Abstract:
A 3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxypropionate-co-lactate terpolymer, and a method for preparing the terpolymer are provided to use the terpolymer as a biodegradable polymer capable of replacing synthetic plastics and being applied for medical use. A 3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxypropionate-co-lactate terpolymer comprises lactate, 3-hydroxybutyrate and 3-hydroxypropionate as a repeating unit. The preparation method comprises the step of cultivating or culturing the cell or plant having the gene of an enzyme which converts lactate into lactyl-CoA and converts 3-hydroxyalkanoate into 3-hydroxyalkanoyl-CoA and the gene of a polyhydroxyalkanoate(PHA) synthetase.
Abstract:
A 3-hydroxybutyrate-co-MCL 3-hydroxyalkanoate-co-lactate terpolymer, and a method for preparing the terpolymer are provided to obtain a biodegradable polymer capable of replacing synthetic plastics. A 3-hydroxybutyrate-co-MCL 3-hydroxyalkanoate-co-lactate terpolymer comprises lactate, 3-hydroxybutyrate and 3-hydroxyalkanoate of MCL(Middle Chain Length) as a repeating unit. The preparation method comprises the step of cultivating or culturing the cell or plant having the gene of an enzyme which converts lactate into lactyl-CoA and converts 3-hydroxyalkanoate into 3-hydroxyalkanoyl-CoA and the gene of a polyhydroxyalkanoate(PHA) synthetase.
Abstract:
Mutants having highly producing ability of 1,4-butanediol and a method for producing 1,4-butanediol by using the same mutants are provided to mass produce 1,4-butanediol from microorganisms by inserting enzyme genes producing 1,4-butanediol from succinate and deleting a gene producing succinate from succinate semialdehyde, so that the 1,4-butandiol is importantly used in chemical industry. The mutants capable of producing a large quantity of 1,4-butanediol contain an inserted gene encoding an enzyme converting succinate into 4-hydroxybutyrate(4HB), an inserted gene encoding an enzyme converting the 4-hydroxybutyrate into 1,4-butanediol(1,4-BDO) and a deleted gene associated with conversion of succinate semialdehyde into succinate and include bacterium, yeast and fungus, wherein the gene encoding the enzyme converting succinate into 4-hydroxybutyrate is selected from Cat1(succinyl-CoA transferase) gene of SEQ ID NO:1, SucD(succinate semialdehyde dehydrogenase) gene SEQ ID NO:2, 4hbD(4-hydroxybutyrate dehydrogenase) gene SEQ ID NO:3 and GHB(4-hydroxybutyrate dehydrogenase) gene SEQ ID NO:4; the gene encoding the enzyme converting succinate into 4-hydroxybutyrate is Cat2(4-hydroxybutyrate-CoA transferase) gene of SEQ ID NO:5 or the gene encoding alcohol dehydrogenase reducing 4HB-CoA of SEQ ID NO:6 or SEQ ID NO:7; and the gene associated with conversion of succinate semialdehyde into succinate is GabD(succinic semialdehyde dehydrogenase) gene of SEQ ID NO:8.
