基于T-T错配原理的汞离子的荧光检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN105087791B

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201510490776.0

    申请日:2015-08-11

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了基于T‑T错配原理的汞离子的荧光检测方法及其应用。采用本发明的检测方法能够快速、准确地进行饮用水中汞离子(Hg2+)的检测,最低检测限为22pM,而且特异性强,不受其它金属离子的干扰,重复性好。本发明的检测方法具有特异性强、性能稳定、易于再生、检测成本低、并能与仪器结合的优势,展现出巨大的应用潜力。

    使检测汞离子的生物芯片再生的成套试剂及其应用

    公开(公告)号:CN105039561A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510490778.X

    申请日:2015-08-11

    Applicant: 清华大学

    CPC classification number: C12Q1/6837 C12Q2563/107 C12Q2565/501

    Abstract: 本发明公开了使检测汞离子的生物芯片再生的成套试剂及其应用。使用本发明的使检测汞离子的芯片再生的成套试剂对芯片再生得到的再生芯片具有很好的可重复性,与新制备的芯片相比,使用再生方法1获得的再生次数为1-10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法2获得的再生次数为1-10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.4%以下,使用再生方法3获得的再生次数为1-10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法4获得的再生次数为1-10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.7%以下,这四种再生方法均获得很好的再生效果。

    一种重组发光细菌及其应用

    公开(公告)号:CN104140943A

    公开(公告)日:2014-11-12

    申请号:CN201410338865.9

    申请日:2014-07-16

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 汪用志 何苗

    Abstract: 本发明公开了一株重组发光细菌及其应用。本发明公开的一种重组菌,该菌是将mer基因中的R基因和o/p位点组成的调控识别元件插入载体上缺乏启动元件的发光基因上游,并导入受体菌中得到。利用本发明公开的汞特异响应的重组发光细菌作为测试菌种,可以通过发光强度的大小判定水体中可生物利用性的汞浓度范围。与传统的物理化学检测方法相比,本发明提供的方法成本低、操作简单、结果可靠性高、易于实现自动在线化、不需要特殊的高精度的分析仪器和检测设备,可应用于环境水质监测领域,对于汞污染物质的预警监测具有非常重要的经济和社会意义。

    使检测汞离子的生物芯片再生的成套试剂及其应用

    公开(公告)号:CN105039561B

    公开(公告)日:2018-02-09

    申请号:CN201510490778.X

    申请日:2015-08-11

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了使检测汞离子的生物芯片再生的成套试剂及其应用。使用本发明的使检测汞离子的芯片再生的成套试剂对芯片再生得到的再生芯片具有很好的可重复性,与新制备的芯片相比,使用再生方法1获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法2获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.4%以下,使用再生方法3获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法4获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.7%以下,这四种再生方法均获得很好的再生效果。

    基于“off-on-off ”模式的汞离子的荧光检测方法及荧光探针芯片

    公开(公告)号:CN106383101A

    公开(公告)日:2017-02-08

    申请号:CN201610795978.0

    申请日:2016-08-31

    Applicant: 清华大学

    CPC classification number: G01N21/6428 G01N2021/6432

    Abstract: 本发明公开了基于“off-on-off”模式的汞离子的荧光检测方法及荧光探针芯片。该方法中,随着待测样品中的Hg2+的浓度逐渐增加,Hg2+首先与杂交液中的TQ形成T–Hg2+–T结构,与TQ配对的带荧光标记的AC以游离状态存在,随后AC与芯片表面固定的探针TP发生杂交反应而被捕获,表现为荧光逐渐增强,即“off–on”模式”;然后,随着Hg2+的浓度继续增加,剩余Hg2+与芯片上的探针TP形成T–Hg2+–T结构,而原在芯片上捕获的AC被取代,从荧光探针表面离开,表现为荧光逐渐衰减,即“on–off”模式”;根据荧光探针芯片所检测得到的荧光强度确定待测溶液中Hg2+的浓度。本发明基于T-T错配原理,借助于两次目标诱导的构象变化,结合光纤的倏逝波荧光检测平台,可实时检测Hg2+。

