微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒

    公开(公告)号:CN101093224A

    公开(公告)日:2007-12-26

    申请号:CN200710119211.7

    申请日:2007-07-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒。该微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒,包括包被的微囊藻毒素-LR多克隆抗体或单克隆抗体和酶标抗原;所述酶标抗原中的抗原为完全抗原A;所述完全抗原A按照如下方法制备:在微囊藻毒素-LR的第七位氨基酸残基N-甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基,得到经氨基修饰的微囊藻毒素-LR;再将该经氨基修饰的微囊藻毒素-LR与载体蛋白偶联得到所述微囊藻毒素-LR与载体蛋白的偶联物,即完全抗原A。本发明的微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒检测范围在0.08μg/L-16.30μg/L之间,定量检测区间在0.20μg/L-10.70μg/L之间,检测时间1.5小时,可同时检测上百个样品,平均回收率(98.8±4.7)%,批内误差小于10%,能进行环境样品中微囊藻毒素-LR的大规模快速筛查和预警监测。

    大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN1935845A

    公开(公告)日:2007-03-28

    申请号:CN200610113829.8

    申请日:2006-10-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与应用,其目的是提供一种大肠杆菌鞭毛多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤:1)分离出大肠杆菌;2)将分离的大肠杆菌传代培养至少3次后,用含体积百分浓度为0.1-1.0%甲醛的生理盐水灭活,再用生理盐水制成菌悬液,得到大肠杆菌鞭毛抗原;3)将大肠杆菌鞭毛抗原免疫动物;4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清,得到大肠杆菌鞭毛多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌鞭毛多克隆抗体具有特异性高,纯度及效价高(大于25600),可长期保存的优点,将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中,将具有精确性、灵敏度高和检测步骤少的优势,应用前景广阔。

    大肠杆菌破碎全菌体多克隆抗体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN1935844A

    公开(公告)日:2007-03-28

    申请号:CN200610113828.3

    申请日:2006-10-18

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌破碎全菌体多克隆抗体及其制备方法与应用,其目的是提供一种大肠杆菌破碎全菌体多克隆抗体及其制备方法与其在检测大肠杆菌中的应用。该制备方法包括以下步骤:1)分离大肠杆菌;2)培养后灭活,再破碎菌体,得到大肠杆菌破碎全菌体抗原;3)将大肠杆菌破碎全菌体抗原免疫动物;4)从经免疫的动物中分离、纯化抗血清,得到大肠杆菌破碎全菌体多克隆抗体。用本发明方法制备的大肠杆菌破碎全菌体多克隆抗体具有特异性高,纯度及效价高(大于1∶1×105),可长期保存的优点,将其用于环境及食品检测领域中大肠杆菌的免疫检测中,将具有精确性、灵敏度高和广谱(采用经破碎的破碎全菌体作为抗原)的优势,应用前景广阔。

    一种利用间接竞争ELISA高通量快速筛查多种内分泌干扰物的方法

    公开(公告)号:CN114859037A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202110153736.2

    申请日:2021-02-04

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用间接竞争ELISA高通量快速筛查多种内分泌干扰物的方法。本发明提供的方法,包括如下步骤:采用多孔板通过间接竞争ELISA检测双酚A、雌二醇和壬基酚;多孔板中,部分孔用于检测双酚A、部分孔用于检测雌二醇、部分孔用于检测壬基酚;作为包被原的双酚A抗原的包被浓度为0.18‑0.2μg/mL;作为一抗的双酚A抗体的工作浓度为0.8‑1μg/mL;作为包被原的雌二醇抗原的包被浓度为3.1‑3.2μg/mL;作为一抗的雌二醇抗体的工作浓度为9‑10μg/mL;作为包被原的壬基酚抗原的包被浓度为0.3‑0.4μg/mL;作为一抗的壬基酚抗体的工作浓度为2‑3μg/mL。本发明操作简便,无需对抗体进行标记,可以实现多种内分泌干扰物的同时检测。本发明非常适用于水环境中内分泌干扰物的快速检测。

    一种检测待测样本中目标miRNA的含量的方法

    公开(公告)号:CN107119124B

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201710325015.9

    申请日:2017-05-10

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测待测样本中目标miRNA的含量的方法。本发明所提供的方法是利用封锁DNA对目标miRNA进行结构封锁,形成locker/miRNA组装体。locker/miRNA组装体不与miRNA/SP杂交体竞争界面捕获探针位点,同时在信号探针存在的情况下仍可以形成miRNA/SP杂交体,即可抑制假阴性信号的形成,保障检测结果的准确性。实验证明,采用本发明提供的方法检测待测样本中目标miRNA的含量成本低且准确率高,具有重要的应用价值。