Abstract translation:提供了具有高生产能力的1,4-丁二醇的突变体和通过使用相同的突变体生产1,4-丁二醇的方法,通过从琥珀酸中插入产生1,4-丁二醇的酶基因来从微生物中大量生产1,4-丁二醇 并从琥珀酸半醛中缺失产生琥珀酸的基因,使1,4-丁二醇在化学工业中重要使用。 能够产生大量1,4-丁二醇的突变体含有编码将琥珀酸酯转化为4-羟基丁酸酯(4HB)的插入基因,该基因编码将4-羟基丁酸转化为1,4-丁二醇的酶(1 ,4-BDO)和与琥珀酸盐半醛转化为琥珀酸相关的缺失基因,包括细菌,酵母和真菌,其中编码将琥珀酸酯转化为4-羟基丁酸酯的酶的基因选自SEQ ID(succinyl-CoA转移酶)基因 ID NO:1,SucD(琥珀酸半醛脱氢酶)基因SEQ ID NO:2,4hbD(4-羟基丁酸脱氢酶)基因SEQ ID NO:3和GHB(4-羟基丁酸脱氢酶)基因SEQ ID NO:4; 将琥珀酸酯转化为4-羟基丁酸的基因是SEQ ID NO:5的Cat2(4-羟基丁酸酯-CoA转移酶)基因或编码SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7的醇脱氢酶还原型4HB-CoA的基因 ; 与琥珀酸半醛转化为琥珀酸相关的基因是SEQ ID NO:8的GabD(琥珀酸半醛脱氢酶)基因。
Abstract:
본 발명은 대장균에서 유래한 세포 외막 단백질 (FadL)을 세포표면 발현모체로 사용하여 목적단백질이나 펩타이드를 세포표면에 효율적으로 발현시킬 수 있는 발현벡터, 상기 발현벡터로 형질전환된 미생물, 상기 형질전환 미생물을 배양하여 목적 단백질을 세포표면에 안정적으로 다량 발현시키는 방법 및 상기 표면발현된 목적 단백질을 이용하는 것을 특징으로 하는 단백질 어레이의 제조방법, 항체의 제조방법, 생물전환방법 및 목적단백질의 개량방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 세포 외막에 목적단백질을 정상적인 기능을 가진 상태로 발현시킬 수 있으므로, 삽입되는 목적유전자에 따라, 재조합 생백신, 여러 펩타이드나 항체의 선별, 중금속 제거 또는 폐수처리에 응용할 수 있는 전세포 흡착제, 전세포 생물전환 등에 유용하게 사용할 수 있다. 세포외막 단백질, 표면발현, FadL, 개량, 단백질 어레이, 항체, 생물전환
Abstract:
Cells or plants capable of producing polylactate or its copolymers and a method for producing the polylactate or its copolymers by using the same cells or plants are provided to produce polylactate and various polyesters containing hydroxyalkanoate as a monomer from cells or plants. The cells or plants capable of producing polylactate or poly(hydroxyalkanoate-co-lactate) contain both of the gene encoding enzyme capable of converting lactate into lactyl-CoA and PHA(polyhydroxyalkanoates) synthetase gene, wherein the gene encoding enzyme capable of converting lactate into lactyl-CoA is propionyl-CoA transferase gene(pct); the PHA synthetase gene using lactyl-CoA as a substrate is phaC or phaRBC; and the cell is Escherichia coli. The method for producing polylactate or its copolymers comprises the steps of: culturing a cell in medium containing lactate and various hydroxyalkanoate as carbon sources; and collecting polylactate or hydroxyalkanoate-lactate copolymer(poly(hydroxyalkanoate-co-lactate)) from the cultured cell.
Abstract:
본 발명은 봉입체 결합 단백질을 코딩하는 유전자( ibpA 및/또는 ibpB )를 결핍시키거나 증폭시켜 목적단백질을 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 지금까지 목적 단백질 생산에 미치는 영향이 보고되지 않아왔던 대장균 유래의 봉입체 결합 단백질을 코딩하는 유전자( ibpA 및/또는 ibpB )를 이용한 목적 단백질 제조방법 두 가지를 제공한다. 첫째, ibpA 및/또는 ibpB 가 결핍된 박테리아를 이용하여 목적 단백질의 분비·생산 및 활성을 향상시키는 방법을 제공한다. 둘째, ibpA 및/또는 ibpB 가 증폭된 박테리아를 이용하여 세포질 내에 생산되는 목적단백질의 생산성 향상과 아울러 목적단백질을 수용성 형태에서 불용성 봉입체로 생산하는 방법을 제공한다.
