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公开(公告)号：KR1020140057790A
公开(公告)日：2014-05-14
申请号：KR1020120123980
申请日：2012-11-05
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
IPC: C12N15/63 , C12N15/85 , A01K67/027 , C12N5/10
Abstract: The present invention relates to a transgenic silkworm which produces a cocoon containing a bee venom-derived melittin antibiotic peptide and to a method for mass producing cocoons containing melittin antibiotic peptides using the same. More specifically, a recombinant expression vector which includes a gene construct is produced, wherein a marker gene regulating promoter, a marker gene, a silkworm-derived fibroin promoter, and a bee venom-derived melittin gene are mixed in order to be able to act; and a silkworm is transformed by means of the recombinant expression vector so that a transgenic silkworm which produces a cocoon containing melittin antibiotic peptide in silk can be produced. The transgenic silkworm produces the cocoon containing a large amount of melittin antibiotic peptides so as to be developed into a natural antibiotic agent which can be practically used as a livestock fodder additive and as a material for daily supplies such as cosmetics and toothpaste.
Abstract translation: 本发明涉及一种产生含蜂毒衍生的蜂毒素抗生素肽的茧的转基因蚕，以及一种大规模生产含有使用其的蜂毒肽抗生素肽的茧的方法。 更具体地，制备包含基因构建体的重组表达载体，其中混合标记基因调节启动子，标记基因，蚕源性丝氨蛋白启动子和蜂毒衍生的蜂毒素基因，以便能够起作用 ; 并通过重组表达载体转化蚕，从而可以生产在丝中产生含有蜂毒素抗生素肽的茧的转基因蚕。 转基因蚕产生含有大量蜂毒素抗生素肽的茧，以发育成天然抗生素，其可以实际用作牲畜饲料添加剂，并且作为日用品如化妆品和牙膏的材料。
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公开(公告)号：KR101374683B1
公开(公告)日：2014-03-17
申请号：KR1020120065146
申请日：2012-06-18
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 누에 유래 Dpp 단백질을 유효성분으로 함유하는 뼈 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명은 서열번호 2의 아미노산 서열을 갖는 누에 유래 Dpp단백질 또는 상기 아미노산 서열을 코딩하는 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 뼈 관련 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 의해, Dpp 유전자를 누에에서 분리해 내고, 이를 통해 뼈 형성에 필요한 조골세포 분화를 증가시켜 뼈 형성을 유도하는 누에 유래 Dpp 단백질을 포함하는 뼈 관련 질환의 예방 및 개선용 식품 조성물이 제공된다.-
63.发明授权인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 ＢＭＰ2/7-ＰＴＤ 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법 有权使用稳定细胞系编码人BMP2 / 7-PTD的稳定细胞系以有效地诱导和发展3维细胞培养
公开(公告)号：KR101359485B1
公开(公告)日：2014-02-10
申请号：KR1020110125546
申请日：2011-11-29
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 BMP2/7-PTD 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법에 관한 것이다.
본 발명의 인간 뼈 형성촉진인자 발현벡터 pCEP4-rhBMP2/7-PTD는 인간 BMP 단백질 유전자인 BMP2유전자와 BMP7유전자; 및 단백질 전달 펩타이드(PTD)를 포함하며, 도 4의 구조를 갖으며, 본 발명의 형질전환된 세포주는 상기의 인간 뼈 형성촉진인자 발현벡터 pCEP4-rhBMP2/7-PTD로 이루어지며, 인간 BMP 단백질 유전자의 지속발현 효과를 갖는 것이 특징이다.
또한, 본 발명의 3차원 세포배양방법은 상기의 형질전환된 세포주와 타겟(target)세포를 혼합하여 인간 BMP 단백질 유전자를 발현시킴으로써 타겟(target) 세포를 뼈 세포로 분화시키는 것이 특징이다.
