公开(公告)号：CN110256531A

公开(公告)日：2019-09-20

申请号：CN201910387139.9

申请日：2019-05-08

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  华修德 ,  杜梅 ,  丁园 ,  陈贺

IPC: C07K7/08 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与吡虫啉抗体特异性结合的多肽，以及该多肽在检测吡虫啉中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用蛋白A柱纯化的吡虫啉抗体对噬菌体展示随机线十二肽库进行3轮淘选，淘选出与吡虫啉抗体结合的噬菌体克隆；随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增和质粒提取，通过噬菌体ELISA方法选择阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序获得多肽序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在吡虫啉检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的噬菌体酶联免疫分析方法可用于快速、灵敏、简便和廉价检测环境和农产品中吡虫啉残留。

公开(公告)号：CN108562741A

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201810016879.7

申请日：2018-01-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  华修德 ,  丁园

IPC: G01N33/558

Abstract: 本发明涉及一种氯噻啉生物发光侧流免疫层析方法，首先将分析物与重组示踪物共同竞争硝酸纤维素膜上的捕获抗体的结合位点，然后洗膜，并加入反应底物产生荧光信号，配合手机检测配件，使用智能手机对检测结果进行拍照，最后对手机拍照的图像进行分析及结果判定。本发明提供的方法利用噬菌体展示多肽模拟表位与可催化发光酶的重组蛋白为示踪物，配合智能手机，以侧流层析的方式实现对小分子化合物的检测。本发明灵敏度高、快速、简便、经济、实用性强，可以实现现场定量检测。

公开(公告)号：CN106749527A

公开(公告)日：2017-05-31

申请号：CN201611271306.6

申请日：2016-12-28

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  华修德 ,  丁园

IPC: C07K7/06 ,  C07K7/08 ,  G01N33/68

CPC classification number: C07K7/06 ,  C07K7/08 ,  G01N33/68 ,  G01N2333/005 ,  G01N2410/00 ,  G01N2430/10

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及具有与氯噻啉抗体特异性结合的多肽，包括所述多肽在检测氯噻啉中的应用。本发明采用噬菌体展示技术，用蛋白A柱纯化的氯噻啉抗体对噬菌体展示随机环七肽库、环八肽库、线十二肽库进行3轮淘选，淘选出与氯噻啉抗体结合的噬菌体克隆；随机挑取若干噬菌体克隆进行扩增和质粒提取，通过噬菌体ELISA方法选择阳性噬菌体克隆，并将阳性克隆进行测序获得多肽序列。本发明还涉及该噬菌体展示多肽在氯噻啉检测中的应用。用该噬菌体展示多肽建立的噬菌体酶联免疫分析方法可用于快速、灵敏、简便和廉价检测环境和农产品中氯噻啉残留。

公开(公告)号：CN106525824A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610373103.1

申请日：2016-05-30

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  钱国良 ,  王玉龙 ,  苏振贺 ,  王鸣华 ,  华修德 ,  张存政

IPC: G01N21/78 ,  G01N21/33

CPC classification number: G01N21/78 ,  G01N21/33

Abstract: 本发明涉及一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，包括(1)新型Cu2+高特异性识别元件(MarR蛋白)的制备；(2)MarR蛋白标记纳米金制备比色探针，通过Cu2+诱导MarR蛋白四聚体的形成，导致胶体金探针的沉聚，观察Cu2+添加前后溶液的颜色变化，实现对于Cu2+的半定量比色检测。同时扫描Cu2+添加前后溶液的紫外-可见光谱，以600nm和520nm波长处吸光度比值(A600/A520)为纵坐标，Cu2+标准溶液的浓度为横坐标建立曲线方程，通过测定样品中Cu2+的A600/A520，代入曲线方程，得出待测样品中Cu2+的浓度。本发明涉及的一种基于MarR蛋白调控的Cu2+比色检测方法，不仅快速，简便，同时还兼具低成本，能用于现场检测等特点，可应用于家庭，医院，机场口岸等需要实行快速检测的机构。

公开(公告)号：CN103589688B

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201310365944.4

申请日：2013-08-21

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  秦娜 ,  方庆奎 ,  华修德

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/44 ,  G01N33/577 ,  C07F9/24 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及抗三种有机磷农药的单克隆抗体及其应用。本发明通过化学合成针对上述农药公共结构的人工半抗原，进而制备完全抗原，免疫Balb/C鼠，通过杂交瘤技术制备特异性强的单克隆抗体，并用于农产品和农业生产环境中上述三种农药残留的高灵敏快速检测。本发明抗体的制备技术可行，抗原的整个制备过程不需要特别的仪器设备，易于规模化生产。

公开(公告)号：CN103018435B

公开(公告)日：2014-10-22

申请号：CN201210237844.9

申请日：2012-07-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  王利民 ,  华修德

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明涉及甲基对硫磷等8种有机磷农药的多残留快速检测金标试纸条。试纸条含有衬板、样品垫、金标结合垫、纤维素膜和吸水垫。金标结合垫为吸附金标抗体的玻璃纤维素膜；在纤维素膜上有甲基对硫磷偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用兔抗鼠IgG印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合。本发明试纸条具有检测谱广、灵敏度高、快速、简便、直观、准确的特点，并且前处理简单，不需要任何仪器设备，无需专业人员操作。

公开(公告)号：CN103820360A

公开(公告)日：2014-05-28

申请号：CN201410017230.9

申请日：2014-01-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王鸣华 ,  赵百萍 ,  华修德 ,  施海燕

IPC: C12N1/20 ,  A62D3/02 ,  C02F3/34 ,  B09C1/10 ,  C12R1/01 ,  A62D101/04 ,  A62D101/28 ,  C02F101/38

Abstract: 本发明属于微生物领域，涉及一株炔苯酰草胺降解菌W1，属于丛毛单胞菌属(Comamonas？sp.)，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2013年10月11日，保藏号为CCTCC？NO：M2013464，16S？rRNA基因序列在Genebank登录号为1680505。该菌可以在8h内降解100mg/L的炔本酰草胺达到90％。用途为：该菌株用于降解除草剂炔苯酰草胺，可用于受炔苯酰草胺污染的水体、土壤和农产品的生物净化。

公开(公告)号：CN101865923A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN201010204947.6

申请日：2010-06-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘凤权 ,  华修德 ,  钱国良 ,  秦娜 ,  李刚

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明涉及农药甲基毒死蜱的快速检测器具。一种甲基毒死蜱残留分析的快速检测试纸条。试纸条含有衬板(1)、样品垫(2)、金标结合垫(3)、纤维素膜(4)和吸水垫(7)，金标结合垫为吸附甲基毒死蜱金标抗体的玻璃纤维棉，在纤维素膜上有用甲基毒死蜱半抗原偶联的载体蛋白溶液印制的直线式隐形检测线，用兔抗鼠IgG印制的直线式隐形对照线，两条线平行排列组合。本发明试纸条具有特异性强，检测灵敏度高、快速、简便、直观、准确的特点，并且前处理简单，不需要任何仪器设备，无需专业人员操作。