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公开(公告)号：CN116784237B
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202310922831.3
申请日：2023-07-26
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于光质调控的水曲柳高效再生方法：暗培养水曲柳合子胚5d获取下胚轴，于单色红光光源、出芽培养基中诱导下胚轴不定芽的产生；于蓝光：红光＝3:2光源、伸长培养基中诱导不定芽伸长，15d后使用白光继续诱导伸长；于蓝光：红光＝2:3或蓝光：红光＝1:4光源、生根培养基中诱导生根。LED光源不同光质及组合的处理提前了水曲柳下胚轴芽点出现时间至3d，缩短出芽阶段培养时间至14d左右、伸长阶段培养时间至15d左右、提前生根时间至5d左右。有效缩短了诱导再生繁殖周期，提高了诱导效率，保证了组培苗的品质。
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公开(公告)号：CN114774414B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210336366.0
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.5及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.5，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性，为水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列。
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公开(公告)号：CN114774414A
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202210336366.0
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.5及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.5，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性，为水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列。
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公开(公告)号：CN116784237A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310922831.3
申请日：2023-07-26
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于光质调控的水曲柳高效再生方法：暗培养水曲柳合子胚5d获取下胚轴，于单色红光光源、出芽培养基中诱导下胚轴不定芽的产生；于蓝光：红光＝3:2光源、伸长培养基中诱导不定芽伸长，15d后使用白光继续诱导伸长；于蓝光：红光＝2:3或蓝光：红光＝1:4光源、生根培养基中诱导生根。LED光源不同光质及组合的处理提前了水曲柳下胚轴芽点出现时间至3d，缩短出芽阶段培养时间至14d左右、伸长阶段培养时间至15d左右、提前生根时间至5d左右。有效缩短了诱导再生繁殖周期，提高了诱导效率，保证了组培苗的品质。
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公开(公告)号：CN114703188B
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202210336613.7
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/70 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12Q1/6897
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.6及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.6，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色及gus基因转录表达验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明四种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.6.1、proFmU6.6.2、proFmU6.6.3、proFmU6.6.4均有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.6克隆及启动子活性的表达分析，为研究水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114703189B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210336615.6
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/70 , C12N15/84 , C12Q1/6897 , A01H5/00 , A01H6/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.3及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.3，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性，为水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列。
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公开(公告)号：CN114703187A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210336608.6
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.7及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.7，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明一种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.7.4具有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.7克隆及启动子活性的表达分析，为研究与水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。
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公开(公告)号：CN117737065A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311764582.6
申请日：2023-12-21
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明涉及植物生物技术领域，具体涉及一种水曲柳强启动子及其应用，所述启动子具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明通过构建启动子活性检测载体、瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色及gus基因转录水平验证，证明所述启动子具有强启动活性。此外，所述启动子在拟南芥、烟草、杨树、白桦等不同物种中均具有启动活性。所述启动子为水曲柳定向遗传改良提供了工具，在植物基因工程及基因编辑领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN114703187B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202210336608.6
申请日：2022-03-31
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/10 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明涉及一种水曲柳U6基因启动子proFmU6.7及其克隆与应用。本发明首次成功克隆了水曲柳RNA聚合酶Ⅲ型启动子——水曲柳内源U6基因启动子proFmU6.7，并成功构建了水曲柳U6基因启动子活性检测载体，通过瞬时转化水曲柳幼苗、GUS染色验证，证明该启动子具有高效转录活性。实验证明一种水曲柳U6基因截短启动子proFmU6.7.4具有启动活性，并成功在CRISPR/Cas9系统中应用。水曲柳U6基因启动子proFmU6.7克隆及启动子活性的表达分析，为研究与水曲柳及近缘植物的转化研究提供了高效的启动子序列，也可以实现对水曲柳高效精准的种质创新与品种遗传改良。
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公开(公告)号：CN113430194B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202011377672.6
申请日：2020-11-30
Applicant: 东北林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/00
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9的白桦基因编辑方法，以白桦中高度保守的BpPDS和BpUVR8为靶基因，在其保守结构域上分别选取了1个和4个靶位，共设计了5个靶序列，构造了pU3b‑sgRNA‑UBQ1‑Cas9转化载体。利用瞬时转染初步鉴定了5个靶序列与白桦基因组的适配度，稳定的农杆菌转化法被用于外源DNA的整合，初步说明BpPDS和BpUVR8‑1这两个靶位可以编辑白桦基因组；BpPDS与BpUVR8‑1稳定遗传转化的编辑效率分别为41.67％、100％，纯合单株的百分比分别为37.5％、100％。该方法的建立一方面，可用于初步鉴定载体的活性，筛选活性较大的靶位，提高转化效率；其次，可用于获得白桦CRISPR/Cas9突变体植株，方便生产规范化，对加快白桦功能基因的研究具有重要意义。
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