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公开(公告)号：CN103589688A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310365944.4
申请日：2013-08-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原，进而制备完全抗原，免疫Balb/C鼠，通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体，并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明抗体的制备技术可行，抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备，易于规模化生产。
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公开(公告)号：CN118515730A
公开(公告)日：2024-08-20
申请号：CN202410607423.3
申请日：2024-05-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种与虫酰肼免疫复合物特异性结合的多肽，以及所述多肽在虫酰肼免疫检测中的应用。本发明利用虫酰肼单克隆抗体与虫酰肼形成的免疫复合物，从噬菌体展示随机多肽库中淘选出特异性结合的多肽，通过ELISA和一代测序，获得了阳性克隆及其多肽序列。基于最佳的多肽所建立非竞争噬菌体ELISA的半饱和浓度为0.10ng/mL，线性范围为0.035‑0.325ng/mL。所建立的非竞争ELISA的灵敏度低于已报道的虫酰肼免疫检测方法。同时基于抗免疫复合物多肽所建立的非竞ELISA在检测实际样品中的虫酰肼残留的平均回收率在82.6％～99.5％之间。综上所述，本发明提供的抗虫酰肼抗体免疫复合物多肽具有制备简单，灵敏度高，实用性好的特点。
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公开(公告)号：CN118388595A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410607463.8
申请日：2024-05-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种与丙环唑免疫复合物特异性结合的多肽，以及所述多肽在丙环唑免疫检测中的应用。本发明利用丙环唑单克隆抗体与丙环唑形成的免疫复合物，从噬菌体展示随机多肽库中淘选出特异性结合的多肽，通过ELISA和一代测序，获得了阳性克隆及其多肽序列。基于最佳的多肽所建立非竞争噬菌体ELISA的半饱和浓度为0.06ng/mL，高于目前所报道的丙环唑免疫检测方法。可用于快速、灵敏、低成本、高特异性地检测环境和农产品中丙环唑残留。
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公开(公告)号：CN117384254A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311372853.3
申请日：2023-10-23
IPC: C07K7/06 , C07K16/44 , C12N15/11 , G01N33/53 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种与二甲戊灵抗体免疫复合物特异性结合的多肽，以及所述多肽在二甲戊灵免疫检测中的应用。本发明利用二甲戊灵单克隆抗体与二甲戊灵形成的免疫复合物，从噬菌体展示随机多肽库中淘选出特异性结合的多肽，通过ELISA和一代测序，获得了阳性克隆及其多肽序列。基于最佳的多肽所建立非竞争噬菌体ELISA的半饱和浓度为0.15ng/mL，高于目前所报道的二甲戊灵免疫检测方法。本发明还涉及该多肽在二甲戊灵免疫层析试纸条上的应用。通过化学合成得到的无噬菌体抗免疫复合物多肽建立的非竞争免疫层析试纸条对二甲戊灵的可视检测限为2.5ng/mL，可用于快速、灵敏、低成本、高特异性地检测环境和农产品中二甲戊灵残留。
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公开(公告)号：CN110938116B
公开(公告)日：2022-08-23
申请号：CN201910534366.X
申请日：2019-06-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/00 , G01N33/533 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种多价苯噻菌酯模拟表位多肽及其应用，尤其是一种与苯噻菌酯单克隆抗体特异性结合的多价模拟表位多肽，以及所述多价多肽在免疫检测中的应用，属于生物技术领域。基于苯噻菌酯噬菌体展示多肽模拟表位的氨基酸序列，以赖氨酸为支架和间隔臂，固相合成获得多价模拟表位多肽；将多价多肽的氮端乙酰化，碳端的赖氨酸侧链提供唯一的游离氨基用于标记。这种多价模拟表位多肽与苯噻菌酯单克隆抗体的亲和力是单价模拟表位多肽的13.6倍，在均相免疫分析方法中可以显著降低检测方法的背景信号，提高检测分析方法的敏感性。该多价模拟表位多肽可作为化学合成半抗原的替代物，建立均相、一步的免疫检测方法，用于快速、灵敏、方便和经济的检测环境和农产品中残留的苯噻菌酯。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110567929B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN201910965914.4
