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公开(公告)号:CN105524104B
公开(公告)日:2018-10-02
申请号:CN201510882377.9
申请日:2015-12-03
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明涉及一种新型的有机化学反应,该反应发生于2当量的溴乙酮基芳环衍生物和1当量的硫代磷酸酯衍生物之间,生成含有硫醚的磷酸三酯产物。该反应不仅适用于有机小分子之间,还也可以发生于生物大分子与有机小分子之间,并且对有机溶剂和水都兼容。当芳环衍生物是光敏官能团时,用本发明的方法可以修饰含有硫代磷酸骨架的核酸,并且通过光照后能够恢复成为天然磷酸骨架的核酸。
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公开(公告)号:CN107988319A
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201711327504.4
申请日:2017-12-13
Applicant: 清华大学
IPC: C12Q1/6825
Abstract: 本发明公开了一种评价两个单链核酸分子相互作用的方法。该方法为用氨基修饰某一单链DNA分子作为捕获探针并固定在醛基修饰光纤传感器表面,采用荧光标记另一单链DNA分子作为信号探针,信号探针和捕获探针反应后检测荧光信号:如果荧光信号强,则两个单链DNA分子发生相互作用;如果荧光信号弱,则两个单链DNA分子没有发生相互作用。因此,信号探针和捕获探针反应后荧光信号的强弱能够反映两个单链DNA分子的相互作用,荧光信号越强,则两个单链DNA分子相互作用越大。本发明制备方法简单,性能稳定,光纤重复性好,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN105039561B
公开(公告)日:2018-02-09
申请号:CN201510490778.X
申请日:2015-08-11
Applicant: 清华大学
IPC: C12Q1/6837
Abstract: 本发明公开了使检测汞离子的生物芯片再生的成套试剂及其应用。使用本发明的使检测汞离子的芯片再生的成套试剂对芯片再生得到的再生芯片具有很好的可重复性,与新制备的芯片相比,使用再生方法1获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法2获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.4%以下,使用再生方法3获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.8%以下,使用再生方法4获得的再生次数为1‑10的再生芯片的百分比信号值偏差均在4.7%以下,这四种再生方法均获得很好的再生效果。
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公开(公告)号:CN106383101A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610795978.0
申请日:2016-08-31
Applicant: 清华大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6428 , G01N2021/6432
Abstract: 本发明公开了基于“off-on-off”模式的汞离子的荧光检测方法及荧光探针芯片。该方法中,随着待测样品中的Hg2+的浓度逐渐增加,Hg2+首先与杂交液中的TQ形成T–Hg2+–T结构,与TQ配对的带荧光标记的AC以游离状态存在,随后AC与芯片表面固定的探针TP发生杂交反应而被捕获,表现为荧光逐渐增强,即“off–on”模式”;然后,随着Hg2+的浓度继续增加,剩余Hg2+与芯片上的探针TP形成T–Hg2+–T结构,而原在芯片上捕获的AC被取代,从荧光探针表面离开,表现为荧光逐渐衰减,即“on–off”模式”;根据荧光探针芯片所检测得到的荧光强度确定待测溶液中Hg2+的浓度。本发明基于T-T错配原理,借助于两次目标诱导的构象变化,结合光纤的倏逝波荧光检测平台,可实时检测Hg2+。
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公开(公告)号:CN104914151A
公开(公告)日:2015-09-16
申请号:CN201510233166.2
申请日:2015-05-08
IPC: G01N27/327 , G01N27/48
Abstract: 本发明涉及一种用于氨苄西林和磺胺地索辛检测的,基于信号探针链取代的核酸适配体电化学传感器(SD-EAB)自组装钝化层的形成方法及其电化学传感器。本发明中氨苄西林SD-EAB的制备包括三个步骤:首先将末端修饰巯基的捕获探针与其互补的有二茂铁标记的核酸适配体信号探针进行杂交,然后通过自组装固定在金电极上,最后利用OEG6-OMe作为自组装钝化层分子对电极进行封闭。本发明中磺胺地索辛SD-EAB的制备与上述三个步骤类似。本发明可以解决当SD-EAB中使用现有技术中常用的MCH自组装钝化层无法实现对氨苄西林和磺胺地索辛进行检测的问题。
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公开(公告)号:CN104342760A
公开(公告)日:2015-02-11