Abstract:
본 발명은 폴리하이드록시알칸산 분해효소 기질결합 도메인의 폴리하이드록시알칸산에 대한 기질특이성을 이용하여, 목적 단백질을 기판에 위치특이적으로 고정시킨 단백질 칩 및 전기 단백질 칩을 이용한 단백질간 반응검출 방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 목적 단백질을 기판 위에 위치-특이적으로 고정시켜 비특이적인 단백질 결합을 억제할 수 있으므로, 단백질 칩 제작시의 봉쇄공정과 복잡한 정제공정을 필요로 하지 않아 생산성과 경제성의 측면에서 큰 향상효과를 기대할 수 있으며, 본 발명의 단백질 칩을 이용하면 단백질간 상호반응을 보다 특이적이고 효율적으로 수행할 수 있으므로, 신약개발의 기초연구에 크게 기여할 수 있을 것이다.
Abstract:
본 발명은 작은 열 충격 단백질(sHSPs)을 함유하는 단백질 분해 방지용 조성물 및 이차원 전기영동용 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 sHSPs를 이용하는 것을 특징으로 하는 개선된 이차원 전기영동(two-dimensional gel electrophoresis) 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따르면, 이차원 전기영동시 단백질 스팟(spot)이 감소되는 것을 방지하여 훨씬 많은 단백질 스팟을 포함한 이차원 전기영동 사진을 제공할 수 있다.
Abstract:
PURPOSE: A process for preparing polyhydroxyalkanoate using MaoC protein is provided, thereby preparing high quality polyhydroxyalkanoate having larger number of carbons in higher yield. CONSTITUTION: A MaoC gene encoding a protein providing a monomer required for synthesis of MCL-PHA(medium-chain-length polyhydroxyalkanoate) has the nucleotide sequence set forth in SEQ ID NO:2. A protein MaoC being expressed from the maoC gene and having enoyl-CoA hydratase activity has the amino acid sequence set forth in SEQ ID NO:1. A recombinant expression vector contains the maoC gene of SEQ ID NO:2. The process for preparing polyhydroxyalkanoate using MaoC protein comprises the steps of: (i) removing fadB gene from Escherichia coli; (ii) co-transforming the E. coli with both of the expression vector containing the maoC gene and an expression vector containing a PHA synthesizing gene phaC to give a transformant; and (iii) culturing the transformant in a medium containing C6-10 carbon source to give PHA consisting of monomers having C6-10 carbon source.
Abstract translation:目的:提供使用MaoC蛋白制备聚羟基链烷酸酯的方法,从而以更高的产率制备具有较大碳数的高质量聚羟基链烷酸酯。 构成:编码提供合成MCL-PHA(中链长度聚羟基链烷酸酯)所需的单体的蛋白质的MaoC基因具有SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。 由maoC基因表达并具有烯酰辅酶A水合酶活性的蛋白质MaoC具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。 重组表达载体含有SEQ ID NO:2的maoC基因。 使用MaoC蛋白制备聚羟基链烷酸酯的方法包括以下步骤:(i)从大肠杆菌中除去fadB基因; (ii)用含有maoC基因的表达载体和含有PHA合成基因phaC的表达载体共转化大肠杆菌,得到转化体; 和(iii)在含有C6-10碳源的培养基中培养转化体以得到由具有C6-10碳源的单体组成的PHA。
Abstract:
PURPOSE: A recombinant bacterial system for producing P(3HB-co-3HA) is provided, thereby mass-producing poly(3-hydroxyalkanoate) (PHA) containing a large amount of 3HB having similar properties to the conventional synthetic polymer. CONSTITUTION: A recombinant expression vector containing PHA synthesizing gene phaC, beta-ketothiolase synthesizing gene phaA, and NADPH dependent acetoacetyl-CoA reductase synthesizing gene phaB is provided, wherein the recombinant vector is p104613C2ReABstb. A transformant transformed with the recombinant expression vector p104613C2ReABstb is provided, wherein the transformant is Escherichia coli WA101(p104613C2ReABstb), Escherichia coli WB101(p104613C2ReABstb), or Escherichia coli WAB101(p104613C2ReABstb). A method for producing P(3HB-co-3HA) comprises culturing a transformant selected from Escherichia coli WA101(p104613C2ReABstb), Escherichia coli WB101(p104613C2ReABstb), or Escherichia coli WAB101(p104613C2ReABstb) in a medium containing fatty acid or both fatty acid and carbohydrate.