본 발명에 의해, 고가인 BMP 단백질 사용을 획기적으로 줄일 수 있어 경제적이며, 인간 BMP 단백질과 동일한 고품질의 BMP 생산체계 구축을 통한 인공 뼈 발명에 효과적이며, 3차원 배양방법 발명으로 인공 뼈 발명을 위한 시간, 비용, 효율성 증대의 효과를 얻을 수 있다.-
公开(公告)号：KR101303695B1
公开(公告)日：2013-09-09
申请号：KR1020100101541
申请日：2010-10-18
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 저분자 실크 피브로인과 아가로스 겔을 이용한 3차원 지지체 및 그 제조방법에 관한 것이다.
본 발명의 3차원 지지체는 저분자 실크 피브로인과 아가로스 겔을 포함하는 것으로써, 상기 저분자 실크 피브로인은 전체중량에 대하여 0.01 ~ 0.05 중량%가 함유되는 것이 특징이다.
본 발명의 3차원 지지체의 제조방법은 아가로스를 준비한 후, 이를 액체 상태로 하이드로 겔화하여 아가로스 겔을 제조하는 단계와, 상기 아가로스 겔에 지지체 전체중량대비 0.01 ~ 0.05 중량%의 저분자 실크 피브로인 파우더를 넣고 혼합한 후, 이를 성형틀에 주입한 다음, 바로 고체화시킨 후 동결건조시키는 단계를 포함하여 구성된다.
본 발명에 의해, 기존의 방법에서 사용하는 조골세포로 분화를 유도하기 위하여 첨가하여 주는 골 형성 촉진인자들의 사용을 경감시키거나 무용하게 하여 비용 및 시간을 감소시키는 효과를 얻을 수 있게 되어 인공 뼈 또는 인체조직 재생을 목적으로 하는 신소재 개발에 이용가능한 3차원 지지체를 제공할 수 있게 된다.-
65.发明公开인간 뼈 형성촉진효과를 위해 인간 ＢＭＰ2/7-ＰＴＤ 발현벡터를 통해 형질전환된 세포주 및 이 형질전환된 세포주를 이용한 3차원 세포 배양방법 有权使用稳定细胞系编码人BMP2 / 7-PTD的稳定细胞系以有效地诱导和发展3维细胞培养
公开(公告)号：KR1020130059526A
公开(公告)日：2013-06-07
申请号：KR1020110125546
申请日：2011-11-29
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A cell line which is transformed by a human BMP2/7-PTD expression vector for promoting osteogenesis in human, and a three dimensional cell culture method using the transformed cell line are provided to remarkably reduce BMP protein use, and to effectively create artificial bones by constructing a high quality BMP production system. CONSTITUTION: A human osteogenesis expression vector, pCEP4-rhBMP2/7-PTD, contains a BMP2 gene, a BMP7 gene, and a protein transduction domain(PTD). A method for preparing the expression vector comprises a step of inserting the BMP2 gene into a pCEP4 vector with a CMV promoter, and inserting the BMP7 gene and the PTD. A transformed cell line contains the expression vector.
Abstract translation: 目的：提供人BMP2 / 7-PTD表达载体转化人促进成骨的细胞系，使用转化细胞株进行三维细胞培养，显着降低BMP蛋白质的使用量，有效地形成人造 骨骼通过构建高质量的BMP生产系统。 构成：人成骨表达载体pCEP4-rhBMP2 / 7-PTD含有BMP2基因，BMP7基因和蛋白质转导结构域（PTD）。 制备表达载体的方法包括将BMP2基因插入具有CMV启动子的pCEP4载体，并插入BMP7基因和PTD的步骤。 转化的细胞系含有表达载体。
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Patent Agency Ranking66.发明公开
公开(公告)号：KR1020130054628A
公开(公告)日：2013-05-27
申请号：KR1020110120127
申请日：2011-11-17
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A promoter of a hemocyte-specific expression gene and a promoter active region are provided to obtain a recombinant protein and to save cost and time for developing a silk worm transformant which produces the recombinant protein. CONSTITUTION: A promoter of a hemocyte-specific expression gene is isolated from silk worm and is denoted by sequence number 1. The sequence of sequence number 1 has 579 bp. A promoter active region of the gene contains the promoter of hemocyte-specific expression gene. A method for transforming a silk worm comprises a step of using the promoter. A silk worm transformant is prepared using the promoter and produces recombinant protein.
