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公开(公告)号:CN113831253A
公开(公告)日:2021-12-24
申请号:CN202111298004.9
申请日:2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07C229/42 , C07C227/08 , C07C51/353 , C07C57/60 , C07C51/36 , C07C57/58 , C07C201/08 , C07C205/56 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了二甲戊灵半抗原及其制备方法和应用。二甲戊灵半抗原采用从头合成法,五种半抗原分别从二甲戊灵的苯甲基、苯氨基、戊烷基末端引入带有羧基的连接臂。通过试验比较,在二甲戊灵母体苯环三号位甲基上引入连接臂的半抗原效果最好。利用该半抗原制备的单克隆抗体灵敏度高,特异性强。用间接竞争酶联免疫测定(ic‑ELISA)的方法测得其灵敏度(IC50)为0.53μg/L,检测范围(IC10‑IC90)为0.11‑2.59μg/L。该单克隆抗体与其他二硝基苯类除草剂均无交叉反应(CR<1.1%)。此外,利用该单克隆抗体制备了检测灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低的二甲戊灵胶体金快速检测试纸条。该试纸条可用于检测农产品中二甲戊灵的残留,其检测限达25μg/L。
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公开(公告)号:CN113698394A
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202111125286.2
申请日:2021-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D405/06 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种丙环唑半抗原及其制备方法和应用。丙环唑半抗原采用从头合成法,在丙环唑的苯环上连接含有4个C原子的连接臂,并在连接臂末端引入可以和载体蛋白偶联的羧基基团。利用该半抗原制备的单克隆抗体灵敏度高,特异性强。用间接竞争酶联免疫测定(ic‑ELISA)的方法测得其灵敏度(IC50)为2.33μg/L,检测范围(IC10‑IC90)为0.26‑21.28μg/L。该单克隆抗体与丙环唑类似物均无交叉反应(CR<0.1%)。此外,利用该单克隆抗体制备了检测灵敏度高、特异性强、简便快速、成本低的丙环唑胶体金快速检测试纸条。该试纸条可用于检测农产品中丙环唑的残留,其检测限达5μg/L。
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公开(公告)号:CN112493251A
公开(公告)日:2021-03-16
申请号:CN202110020812.2
申请日:2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01N47/38 , A01N43/653 , A01P3/00
Abstract: 本发明涉及涉及一种含异菌脲和联苯三唑醇的组合物。该组合物以异菌脲和联苯三唑醇为活性成分,通过优化异菌脲和联苯三唑醇的质量比,最终选取异菌脲和联苯三唑醇的质量比为5∶1。本发明的组合物减轻了现有植物病原菌分别对异菌脲和联苯三唑醇的潜在抗药性风险;将异菌脲和联苯三唑醇组合后,二者之间具有明显的协同作用,同时又减少了用药量,从而使该组合物可以应用于防治油菜菌核病。
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公开(公告)号:CN104974256B
公开(公告)日:2018-06-05
申请号:CN201510174884.7
申请日:2015-04-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/44 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种抗噻虫啉单克隆抗体及其应用,尤其是一种可特异性识别噻虫啉的单克隆抗体,以及所述单克隆抗体的用途,属于生物学领域。将其人工抗原免疫BALB/c雌性小鼠,将骨髓瘤细胞SP2/0与小鼠脾脏细胞进行细胞融合,制备得到杂交瘤细胞;通过系列筛选和亚克隆得到能稳定分泌抗噻虫啉单克隆抗体的杂交瘤细胞株;再将该杂交瘤细胞株注射小鼠腹内制得腹水;采用辛酸‑硫酸铵法纯化小鼠腹水,制得噻虫啉的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中噻虫啉残留。
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公开(公告)号:CN103601807B
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201310134272.6
申请日:2013-04-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , C07C319/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。专用于特异性识别氨基甲酸肟脂类农药丁酮威单克隆抗体的制备,及其在农产品和农业生产环境中丁酮威残留的高灵敏快速检测。丁酮威半抗原与载体蛋白通过活泼酯法偶联形成完全抗原,用该完全抗原免疫Balb/C鼠,脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞通过杂交瘤技术制备杂交瘤细胞,获得了稳定分泌抗丁酮威的单克隆抗体。本发明抗体的制备技术可行:抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备,易于规模化生产。
