两个棉花纤维发育起始优势表达的强启动子及其应用

    公开(公告)号:CN102485893A

    公开(公告)日:2012-06-06

    申请号:CN201010582335.0

    申请日:2010-12-06

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域。公开了两个在棉花纤维起始期优势、高效表达的启动子PGbPDF1-1和PGbPDF1-2及其应用。这两个启动子的核酸序列如序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。所述启动子在棉花纤维发育起始阶段为表达高峰。通过一系列截短启动子序列与GUS融合,转基因棉花验证结果表明翻译起始密码子到其上游236bp的序列是这两个启动子的核心序列。本发明还公开了利用所述启动子所构建的表达盒的结构以及其在培育改良棉花中的应用。

    利用EST-SSR标记构建棉花纤维转录遗传连锁图谱的方法

    公开(公告)号:CN101880714A

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN201010196031.0

    申请日:2010-06-04

    Abstract: 本发明属于棉花分子育种技术领域,具体涉及一种构建棉花纤维转录图谱的方法,步骤如下:以海岛棉Pima 3-79为父本,陆地棉鄂棉22为母本,杂交得F1;种植F1,使F1自交,得到F2;以该F2单株作为纤维转录图谱作图的起始材料;提取所述田间F2单株开花后5天的纤维的RNA,并反转录为cDNA,作为转录图谱的作图群体;利用报道的EST-SSR引物和自行设计的如序列表SEQ ID NO:1-90所示的引物分别对F2单株进行作图群体分析,用变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析;最后利用MAPMAKER/EXP.3.0作图软件分析数据,制作获得转录图谱。与现有方法相比本发明的方法简捷实用,QTL定位更加准确,便于棉花纤维发育相关基因的克隆。

    超声波辅助农杆菌转化棉花胚芽的方法

    公开(公告)号:CN101011027A

    公开(公告)日:2007-08-08

    申请号:CN200710063650.0

    申请日:2007-02-07

    CPC classification number: Y02A40/162

    Abstract: 本发明属于棉花转基因技术领域,公开了超声波辅助农杆菌转化棉花胚芽的培育转基因棉花的新方法。包括:将剥掉种皮消毒后棉种接种到无菌苗萌发培养基上,将刚萌发两片子叶剥离,置润湿的无菌滤纸上,将10ml 0.5 OD600nm的农杆菌菌液加入到塑料离心管或玻璃小三角瓶中并将剥好的胚芽加到农杆菌液中,将离心管或者小三角瓶放在超声波清洗器中的中央,用100-150W的超声波处理1-5min,将处理过的胚芽转移至共培养培养基培养,再用含头孢霉素的无菌水冲洗,吸干胚芽表面水分,转移至恢复培养基上,在光照下恢复培养得到幼芽,将其转到选择培养基继代,得到抗性芽,将其切下转移至生根培养基上诱导生根或嫁接在棉花砧木上,得到再生转基因植株。本发明将GFP(绿色荧光蛋白)基因在胚芽的瞬时表达率提高100多倍;首次实现了海岛棉(长绒棉)的转基因植株;获得了一批转抗虫基因的棉花植株。分子及田间实验检测表明,外源基因已经稳定转入到受体棉花基因组中并能稳定表达和遗传。

    一种陆地棉高效遗传转化受体的培育方法及应用

    公开(公告)号:CN116751811B

    公开(公告)日:2024-06-21

    申请号:CN202310974030.1

    申请日:2023-08-04

    Abstract: 本发明公开了一种陆地棉高效遗传转化受体的培育方法及应用,以湖北省高产阔叶品种‘鄂棉22’(E22)为母本,以高再生能力的鸡脚叶‘豫早1号’(YZ‑1)为父本,构建遗传稳定的F9的重组自交系,利用IK(IBA+KT)和DK(2,4‑D+KT)两种不同激素组合的培养体系对群体进行再生能力的评估,并对筛选到的高再生阔叶棉进行遗传转化效率鉴定以及农艺性状考察,通过该方法最终制备得到了农艺性状优良且遗传转化效率较高的棉花受体,拓宽了可再生的陆地棉基因型,为棉花遗传转化提供优良受体材料,丰富了目前主流的棉花转基因受体材料。

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