    一种重组发光细菌及其应用

    公开(公告)号:CN104140943B

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201410338865.9

    申请日:2014-07-16

    Applicant: 清华大学

    Inventor: 汪用志 何苗

    Abstract: 本发明公开了一株重组发光细菌及其应用。本发明公开的一种重组菌,该菌是将mer基因中的R基因和o/p位点组成的调控识别元件插入载体上缺乏启动元件的发光基因上游,并导入受体菌中得到。利用本发明公开的汞特异响应的重组发光细菌作为测试菌种,可以通过发光强度的大小判定水体中可生物利用性的汞浓度范围。与传统的物理化学检测方法相比,本发明提供的方法成本低、操作简单、结果可靠性高、易于实现自动在线化、不需要特殊的高精度的分析仪器和检测设备,可应用于环境水质监测领域,对于汞污染物质的预警监测具有非常重要的经济和社会意义。

    基于8-17DNAzyme原理的铅离子荧光检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN105296598A

    公开(公告)日:2016-02-03

    申请号:CN201510895100.X

    申请日:2015-12-08

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了基于8-17 DNAzyme原理的铅离子荧光检测方法及其应用。在Pb2+作用下,8-17 DNAzyme可以催化断裂其互补底物链,利用固定在芯片表面的探针捕获断裂后释放到溶液中的带荧光标记的部分底物链,借助于倏逝波激发捕获的底物链,建立荧光信号与Pb2+浓度的关系。本发明的检测方法可在室温(20-30℃)20分钟完成Pb2+的检测,对Pb2+的最低检测限为20nM。本发明的检测方法可在室温能够快速、准确地进行饮用水中铅离子(Pb2+)的检测,而且特异性强,不受其它金属离子的干扰,重复性好。本发明的检测方法具有特异性强、性能稳定、易于再生、检测成本低、并能与仪器结合的优势。

    一种同时检测待测溶液中汞离子和铅离子的含量的方法

    公开(公告)号:CN106636338B

    公开(公告)日:2020-04-07

    申请号:CN201610912258.8

    申请日:2016-10-19

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测待测溶液中汞离子和铅离子的含量的方法。本发明所提供的检测待测溶液中汞/铅离子的含量的方法包括如下步骤:将杂交液和铅/汞离子屏蔽剂混匀,孵育;加入待测溶液,孵育;采用Hg‑Pb TD‑PS探针检测荧光信号强度;所述杂交液含有酶链Hg‑Pb TD‑En和底物链Hg‑Pb TD‑Sub。所述底物链Hg‑Pb TD‑Sub、所述酶链Hg‑Pb TD‑En和所述Hg‑Pb TD‑PS探针的核苷酸序列依次如序列表中序列3、序列2和序列1所示。实验证明,本发明所提供的方法检测准确率高、灵敏度高、选择性好和重复性好,在检测汞离子的含量和检测铅离子的含量中的具有重要的应用价值。

    基于8-17DNAzyme原理的铅离子荧光检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN105296598B

    公开(公告)日:2019-01-04

    申请号:CN201510895100.X

    申请日:2015-12-08

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了基于8‑17 DNAzyme原理的铅离子荧光检测方法及其应用。在Pb2+作用下,8‑17 DNAzyme可以催化断裂其互补底物链,利用固定在芯片表面的探针捕获断裂后释放到溶液中的带荧光标记的部分底物链,借助于倏逝波激发捕获的底物链,建立荧光信号与Pb2+浓度的关系。本发明的检测方法可在室温(20‑30℃)20分钟完成Pb2+的检测,对Pb2+的最低检测限为20nM。本发明的检测方法可在室温能够快速、准确地进行饮用水中铅离子(Pb2+)的检测,而且特异性强,不受其它金属离子的干扰,重复性好。本发明的检测方法具有特异性强、性能稳定、易于再生、检测成本低、并能与仪器结合的优势。

    一种同时检测待测溶液中汞离子和铅离子的含量的方法

    公开(公告)号:CN106636338A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201610912258.8

    申请日:2016-10-19

    Applicant: 清华大学

    Abstract: 本发明公开了一种同时检测待测溶液中汞离子和铅离子的含量的方法。本发明所提供的检测待测溶液中汞/铅离子的含量的方法包括如下步骤:将杂交液和铅/汞离子屏蔽剂混匀,孵育;加入待测溶液,孵育;采用Hg‑Pb TD‑PS探针检测荧光信号强度;所述杂交液含有酶链Hg‑Pb TD‑En和底物链Hg‑Pb TD‑Sub。所述底物链Hg‑Pb TD‑Sub、所述酶链Hg‑Pb TD‑En和所述Hg‑Pb TD‑PS探针的核苷酸序列依次如序列表中序列3、序列2和序列1所示。实验证明,本发明所提供的方法检测准确率高、灵敏度高、选择性好和重复性好,在检测汞离子的含量和检测铅离子的含量中的具有重要的应用价值。

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