Abstract translation: 目的：提供血细胞特异性表达基因和启动子活性区域的启动子以获得重组蛋白质，并节省开发产生重组蛋白质的丝虫转化体的成本和时间。 构成：从丝虫分离血细胞特异性表达基因的启动子，序列号1表示。序列号1的序列为579bp。 该基因的启动子活性区含有血细胞特异性表达基因的启动子。 用于转化丝虫的方法包括使用促进剂的步骤。 使用启动子制备丝虫转化体并产生重组蛋白。
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公开(公告)号：KR1020130007787A
公开(公告)日：2013-01-21
申请号：KR1020110068329
申请日：2011-07-11
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A promoter of silkworm embryonic stage-specific expression gene and an active region of the gene are provided to early determine transformation. CONSTITUTION: A silkworm embryonic stage-specific expression promoter is isolated from a silkworm and is denoted by sequence number 1. The promoter is denoted by sequence number 2 and is formed by deleting 268bp at sequence number 1. A maximum promoter active region of a silkworm embryonic stage-specific expression gene contains the promoter. A method for preparing the promoter comprises: a step of screening early embryo gene(EEG) through isolation of genetic resources with respect to time using Bombyx mori eggs and acquiring cDNA clone; a step of analyzing the characteristic and structure of total base sequence and predicted promoter region with respect to the clone of EEG-704 cDNA gene; a step of preparing deletion mutant constructs of 11 kinds of genes with respect to the promoter of EEG704 gene; a step of transducing each deletion mutant construct to pGL3-Basic carrier which do not has the promoter containing luciferase; a step of detecting luciferase activity with respect 11 kinds of deletion mutant constructs; and a step of comparing and analyzing luciferase activity with respect to p704A(1.4kb) and actin which have the strongest luciferase activity.
Abstract translation: 目的：提供蚕胚胎阶段特异性表达基因启动子和基因的活性区，以早期确定转化。 构成：蚕胚胎阶段特异性表达启动子从蚕中分离出来，由序列号1表示。启动子由序列号2表示，并通过删除序列号1的268bp而形成。蚕的最大启动子活性区 胚胎期特异性表达基因含有启动子。 一种制备该启动子的方法包括：通过使用家蚕卵分离相关时间的遗传资源并获取cDNA克隆来筛选早期胚胎基因（EEG）的步骤; 相对于EEG-704 cDNA基因的克隆分析总碱基序列和预测启动子区域的特征和结构的步骤; 相对于EEG704基因的启动子制备11种基因的缺失突变体构建体的步骤; 将每个缺失突变体构建体转导至不具有含有萤光素酶的启动子的pGL3-碱性载体的步骤; 关于11种缺失突变体构建体检测荧光素酶活性的步骤; 以及比较和分析荧光素酶活性相对于具有最强荧光素酶活性的p704A（1.4kb）和肌动蛋白的步骤。
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68.发明授权
公开(公告)号：KR101219646B1
公开(公告)日：2013-01-11
申请号：KR1020100101954
申请日：2010-10-19
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: 본 발명은 아가로스를 이용한 다공성 3차원 지지체의 제조방법 및 이를 통해 제조된 다공성 3차원 지지체에 관한 것이다.
본 발명의 다공성 3차원 지지체의 제조방법은 공극 유도 물질인 아가로스를 준비한 후, 이를 액체 상태로 하이드로 겔화하여 아가로스 겔을 제조한 후, 이를 지지체를 형성하는 생체재료의 주원료와 함께 성형틀에 주입하여 가압성형하는 단계와 상기 성형물을 급속 냉각한 후, 동결건조시킨 다음 이를 에탄올로 고정시킨 후, 50℃ 이상의 물에 담구어 아가로스를 제거함으로써 다공성 및 통기성이 형성된 3차원 지지체를 제조하는 단계를 포함하여 구성된다.
