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公开(公告)号：CN101597645B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN200910040613.7
申请日：2009-06-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种日本血吸虫性别特异性检测引物、检测试剂盒和检测方法，该特异性引物的上游引物Tsexu2核苷酸序列：5′-ACGTTAGATACTGCTGTTCA-3′，下游引物Tsexd2核苷酸序列：5′-ATATTGTTCCAAGTACGCAT-3′。本发明用上述特异性检测引物对待测模板DNA进行PCR扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外光下观察，阳性结果会出现特异性扩增条带，阴性结果则不会出现。本发明根据日本血吸虫的雌虫特异序列数据设计特异性检测引物，建立了用于日本血吸虫流行病学和性别鉴别的快速、特异、敏感的PCR方法，可准确地鉴定日本血吸虫性别。本发明的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感性高，结果判定客观，可用于人和动物日本血吸虫性别特异性诊断。
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公开(公告)号：CN118186119A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410436217.0
申请日：2024-04-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种鉴定猫等孢球虫和芮氏等孢球虫的双重PCR检测引物组、检测方法及其应用。通过筛选得到一种猫等孢球虫和芮氏等孢球虫的双重PCR检测引物组，包括IFITS‑F6/R6和IRITS‑F6/R6引物对。基于所述双重PCR检测引物组合物建立了双重PCR‑HRM方法，所述方法仅扩增猫等孢球虫和芮氏等孢球虫，对猫等孢球虫和芮氏等孢球虫的检测最低限分别为1.04×101copies/μL和1.17×10‑1copies/μL。所述双重PCR‑HRM方法敏感性高，稳定、重现性好，对球虫检出率显著高于显微镜检测、巢式PCR检测，且能快速有效地区分猫等孢球虫与芮氏等孢球虫。
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公开(公告)号：CN114164213B
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202111500852.3
申请日：2021-12-09
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种敲除MIC3基因的重组球虫载体及其检测方法，属于基因工程技术领域。本发明提供一种靶向球虫MIC3基因的sgRNA，所述靶向球虫MIC3基因的sgRNA的靶点位于MIC3基因；由sgRNA、Cas9和同源重组质粒建立基因编辑系统，可精确地敲除球虫MIC3基因并同源重组荧光标记蛋白于MIC3基因，构建一种表达荧光标记蛋白的重组球虫载体。所述重组球虫载体的DNA经过PCR检测和测序，表明荧光标记基因已成功重组于MIC3基因，且重组球虫载体在荧光显微镜下具有明显的荧光信号，表明其已成功敲除MIC3基因并表达荧光标记蛋白。
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公开(公告)号：CN105420362B
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201510927370.4
申请日：2015-12-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及检测技术领域，具体公开了兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR检测引物和试剂盒，所述引物为Me‑F和Me‑R，其序列如SEQ ID NO：1～2所示，基于所述引物优化反应体系和反应条件，研制出一种基于荧光染料法的定量检测兔中型艾美耳球虫荧光定量PCR试剂盒，试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感性高，结果判定客观。该方法可实现对兔球虫病的流行病学调查及临床诊断，为兔球虫的诊断和防治技术，临床快速而准确的检测兔球虫的感染情况提供技术支持。
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公开(公告)号：CN107132102A
公开(公告)日：2017-09-05
申请号：CN201710465973.6
申请日：2017-06-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种改进的猪寄生虫病粪检方法。先往猪粪便中加入尿素溶液，同时加入表面活性剂，搅拌混匀并过滤粗粪渣后静置，滴加除泡剂后再静置，取表层溶液进行镜检。本发明克服了传统饱和食盐水漂浮法的缺陷，通过利用尿素使蛋白质变性的原理，除去检测物中的蛋白质；再加入一定量的表面活性剂，利用表面活性剂的亲水憎油基和亲油憎水基，使粪便中的脂肪乳化成小分子脂滴，从而除去脂肪对检测的影响，同时加入除泡剂去除在使用表面活性剂时因搅拌而产生的气泡从而改善镜检视野，提高检测率；本发明操作简单、方便，检测率高，原料易得，很适合在实际临床中推广使用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102021246B