申请日：2019-10-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/558 , G01N33/68 , G01N33/533
Abstract: 本发明涉及一种氯噻啉的双信号侧流免疫层析检测方法，首先重组示踪物与分析物共同竞争偶联在胶体金上的分析物抗体的结合位点，随后重组示踪物被抗His‑tag抗体捕获，对于色度信号，可直接再自然光源下用相机拍照，对于荧光信号，将试纸条放置于多功能成像仪中拍照，随后对图像进行分析及结果判定。本发明提供的方法利用噬菌体展示多肽模拟表位与增强型绿色荧光蛋白的重组蛋白为荧光供体，以抗氯噻啉抗体偶联的胶体金颗粒为荧光受体，根据荧光内滤效应，以侧流层析的方式实现对小分子化合物的检测。本发明灵敏度高、快速、简便、经济、实用性强，可以对小分子的定量、在线检测。
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公开(公告)号：CN113999866A
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202111298003.4
申请日：2021-11-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及一种高密度展示的噬菌粒载体，包括所述载体在随机多肽文库构建中的应用。本发明通过分子克隆技术，基于pIII展示的噬菌粒pComb3xss，构建了可用于高密度展示外源蛋白的噬菌粒载体pComb‑pVIII。该载体将外源蛋白展示于丝状噬菌体pVIII蛋白N端，通过柔性连接臂GGGSS将二者连接，由乳糖启动子和操纵子调控下游外源蛋白基因的表达。该载体引入了无法切割随机多肽编码序列的限制性核酸酶切位点，避免了随机多肽库多样性的丢失。本发明还涉及该噬菌粒载体在随机多肽文库构建中的应用。基于该噬菌粒构建的噬菌体展示随机多肽库，具有空载率低、库容量大、展示密度高等优点，在具有生物功能的多肽的筛选方面具有良好的应用价值。
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公开(公告)号：CN113845570A
公开(公告)日：2021-12-28
申请号：CN202111125287.7
申请日：2021-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K7/08 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与噻虫胺免疫复合体特异性结合的多肽，包括所述多肽在噻虫胺检测中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用噻虫胺免疫复合体对噬菌体展示随机十肽库进行淘选，筛选与噻虫胺免疫复合体特异性结合的噬菌体展示多肽；三轮淘选后，随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增，通过噬菌体ELISA方法验证阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序，获得多肽的氨基酸序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在噻虫胺检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的非竞争噬菌体酶联免疫分析方法可用于灵敏、准确、便捷、低成本的检测环境和农产品中噻虫胺残留。
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公开(公告)号：CN112924669A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110170874.1
申请日：2021-02-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N21/78
Abstract: 本发明公开一种基于光学三原色的多色测流免疫层析试纸条及制备方法，通过将竞争免疫分析和非竞争免疫分析分别标记不同示踪物，并集成在一张试纸条上，基于相加和相减三原色的原理实现随着分析物浓度的变化，在检测线（T线）上呈现出不同颜色，提高半定量分析的准确性和直观性，试纸条的控制线（C线）会随着T线结合标记物量的不同也呈现出不同颜色，可用于校正检测结果，在定量分析中，多色信号可互为内在参比，提高了多色试纸条定量检测的准确性。
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公开(公告)号：CN110938116A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201910534366.X
申请日：2019-06-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/00 , G01N33/533 , G01N33/558 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种多价苯噻菌酯模拟表位多肽及其应用，尤其是一种与苯噻菌酯单克隆抗体特异性结合的多价模拟表位多肽，以及所述多价多肽在免疫检测中的应用，属于生物技术领域。基于苯噻菌酯噬菌体展示多肽模拟表位的氨基酸序列，以赖氨酸为支架和间隔臂，固相合成获得多价模拟表位多肽；将多价多肽的氮端乙酰化，碳端的赖氨酸侧链提供唯一的游离氨基用于标记。这种多价模拟表位多肽与苯噻菌酯单克隆抗体的亲和力是单价模拟表位多肽的13.6倍，在均相免疫分析方法中可以显著降低检测方法的背景信号，提高检测分析方法的敏感性。该多价模拟表位多肽可作为化学合成半抗原的替代物，建立均相、一步的免疫检测方法，用于快速、灵敏、方便和经济的检测环境和农产品中残留的苯噻菌酯。
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