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公开(公告)号:CN115725491B
公开(公告)日:2025-05-02
申请号:CN202211322969.1
申请日:2022-10-27
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供了一种表面展示PET解聚酶的重组黏细菌及其构建方法与应用,以黄色黏球菌M.xanthus DK1622作为底盘细胞,将信号肽、PET解聚酶、锚定肽的基因序列的重组表达质粒导入所述底盘细胞后得到;所述PET解聚酶为密码子优化后的PET解聚酶DuraPETase,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;编码所述信号肽SP的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;编码所述锚定肽的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。本发明提供的重组黄色黏球菌M.xanthus DK1622可实现聚对苯二甲酸乙二醇酯水解酶(DuraPETase)的表达,并实现对聚酯型模式底物Impranil DLN的水解,有望实现塑料污染的原位修复。
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公开(公告)号:CN118792365B
公开(公告)日:2025-02-11
申请号:CN202411283893.5
申请日:2024-09-13
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12P13/00
Abstract: 本发明属于生物化学领域,具体涉及一种双酶协同解聚氨基甲酸酯键制备苯胺单体的方法。该方法具体是将氨基甲酸酯类化合物为底物,通过加入酰胺酶SP1和酯酶Aes72进行解聚反应得到苯胺单体。本发明所述酰胺酶SP1与酯酶Aes72均作用于氨基甲酸酯键,但对TDI基氨基甲酸酯键具有位置水解偏好性,双酶协同可实现偏好互补作用实现氨基甲酸酯的完全解聚,且SP1具有很高的MDI基氨基甲酸酯水解活性。本发明利用双酶降解氨基甲酸酯类化合物,大大提高了酶解效率,利用解聚后产生的苯胺单体可进行光气化反应重新制备异氰酸酯,实现聚氨酯苯胺单体的循环回收。
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公开(公告)号:CN118652308A
公开(公告)日:2024-09-17
申请号:CN202410713942.8
申请日:2024-06-03
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种采用囊泡信号肽融合表达提高塑料降解酶胞外分泌表达的方法。本发明采用了囊泡信号肽VNP6,与目的蛋白的融合表达,有效提高PET塑料降解酶FAST‑PETase在大肠杆菌细胞外分泌的表达水平,有助于解决塑料降解酶的胞外分泌量低的问题,为塑料降解酶的高效外泌重组表达与制备提供新的表达策略,为构建高效PET降解菌株中均具有极大的应用前景。
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公开(公告)号:CN118122372A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410342117.1
申请日:2024-03-25
Applicant: 南京工业大学 , 致一环境(江苏)有限公司
Abstract: 本发明涉及一种具有水传导通道的沸石包覆NiIn加氢催化剂及其制备方法和应用,通过在疏水S‑1包覆NiIn催化剂内核外分别包覆亲水沸石壳和对亲水性沸石壳层进行硅氧烷改性,构建了具有疏水‑亲水‑疏水结构的水传导通道的沸石包覆NiIn催化剂。根据列夏特勒原理,原位移除CO2加氢反应过程产生的水,反应的热力学平衡被打破,从而提升了CO2的转化率和目标产物收率,在CO2资源化利用领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118063626A
公开(公告)日:2024-05-24
申请号:CN202410234493.9
申请日:2024-03-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开利用角质酶融合蛋白实现PET塑料解聚的方法,将几丁质结合模块与角质酶ICCG连接,获得融合蛋白;将融合蛋白的酶液与PET塑料混合,完成PET塑料解聚;其中,所述几丁质结合模块的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的融合蛋白性能优良,显著增强了与底物的结合能力,具有高效的塑料降解能力,对于结晶度为40%的PET薄膜显示出可测量的活性。
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公开(公告)号:CN118048435A
公开(公告)日:2024-05-17
申请号:CN202410205894.1
申请日:2024-02-26
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种聚酯解聚酶的筛选方法,该方法使用聚硫酯作为底物,该聚硫酯解聚时可引起巯基识别荧光探针的响应,也就是说该聚硫酯被有效的聚酯解聚酶解聚后产生游离巯基,被巯基识别探针捕获,并导致荧光发生变化,从而实现聚酯解聚酶的快速筛选。本发明聚酯解聚酶的筛选方法,包括以下步骤:使用如式I所示结构聚硫酯作为底物,该底物含有硫酯键结构,其被有效酶分解后产生游离巯基,再用巯基识别探针捕获巯基并导致荧光发生变化,实现聚酯解聚酶的快速筛选;#imgabs0#其中,X为S或O,X为S时式I所示结构名称为:聚对苯二甲酸乙二硫醇酯,X为O时式I所示结构名称为:聚对苯二甲酸2‑巯基乙醇酯。