申请号:CN201310336822.2
申请日:2013-08-05
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种制备核酸芯片的方法及其在倏逝波检测中的应用。本发明提供的制备核酸芯片的方法,依次包括如下步骤:(1)将表面具有SiO2膜的基片进行表面羟基活化;(2)将步骤(1)得到的基片浸泡于硅烷化剂溶液,室温静置30-120min后取出基片,洗涤并干燥,然后130-200℃烘烤1-12小时;(3)通过偶联剂将核酸分子固定到基片的表面,得到核酸芯片。在倏逝波激发下,可实时监测核酸芯片表面固定的核酸与互补核酸的杂交情况,同时该核酸芯片还可洗脱再生,实现重复使用(可重复使用50次以上)。
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公开(公告)号:CN103245641B
公开(公告)日:2014-10-29
申请号:CN201210030284.X
申请日:2012-02-10
Applicant: 清华大学 , 北京金达清创环境科技有限公司
IPC: G01N21/64
Abstract: 多通道平面波导倏逝波生物传感器属于生物检测技术领域,特别涉及到利用激光激发标记有荧光染料的生物物质发光,从而实现生物检测的技术。其特征在于,激光在平面玻璃介质中进行光波导的过程中,在两相介质的界面处形成多个全反射点,全反射点处产生的倏逝波激发此点空间范围内荧光标记的生物分子产生荧光,多模光纤对荧光进行收集,并用锁相放大器对荧光信号进行检测。由于激光在平面波导过程中可形成多个全反射点,对每个全反射点标记不同的生物分子,并单独测定荧光信号,即可实现一个样品中多指标的同时测定。本发明具有波导结构简单、荧光收集效率高、背景噪声干扰小、可实现多指标同时测定等特点。
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公开(公告)号:CN102936619A
公开(公告)日:2013-02-20
申请号:CN201210202181.7
申请日:2012-06-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种定量检测大肠杆菌RNA的方法及其专用标准品和应用。本发明提供的方法包括如下步骤:(1)按照如下方法制作标准曲线;将RNA标准品配制成各个浓度的标准品稀释液,然后将各个标准品稀释液反转录为cDNA,以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR,以实时荧光定量PCR体系中的cDNA对应的RNA拷贝数(也可对拷贝数进行数据处理,如拷贝数以10为底的对数)和Ct值制作标准曲线方程;(2)提取大肠杆菌的总RNA并反转录为cDNA,以cDNA为模板进行实时荧光定量PCR,将Ct值代入所述标准曲线方程,得到大肠杆菌的RNA含量。本发明的方法可用于快速检测环境中少量的大肠杆菌,为快速检测活性大肠杆菌提供技术支持。
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公开(公告)号:CN101974633B
公开(公告)日:2012-05-16
申请号:CN201010525990.2
申请日:2010-10-25
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种定量检测微囊藻的方法及其专用标准品。本发明提供一种检测样品中微囊藻的标准品,为含有16S rRNA基因的重组质粒或重组菌或重组细胞;所述16S rRNA基因的序列是序列表中的序列1。所述重组质粒中的出发质粒是pMD-18T。本发明的定量检测微囊藻的标准品具有广谱识别和特异性相结合的特点,敏感性高,制备方法简便,可以长期保存,纯度好,线性检测范围宽,可以用于水环境样品中微囊藻的快速定量检测。
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公开(公告)号:CN100465645C
公开(公告)日:2009-03-04
申请号:CN200710119213.6
申请日:2007-07-18
Applicant: 清华大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/531 , G01N33/53 , C12N5/12
Abstract: 本发明公开了一种微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒。该微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒,包括包被抗原、微囊藻毒素-LR多克隆抗体或单克隆抗体以及酶标二抗;所述包被抗原为完全抗原A;所述完全抗原A按照如下方法制备:在微囊藻毒素-LR的第七位氨基酸残基N-甲基脱氢丙氨酸上引入一个氨基,得到经氨基修饰的微囊藻毒素-LR;再将该经氨基修饰的微囊藻毒素-LR与载体蛋白偶联得到所述微囊藻毒素-LR与载体蛋白的偶联物,即完全抗原A。本发明的微囊藻毒素酶联免疫检测试剂盒检测范围在0.10μg/L-30.00μg/L之间,定量检测区间在0.30μg/L-10.00μg/L之间,平均回收率(100.3±5.9)%,批内误差小于15%,准确度和精密度符合要求,能进行环境样品中微囊藻毒素-LR的大规模快速筛查和预警监测。
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