公开(公告)日：2012-11-07
申请号：CN201010570231.8
申请日：2010-12-02
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别和检测肝片吸虫和大片吸虫的LAMP检测方法和试剂盒。本发明采用具有SEQIDNO：1～SEQIDNO：12所示序列的特异性引物分别对肝片吸虫和大片吸虫的待测模板DNA进行LAMP扩增，并对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳或者SYBRgreenI显色，并在紫外光下实现观察和鉴别。本发明建立了用于肝片吸虫和大片吸虫鉴别的快速、特异、敏感的LAMP方法，可准确地鉴定肝片吸虫和大片吸虫成虫、尾蚴、虫卵。本发明的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感性高，结果判定客观，可用于肝片吸虫和大片吸虫的快速鉴别。
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公开(公告)号：CN101880726A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010236983.0
申请日：2010-07-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法。本发明用于检测日本血吸虫地域株的上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明引物用于检测日本血吸虫地域株时，是用上述引物对待测模板DNA进行CAPS-PCR扩增，并对扩增产物进行CAPS酶切反应，将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外光下观察，阳性结果呈现未被酶切的单带，阴性结果呈现完全酶切的双带。本发明建立了用于日本血吸虫地域株鉴别的快速、特异、敏感的CAPS方法，可准确鉴定日本血吸虫地域株。含有本发明引物的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感度高，结果判定客观，适合推广应用。
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公开(公告)号：CN101230382A
公开(公告)日：2008-07-30
申请号：CN200810026296.9
申请日：2008-02-04
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于猪食道口线虫病诊断的多重PCR检测试剂盒，包括DNA裂解液；PCR反应液；有齿食道口线虫DNA阳性对照和四棘食道口线虫阳性对照。本发明应用猪有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的ITS重复DNA片段作为遗传标记，建立了用于猪食道口线虫病诊断的快速、特异、敏感的多重PCR方法；操作简单程序化，结果判定客观，可用于猪食道口线虫病的诊断、流行病学调查及有齿食道口线虫和四棘食道口线虫的鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN112877215A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110227960.1
申请日：2021-03-02
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一种柔嫩艾美耳球虫子孢子的分离纯化方法和接种方法，涉及生物技术领域。本发明的分离纯化方法包括：取感染鸡粪便，加水，过滤；离心，沉淀加入饱和食盐水，离心，上清液加水得卵囊稀释液；离心，沉淀加入氯胺T溶液，得孢子化卵囊悬液；离心，沉淀加入饱和食盐水重悬，离心收集卵囊沉淀；加入次氯酸钠溶液重悬，收集卵囊；震荡破碎，待孢子囊全部逸出停止震荡，离心得到孢子囊，加入胰酶消化液进行消化，过滤离心收集沉淀，得柔嫩艾美耳球虫子孢子。本发明的接种方法是将上述孢子囊或子孢子精准注射于小鸡肌胃和小肠中段，实现成功感染。本发明的纯化方法得到的孢子囊和子孢子的纯化程度高，实验操作简便，注射接种后感染成功率达100％。
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公开(公告)号：CN104998277B
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201510264495.3
申请日：2015-05-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K49/00 , A61K36/489 , A61P33/02 , A61K31/7056 , A61K31/7048 , A61K31/635 , A61K31/63 , A61K31/505
Abstract: 本发明公开了一种抗弓形虫组方药物及其筛选方法，属于医药领域。本发明通过建立小鼠实验弓形虫病动物模型，选取磺胺嘧啶钠注射液、复方磺胺甲噁唑、盐酸林可霉素注射液、磺胺间甲氧嘧啶钠注射液、阿奇氟注射液、乙酰螺旋霉素、乙胺嘧啶、罗红霉素、青蒿、苦参十种药物，筛选出两个抗弓形虫效果最好的组方，分别为磺胺间甲氧嘧啶+乙胺嘧啶+TMP与复方磺胺甲噁唑+乙酰螺旋霉素。建立小鼠动物模型和猪动物模型，验证了上述两个组方治疗人工感染猪弓形虫病均有效，与小鼠模型的治疗效果相一致。本研究证明了用小鼠实验弓形虫病模型评价治疗猪弓形虫病药物的疗效是一种可行的方法，同时提供了两个效果良好的抗弓形虫的药物组方。
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