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公开(公告)号:CN118028266A
公开(公告)日:2024-05-14
申请号:CN202410178586.4
申请日:2024-02-09
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/18 , C12N15/55 , C12N1/19 , C12N15/81 , B09B3/60 , C08J11/10 , B09B101/75 , C12R1/84 , C08L75/04 , C08L75/06
Abstract: 本发明公开了一种高效水解聚酯型聚氨酯塑料的真菌角质酶及其应用,所述角质酶的编码基因cpcut1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明使用的真菌角质酶CpCut1能够在短时间内高效降解不同类型的聚酯型PU底物(#imgabs0#DLN,PBA‑PU和固性PU泡沫)。以#imgabs1#DLN为底物时,CpCut1在30min后对#imgabs2#DLN的降解率达到100%;以PBA‑PU薄膜在12h后的降解率达到40.5%;在以PU泡沫为底物时,CpCut1对PU泡沫的降解率为20.6%。并且发现CpCut1对三种PU的降解效果均优于其他三种已报道的聚酯角质酶。
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公开(公告)号:CN117947104A
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410150028.7
申请日:2024-02-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于在线监测的补料发酵生产β‑榄香烯的方法,包括:取活化后的产β‑榄香烯的酵母菌菌种接种到发酵培养基中培养得到种子液,并且接入发酵罐中;发酵开始后,采用微生物发酵多组分在线分析装置监测发酵液中葡萄糖浓度并反馈给控制系统;根据获得的葡萄糖浓度监测值,当检测值低于设定值时,由所述控制系统控制补料蠕动泵,令所述补料蠕动泵抽取新鲜的葡萄糖溶液补充到所述发酵罐中,使得发酵罐中葡萄糖浓度达到设定值。本发明的方法中,通过葡萄糖浓度的在线监测,进而在线指导β‑榄香烯发酵过程中的精确补加葡萄糖,缓解发酵过程中高浓度底物对细胞生长和β‑榄香烯合成的抑制作用,从而使β‑榄香烯生产效率提高了39%。
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公开(公告)号:CN113249284B
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202110468867.X
申请日:2021-04-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了恶臭假单胞菌基因工程菌及其构建方法和应用。将来自于铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)PAO1和KT1115中和鼠李糖脂生物表面活性剂合成相关的基因簇rhlIRBA,分别构建在表达载体pBBRmcs‑5上,并转化至恶臭假单胞菌KT2440中,获得两株恶臭假单胞菌工程菌。经发酵对比,两株基因工程菌均只产生单鼠李糖脂,且表达来自P.aeruginosa (56)对比文件Till Tiso et al.,.“Integration ofGenetic and Process Engineering forOptimized Rhamnolipid Production UsingPseudomonas putida”《.Frontiers inBioengineering and Biotechnology》.2020,第8卷(第976期),第1-24页.Janina Beuker et al.,.“Integratedfoam fractionation for heterologousrhamnolipid production with recombinantPseudomonas putida in a bioreactor”《.AMBExpr》.2016,第6卷(第11期),第1-10页.
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公开(公告)号:CN116813726A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310809865.1
申请日:2023-07-04
Applicant: 南京工业大学
IPC: C07K14/315 , C07K1/30 , C07K1/34 , C07K1/36 , C07K1/14
Abstract: 本发明公开了一种从食品级乳酸链球菌素产品中提取高纯度乳酸链球菌素的方法,包括以下步骤:(1)将食品级乳酸链球菌素产品溶解分离,得到沉淀和含盐上清液;(2)所得沉淀与稀酸溶液混合离心,得到溶解液;(3)将所得含盐上清液和/或溶解液在中空纤维膜组件中经以下工艺条件处理;i.微滤;ii.超滤脱蛋白;iii.超滤脱色,脱色结束后,对膜组件反洗;iv.超滤脱盐浓缩,对膜组件反洗;v.超滤纯化浓缩,对膜组件反洗;vi.真空浓缩干燥,得到乳酸链球菌素;上述反洗至少有一个步骤为通过微纳米气泡发生器进行反洗。本发明所提供的方法降低了产品的分离损失,为乳酸链球菌素在医药工业中的应用提供了保障。
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