를 성형틀에 주입한 다음, 바로 고체화시킨 후 동결건조시키는 단계를 포함하여 구성된다.
본 발명에 의해, 기존의 방법에서 사용하는 조골세포로 분화를 유도하기 위하여 첨가하여 주는 골 형성 촉진인자들의 사용을 경감시키거나 무용하게 하여 비용 및 시간을 감소시키는 효과를 얻을 수 있게 되어 인공 뼈 또는 인체조직 재생을 목적으로 하는 신소재 개발에 이용가능한 3차원 지지체를 제공할 수 있게 된다.-
25.发明公开인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 ＢＭＰ2/7-ＰＴＤ 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법 有权使用稳定细胞系编码人BMP2 / 7-PTD的稳定细胞系以有效地诱导和发展3维细胞培养
公开(公告)号：KR1020130059526A
公开(公告)日：2013-06-07
申请号：KR1020110125546
申请日：2011-11-29
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A cell line which is transformed by a human BMP2/7-PTD expression vector for promoting osteogenesis in human, and a three dimensional cell culture method using the transformed cell line are provided to remarkably reduce BMP protein use, and to effectively create artificial bones by constructing a high quality BMP production system. CONSTITUTION: A human osteogenesis expression vector, pCEP4-rhBMP2/7-PTD, contains a BMP2 gene, a BMP7 gene, and a protein transduction domain(PTD). A method for preparing the expression vector comprises a step of inserting the BMP2 gene into a pCEP4 vector with a CMV promoter, and inserting the BMP7 gene and the PTD. A transformed cell line contains the expression vector.
Abstract translation: 目的：提供人BMP2 / 7-PTD表达载体转化人促进成骨的细胞系，使用转化细胞株进行三维细胞培养，显着降低BMP蛋白质的使用量，有效地形成人造 骨骼通过构建高质量的BMP生产系统。 构成：人成骨表达载体pCEP4-rhBMP2 / 7-PTD含有BMP2基因，BMP7基因和蛋白质转导结构域（PTD）。 制备表达载体的方法包括将BMP2基因插入具有CMV启动子的pCEP4载体，并插入BMP7基因和PTD的步骤。 转化的细胞系含有表达载体。
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Patent Agency Ranking26.发明公开
公开(公告)号：KR1020130054628A
公开(公告)日：2013-05-27
申请号：KR1020110120127
申请日：2011-11-17
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A promoter of a hemocyte-specific expression gene and a promoter active region are provided to obtain a recombinant protein and to save cost and time for developing a silk worm transformant which produces the recombinant protein. CONSTITUTION: A promoter of a hemocyte-specific expression gene is isolated from silk worm and is denoted by sequence number 1. The sequence of sequence number 1 has 579 bp. A promoter active region of the gene contains the promoter of hemocyte-specific expression gene. A method for transforming a silk worm comprises a step of using the promoter. A silk worm transformant is prepared using the promoter and produces recombinant protein.
Abstract translation: 目的：提供血细胞特异性表达基因和启动子活性区域的启动子以获得重组蛋白质，并节省开发产生重组蛋白质的丝虫转化体的成本和时间。 构成：从丝虫分离血细胞特异性表达基因的启动子，序列号1表示。序列号1的序列为579bp。 该基因的启动子活性区含有血细胞特异性表达基因的启动子。 用于转化丝虫的方法包括使用促进剂的步骤。 使用启动子制备丝虫转化体并产生重组蛋白。
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公开(公告)号：KR1020130007787A
公开(公告)日：2013-01-21
申请号：KR1020110068329
申请日：2011-07-11
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A promoter of silkworm embryonic stage-specific expression gene and an active region of the gene are provided to early determine transformation. CONSTITUTION: A silkworm embryonic stage-specific expression promoter is isolated from a silkworm and is denoted by sequence number 1. The promoter is denoted by sequence number 2 and is formed by deleting 268bp at sequence number 1. A maximum promoter active region of a silkworm embryonic stage-specific expression gene contains the promoter. A method for preparing the promoter comprises: a step of screening early embryo gene(EEG) through isolation of genetic resources with respect to time using Bombyx mori eggs and acquiring cDNA clone; a step of analyzing the characteristic and structure of total base sequence and predicted promoter region with respect to the clone of EEG-704 cDNA gene; a step of preparing deletion mutant constructs of 11 kinds of genes with respect to the promoter of EEG704 gene; a step of transducing each deletion mutant construct to pGL3-Basic carrier which do not has the promoter containing luciferase; a step of detecting luciferase activity with respect 11 kinds of deletion mutant constructs; and a step of comparing and analyzing luciferase activity with respect to p704A(1.4kb) and actin which have the strongest luciferase activity.
