公开(公告)号：WO2010098561A3

公开(公告)日：2010-09-02

申请号：PCT/KR2010/001085

申请日：2010-02-22

Applicant: 주식회사 제노포커스 ,  최재열 ,  반재구 ,  박승환 ,  김의중

Inventor： 최재열 ,  반재구 ,  박승환 ,  김의중

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12N15/63 ,  C12P19/04

Abstract: 본 발명은 바실러스 서큘란스 ( Bacillus circulans ) 유래 베타갈락토시다제 II, 이를 코딩하는 유전자, 상기 유전자를 함유하는 재조합 벡터, 상기 유전자 또는 재조합 벡터로 형질전환된 재조합 미생물, 상기 재조합 미생물을 이용한 베타-갈락토시다제 II의 제조방법 및 상기 베타-갈락토시다제 II를 이용한 갈락토올리고당의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 바실러스 서큘란스 유래 베타-갈락토시다제 II 및 이를 코딩하는 유전자를 이용하여 베타-갈락토시다제 중 당 전이 활성이 우수한 베타-갈락토시다제 II를 생산함으로써, 갈락토올리고당의 효율적인 대량 생산이 가능함으로 유용하다.

公开(公告)号：WO2010064861A2

公开(公告)日：2010-06-10

申请号：PCT/KR2009/007209

申请日：2009-12-03

Applicant: 한국생명공학연구원 ,  최수근 ,  반재구 ,  박승환 ,  이수진

Inventor： 최수근 ,  반재구 ,  박승환 ,  이수진

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/09 ,  C12N15/00

CPC classification number: C12N15/75 ,  C07K14/325

Abstract: 본 발명은 바실러스 츄린겐시스 (Bacillus thuringiensis) cry3Aa 프로모터 변이체에 관한 것으로서, 상기 바실러스 츄린겐시스 cry3Aa 프로모터의 -35 부위, 스페이스 부위 및 -10 부위 중 어느 하나 이상의 부위가 돌연변이됨으로써 다운스트림 (downstream)의 유전자 발현률이 증대된 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 벡터, 상기 벡터를 포함하는 숙주세포 및 (a) cry3Aa 프로모터 변이체를 포함하는 벡터를 제조하는 단계; (b) 제조된 벡터를 숙주세포에 도입하는 단계; 및 (c) 상기 숙주세포로부터 목적 단백질을 회수하는 단계를 포함하는 단백질 생산방법에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及苏云金芽孢杆菌cry3Aa的启动子变体，更具体地说，涉及通过-35区域，空间区域和-10区域中的至少一个区域的突变而具有增强的下游基因表达速率的多核苷酸 苏云金芽孢杆菌cry3Aa启动子，包含该多核苷酸序列的载体，包含该载体的宿主细胞，以及一种用于蛋白质生产的方法，包括（a）制备包含cry3Aa启动子变体的载体的步骤，（b ）将制备的载体导入宿主细胞的步骤，和（c）从宿主细胞中回收靶蛋白的步骤。

公开(公告)号：WO2011062414A2

公开(公告)日：2011-05-26

申请号：PCT/KR2010/008137

申请日：2010-11-17

Applicant: 주식회사 제노포커스 ,  반재구 ,  김정애 ,  김의중

Inventor： 반재구 ,  김정애 ,  김의중

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N15/70 ,  C12N15/63

Abstract: 본 발명은 Acs(Acetyl-CoA synthase) 유전자의 프로모터에 변이를 가하여(mutagenesis) 상기 Acs 프로모터 라이브러리를 구축, 자연형(natural-occurring) Acs 프로모터와 비교할 때 다양한 발현 양상(발현양 및 발현 프로파일)을 나타내는 자가유도 발현 시스템을 제공한다. 본 발명의 자가유도 발현은 에너지 및 영양 상태를 센싱하는 세포내 네트워크의 조절 하에서 일어난다. 각각의 배양 생장을 모니터링 하고 적합한 시간에 유도자(IPTG 또는 락토오스)를 첨가하여야 하는 종래의 유도방식과 다르게, 본 발명의 자가유도 발현 시스템은 매우 편의하게 실시될 수 있으며, 탄소원(예컨대, 글루코오스)이 있는 배지에 본 발명의 자가유도 발현 벡터로 형질전환된 세포를 접종하고 정지기까지 배양하면 목적단백질을 대량으로 또는 다양한 프로파일로 얻을 수 있다.

Abstract translation:

本发明的ACS（乙酰基 - 辅酶A合酶）加入的突变的基因（诱变）的启动子构建在ACS启动子文库，多种表达的相比于天然存在的（天然存在的）的ACS启动子 （表达水平和表达谱）。 本发明的自诱导表达需要蜂窝网络的控制下进行，以感测的能量和营养状态。 在适当的时候诱导和本发明的不同，自诱导表达系统监测每一个培养物生长，并要被添加到所述电感器的现有（IPTG或乳糖）可以在非常便利，碳源中进行（例如，葡萄糖）是 以与被诱导表达载体并培养以固定相转化的细胞接种于培养基中的本发明的妇女，以获得所需的蛋白质在一个大的量或不同的分布。