본 발명에 의해, 지지체 내부에 공극뿐 아니라 공극 간의 연결 통로가 형성되도록 한 다공성 3차원 지지체의 제조방법이 제공되며, 지지체 표면에 부착한 조직의 세포가 지지체 내부로 침투하는 효과를 증대시킬 수 있게 되어 재생의 효율을 증대시킬 수 있는 다공성 3차원 지지체가 제공된다.-
公开(公告)号：KR1020120071546A
公开(公告)日：2012-07-03
申请号：KR1020100133134
申请日：2010-12-23
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
CPC classification number: A61L27/227 , A61F2/0063 , A61L2430/32 , D04H1/09
Abstract: PURPOSE: A silk artificial lipid membrane for artificial cerebral dura mater and biological films are provided to facilitate surgical operation by reinforcing flexibility and improving stability. CONSTITUTION: A silk artificial lipid membrane for artificial cerebral dura mater and biological films comprises the following steps: manufacturing a mixed solution by mixing 0.01-50.00 wt% of salt with 50-99.99wt% of silk fibroin; and manufacturing a silk artificial lipid membrane by pouring the mixed solution into a flat container and desiccating thereof at 20-80 deg. Celsius in a thermostatic chamber which contains 20-80 wt% of moisture. The salt is one of calcium chloride, sodium chloride, potassium chloride, and sodium acetate.
Abstract translation: 目的：提供用于人造脑硬膜和生物膜的丝素人造脂膜，以通过增强弹性和提高稳定性来促进外科手术。 构成：用于人造脑硬膜和生物膜的丝素人造脂膜包括以下步骤：通过将0.01-50.00重量％的盐与50-99.99重量％的丝素蛋白混合制备混合溶液; 并通过将混合溶液倒入平坦容器中并在20-80℃干燥而制造丝状人造脂质膜。 摄氏度在含有20-80重量％水分的恒温槽中。 该盐是氯化钙，氯化钠，氯化钾和乙酸钠之一。
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公开(公告)号：KR1020120067831A
公开(公告)日：2012-06-26
申请号：KR1020100129445
申请日：2010-12-16
Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)
Abstract: PURPOSE: A membrane for guiding bone tissue regeneration using silk protein is provided to regenerating bone tissue without inflammation, by having excellent adhesion and biocompatibility. CONSTITUTION: A membrane for guiding bone tissue regeneration comprises: a step of obtaining silk fibroin by removing sericin from silk protein; a step of manufacturing silk fibroin salt ethanol solution by dissolving the silk fibroin in to ethanol solution with salt; a step of manufacturing silk fibroin solution by removing salt and ethanol from the silk fibroin solution; and a step of drying the silk fibroin solution into a flat container. The silk fibroin solution contains 0.5-20 weight% of silk fibroin. The salt is one selected from bromide salt,, lithium chloride, zinc chloride, calcium chloride, and calcium nitrate.
Abstract translation: 目的：提供用于使用丝蛋白引导骨组织再生的膜，通过具有优异的粘附性和生物相容性来再生骨组织而不发炎。 构成：用于引导骨组织再生的膜包括：通过从丝蛋白中去除丝胶蛋白获得丝素蛋白的步骤; 通过将丝素蛋白溶解于乙醇溶液中制备丝素蛋白盐水乙醇溶液的步骤; 通过从丝素蛋白溶液中除去盐和乙醇来制造丝素蛋白溶液的步骤; 以及将丝素蛋白溶液干燥成扁平容器的步骤。 丝素蛋白溶液含有0.5-20重量％的丝素蛋白。 该盐选自溴化物盐，氯化锂，氯化锌，氯化钙和硝酸钙。
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