公开(公告)号：WO2011118896A1

公开(公告)日：2011-09-29

申请号：PCT/KR2010/007542

申请日：2010-10-29

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단 ,  박용일 ,  박제권 ,  김성민 ,  최두진

Inventor： 박용일 ,  박제권 ,  김성민 ,  최두진

IPC: C12N9/14 ,  C12P21/02

CPC classification number: C12N9/2402 ,  C12P19/04 ,  C12P19/26 ,  C12R1/39 ,  C12Y302/01018

Abstract: 본 발명은 슈도모나스 플루오레센스 균주 JK-0412를 배양하는 등의 방법으로 시알산 분해 효소를 생산하는 방법 및 이와 같이 생성된 효소를 이용하여 시알산 전구체를 분해하는 방법을 제안한다. 본 발명의 신규 균주를 이용하여 생물학적인 방법을 통하여 폴리시알산, 시알산 올리고당 등의 시알산 전구체로부터 항-바이러스, 항암, 당뇨 면역 활성 등에 주요한 역할을 하는 저분자당 또는 올리고당의 시알산을 효율적으로 제조할 수 있어서 약품 등으로의 활용이 기대된다.

Abstract translation: 本发明涉及以产生通过诸如培养假单胞菌属的菌株的唾液酸酶的方法荧光JK-0412，并降低使用由后者产生的酶的酸前体的唾液酸的方法。 使用利用本发明中，低分子量的碳水化合物和唾液酸寡糖，从而起到抗病毒活性，抗肿瘤中起重要作用的菌株的新培养改进的抗活性的生物过程，以及 对糖尿病，可以由聚（唾液酸）的唾液酸前体，唾液酸寡糖等，其中它们提供了药物用途被有效地制备。

公开(公告)号：KR100295873B1

公开(公告)日：2001-11-30

申请号：KR1019980020345

申请日：1998-06-02

Applicant: 박제권

Inventor： 박제권

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/55

Abstract: 본 발명은 키토산아제의 제조 방법에 관한 것으로 특히, 유전공학을 이용하여 키토산아제를 다량으로 생산하고자 하는 발명이다.
키토산은 키틴과 함께 게, 새우등의 갑각류의 껍질에서 주로 발견되는 β - 1,4 결합된 아미노 글루코사민인 고분자 물질로서 최근 항암효과, 항균성, 혈액중의 콜레스테롤 저하, 인공 피부등 부가가치가 높은 천연 고분자로 의학, 생화학, 약학, 효소학, 농업등 다방면으로 그 이용도가 확대되어가고 있다.
그러나 자연계에서 얻을 수 있는 키토산은 비 수용성 고분자라는 점에서 유용성이 떨어지고 있으므로 생리활성이 높은 키토산 올리고당 또는 수용성 키토산 저분자당을 생산하는 것이 시급하다.
따라서, 본 발명은 키토산의 가수분해 효소인 키토산아제를 다량으로 생산하여 이러한 요구에 부응하고자 하는 발명이라고 할 것이다.
본 발명에 의하면, 키토산아제를 분비하는 것으로 알려진 M. chitosanotabidus 3001의 키토산아제를 코딩하는 유전자를 이용하여 이를 분리한 후 대량 발현체에 재조합 시키고 인체에 무해한 대장균체 내에 형질전환 시킴으로 키토산 분해효소를 다량으로 생산하게 한 발명이다.
이러한 방법으로 생산된 키토산아제는 단지 발현, 생산, 추출해낸 효소에 비하여 그 활성이 동일하거나 더 높을 뿐만 아니라, 별도의 효소 농축과정을 필요로 하지 아니하는 바, 경제적 및 시간적으로 유리하다.

公开(公告)号：KR1020000000623A

公开(公告)日：2000-01-15

申请号：KR1019980020345

申请日：1998-06-02

Applicant: 박제권

Inventor： 박제권

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/55

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12P1/04

Abstract: PURPOSE: A process for producing chitosanase having an excellent anticancer activity is provided by hydrolyzing insoluble chitosan to useful chitosan, such as chitosan-oligosaccharide or soluble low molecular weight sugar, using recombinant E.coli. CONSTITUTION: Chitosanase is massively produced by the following steps of: purifying chitosanase from Matsuebacter chitosanotabidus 3001; determining the internal and N-terminal amino acid sequences of the purified chitosanase; isolating a chitosanase encoding gene; cloning the gene into pFLAG-ATS plasmid; tranforming E.coli DH10B with the recombinant plasmid; isolating chitosanase from the transformed E.coli by using chromatography, affinity chromatography or centrifugation.

Abstract translation: 目的：通过使用重组大肠杆菌将不溶性壳聚糖水解成有用的壳聚糖如壳聚糖 - 低聚糖或可溶性低分子量糖来提供具有优异抗癌活性的生产壳聚糖酶的方法。 构成：壳聚糖酶通过以下步骤大量生产：从松节油菌（Chatsosanotabidus）3001中纯化壳聚糖酶; 确定纯化的壳聚糖酶的内部和N-末端氨基酸序列; 分离壳聚糖酶编码基因; 将该基因克隆入pFLAG-ATS质粒; 用重组质粒转化大肠杆菌DH10B; 通过使用色谱法，亲和色谱法或离心法从转化的大肠杆菌中分离壳聚糖酶。