    一种多光程吸收光谱谱图合成方法

    公开(公告)号:CN112730290A

    公开(公告)日:2021-04-30

    申请号:CN202110095882.4

    申请日:2021-01-25

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 朱启运 何苗

    Abstract: 本发明涉及一种多光程吸收光谱谱图合成方法,包括以下内容:根据多光程吸收光谱检测设备性能选定待测光程组;根据选定光程组,通过多光程吸收光谱检测设备进行吸收光谱检测,并对采集的吸收光谱进行单位化处理;对基于不同光程采集的吸收光谱进行光谱合成。本发明为同一样本不同光程的吸收光谱合并提供了完整的解决方案,合成后的谱图中可以同时存在吸收系数差异较大的吸收峰,提高了光谱形状的保真度。

    基于T-T错配原理的汞离子的荧光检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN105087791B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201510490776.0

    申请日:2015-08-11

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了基于T‑T错配原理的汞离子的荧光检测方法及其应用。采用本发明的检测方法能够快速、准确地进行饮用水中汞离子(Hg2+)的检测,最低检测限为22pM,而且特异性强,不受其它金属离子的干扰,重复性好。本发明的检测方法具有特异性强、性能稳定、易于再生、检测成本低、并能与仪器结合的优势,展现出巨大的应用潜力。

    生物传感器及生物检测方法

    公开(公告)号:CN107389913A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710495003.0

    申请日:2017-06-26

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 王程 何苗 叶巍翔

    CPC classification number: G01N33/53 G01N27/26

    Abstract: 一种生物传感器,包括:信号检测器,具有用于感知信号变化的敏感单元,所述敏感单元的表面不可逆地连接有待测目标物的特异性识别体;模拟竞争物,包括纳米颗粒和固定于所述纳米颗粒表面的竞争分子,所述竞争分子与所述特异性识别体具有特异性亲和作用,所述模拟竞争物能够形成胶体溶液,并能够可逆地捕获于所述敏感单元的表面。本发明还提供一种生物检测方法。本发明提供的生物传感器和生物检测方法可对不带电或带低量电的待测目标物实现便捷的带电模拟竞争物构建,并通过竞争亲和作用实现对不带电或带低量电的待测目标物的通用免标记检测。

    一种用于氨苄西林和磺胺地索辛电化学传感器自组装钝化层的形成方法及其电化学传感器

    公开(公告)号:CN104914151B

    公开(公告)日:2017-10-13

    申请号:CN201510233166.2

    申请日:2015-05-08

    Abstract: 本发明涉及一种用于氨苄西林和磺胺地索辛检测的,基于信号探针链取代的核酸适配体电化学传感器(SD‑EAB)自组装钝化层的形成方法及其电化学传感器。本发明中氨苄西林SD‑EAB的制备包括三个步骤:首先将末端修饰巯基的捕获探针与其互补的有二茂铁标记的核酸适配体信号探针进行杂交,然后通过自组装固定在金电极上,最后利用OEG6‑OMe作为自组装钝化层分子对电极进行封闭。本发明中磺胺地索辛SD‑EAB的制备与上述三个步骤类似。本发明可以解决当SD‑EAB中使用现有技术中常用的MCH自组装钝化层无法实现对氨苄西林和磺胺地索辛进行检测的问题。

    几种识别灭草松的核酸适配体序列及其衍生物

    公开(公告)号:CN106047872A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201510876035.6

    申请日:2015-12-03

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 向宇 何苗

    CPC classification number: C12N15/115 C12N2310/16 G01N33/53

    Abstract: 本发明的核酸适配体(DNA aptamer)是单链寡聚脱氧核糖核苷酸(Oligodeoxynucleotide),具有不同的脱氧核糖核苷酸(Deoxynucleotide)序列,它们在溶液中对除草剂灭草松(Bentazon)具有识别能力,可作为生物识别材料用于开发检测样品中灭草松的含量。这些核酸适配体序列是通过从随机核酸库(Random DNA pool)中进行体外筛选(In vitro Selection或SELEX)获得。在水溶液中,本发明的核酸适配体序列对灭草松分子的结合强度达到微摩尔每升(μM)量级的离解常数(Kd)。

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