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公开(公告)号:CN104046702B
公开(公告)日:2015-12-30
申请号:CN201410272493.4
申请日:2014-06-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种噬菌体免疫环介导等温扩增检测法,首先将噬菌体展示多肽与分析物共同竞争捕获抗体的结合位点,然后环介导等温扩增结合在捕获抗体上的噬菌体,最后对免疫环介导等温扩增反应产物进行分析及结果判定。本发明提供的方法利用噬菌体展示多肽,将免疫竞争和环介导等温扩增结合,实现对不含有核酸的小分子化合物的环介导等温扩增检测。本发明灵敏度高、实用性强,不需要昂贵的精密仪器。
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公开(公告)号:CN105153280A
公开(公告)日:2015-12-16
申请号:CN201510418524.7
申请日:2015-07-15
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及具有与苯噻菌酯免疫复合体特异性结合的多肽,包括所述多肽在检测苯噻菌酯中的应用。本发明采用噬菌体展示技术,用苯噻菌酯免疫复合体对噬菌体展示随机环八肽库进行3轮淘选,淘选出与苯噻菌酯免疫复合体结合的噬菌体克隆;随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增和质粒提取,通过非竞争噬菌体ELISA方法选择阳性噬菌体克隆,并将阳性克隆进行测序获得多肽序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在苯噻菌酯检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的非竞争噬菌体酶联免疫分析方法可用于快速、灵敏、简便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。
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公开(公告)号:CN104327186A
公开(公告)日:2015-02-04
申请号:CN201410359926.X
申请日:2014-07-25
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种抗联苯菊酯单克隆抗体及其用途,尤其是一种可特异性识别联苯菊酯的单克隆抗体,产生所述单克隆抗体的杂交瘤,以及所述单克隆抗体的用途,属于生物学领域。将其人工抗原免疫BALB/c雌性小鼠,将骨髓瘤细胞SP2/0与小鼠脾脏细胞进行细胞融合,制备得到杂交瘤细胞;通过系列筛选和亚克隆得到能稳定分泌抗联苯菊酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株;再将该杂交瘤细胞株注射小鼠腹内制得腹水;采用辛酸-硫酸铵法纯化小鼠腹水,得到所述的单克隆抗体。制得联苯菊酯的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中联苯菊酯残留。
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公开(公告)号:CN103613563A
公开(公告)日:2014-03-05
申请号:CN201310667544.9
申请日:2013-12-11
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D277/74 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/577
CPC classification number: C07D277/74 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , C07K19/00 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及苯噻菌酯抗原、抗体的制备及其应用,属于免疫化学分析技术领域。苯噻菌酯化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸甲酯。在碱性条件下,通过对苯噻菌酯结构中羧酸酯进行水解,合成了人工半抗原,其化学名称为2-[[(5-甲氧基-2-苯并噻唑)-硫甲基]-α-(E)-甲氧基亚甲基]苯乙酸,将其分别于牛血清蛋白和卵清蛋白偶联制备人工抗原。将人工抗原免疫BALB/c雌性小鼠,制得苯噻菌酯的特异性单克隆抗体。这种抗体与其他化合物不发生交叉反应。用该抗体建立的酶联免疫层析分析方法可用于快速、灵敏、方便和廉价检测环境和农产品中苯噻菌酯残留。
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公开(公告)号:CN103589688A
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201310365944.4
申请日:2013-08-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原,进而制备完全抗原,免疫Balb/C鼠,通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体,并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明抗体的制备技术可行,抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备,易于规模化生产。
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