Abstract translation: 目的：提供蚕胚胎阶段特异性表达基因启动子和基因的活性区，以早期确定转化。 构成：蚕胚胎阶段特异性表达启动子从蚕中分离出来，由序列号1表示。启动子由序列号2表示，并通过删除序列号1的268bp而形成。蚕的最大启动子活性区 胚胎期特异性表达基因含有启动子。 一种制备该启动子的方法包括：通过使用家蚕卵分离相关时间的遗传资源并获取cDNA克隆来筛选早期胚胎基因（EEG）的步骤; 相对于EEG-704 cDNA基因的克隆分析总碱基序列和预测启动子区域的特征和结构的步骤; 相对于EEG704基因的启动子制备11种基因的缺失突变体构建体的步骤; 将每个缺失突变体构建体转导至不具有含有萤光素酶的启动子的pGL3-碱性载体的步骤; 关于11种缺失突变体构建体检测荧光素酶活性的步骤; 以及比较和分析荧光素酶活性相对于具有最强荧光素酶活性的p704A（1.4kb）和肌动蛋白的步骤。
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28.发明授权
公开(公告)号：KR101219646B1
公开(公告)日：2013-01-11
申请号：KR1020100101954
申请日：2010-10-19
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 아가로스를 이용한 다공성 3차원 지지체의 제조방법 및 이를 통해 제조된 다공성 3차원 지지체에 관한 것이다.
본 발명의 다공성 3차원 지지체의 제조방법은 공극 유도 물질인 아가로스를 준비한 후, 이를 액체 상태로 하이드로 겔화하여 아가로스 겔을 제조한 후, 이를 지지체를 형성하는 생체재료의 주원료와 함께 성형틀에 주입하여 가압성형하는 단계와 상기 성형물을 급속 냉각한 후, 동결건조시킨 다음 이를 에탄올로 고정시킨 후, 50℃ 이상의 물에 담구어 아가로스를 제거함으로써 다공성 및 통기성이 형성된 3차원 지지체를 제조하는 단계를 포함하여 구성된다.
본 발명에 의해, 지지체 내부에 공극뿐 아니라 공극 간의 연결 통로가 형성되도록 한 다공성 3차원 지지체의 제조방법이 제공되며, 지지체 표면에 부착한 조직의 세포가 지지체 내부로 침투하는 효과를 증대시킬 수 있게 되어 재생의 효율을 증대시킬 수 있는 다공성 3차원 지지체가 제공된다.-
公开(公告)号：KR1020120044167A
公开(公告)日：2012-05-07
申请号：KR1020100105590
申请日：2010-10-27
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A method for preparing a large amount of papiliocin using recombinant E.coli is provided to ensure high antibacterial activity against various bacteria. CONSTITUTION: A recombinant expression vector pET-KSI/papiliocin contains papiliocin gene. The gene is derived from Papilio xuthus larva. The E.coli BL21(DE3) is prepared by transforming by papiliocin gene-containing recombinant expression vector pET-KSI/Papiliocin. A method for preparing a large amount of recombinant papiliocin comprises: a step of preparing transformed recombinant E.coli; a step of culturing the transformed E.coli to express insoluble recombinant fusion protein; and a step of collecting papiliocin. A pharmaceutical composition for antibiotics contains the recombinant papiliocin as an active ingredient.
Abstract translation: 目的：提供使用重组大肠杆菌制备大量生物素的方法，以确保对各种细菌的高抗菌活性。 构成：重组表达载体pET-KSI / papiliocin含有乳糜酶基因。 该基因衍生自Papilio xuthus幼虫。 通过含有重组体表达载体pET-KSI / Papiliocin的重组表达载体转化制备大肠杆菌BL21（DE3）
。 制备大量重组体生物素的方法包括：制备转化重组大肠杆菌的步骤; 培养转化的大肠杆菌以表达不溶性重组融合蛋白的步骤; 和收集乳木素的步骤。 用于抗生素的药物组合物含有重组体乳酸菌素作为活性成分。 -
公开(公告)号：KR101825943B1
公开(公告)日：2018-02-08
申请号：KR1020150129052
申请日：2015-09-11
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
IPC: C12N15/85 , C12N15/89 , C07K14/435 , A01K67/033
Abstract: 본발명은누에형질전환기술을이용하여누에체액에서멜리틴항균펩타이드를생산하는것으로서, 본실험에서는누에유래의액틴3 프로모터를이용하여멜리틴항균펩타이드를발현시켰다. 누에형질전환체선발을위해서는 3xP3 프로모터와 EGFP 유전자를이용하여선발하였고, 300 개의누에알에미세주입하여 F1 세대에서 11 아구(bloods)의누에형질전환체를선발하였다. 선발된누에형질전환체는초기배단계의눈과신경조직, 유충과번데기그리고성충의눈에서 EGFP 형광단백질이발현되는것을확인할수 있었다. 또한 G2 세대누에형질전환체를 5령 5일유충까지사육후, 체액을채취한후 전처리하였다. 이시료를항균활성검정을하였고, 총 10마리의누에를선발할수 있었다. 이렇게선발된 누에는서로교배를통해서계대사육을하였다. 이러한과정으로선발된 G3세대누에형질전환체를이용하여앞의과정과동일한방법으로항균할성을검정하였다. 그결과대조군으로사용된시그마사의 melittin (0.016mg/ml)과거의동일한항균활성을나타내었다. 그럼으로이상의결과에서 melittin 항균펩타이드를생산하는누에형질전환체가성공적으로제작되었음을확인할수 있었다.
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