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公开(公告)号：CN118638218A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202410651611.6
申请日：2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一种识别传染性法氏囊病毒新型变异毒株VP2蛋白第221位氨基酸的单克隆抗体制备，本发明提供了一种仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白的单克隆抗体VP2‑5B5，经鉴定重链亚型为IgG2b，其识别的构象抗原表位的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。与现有技术相比，本发明的有益技术效果在于：1）本发明以IBDV新型变异株VP2的高变区蛋白作为免疫原，该段序列抗原性和亲水性良好，制备的重组蛋白rVP2‑HVR以可溶性形式表达于上清中。2）本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5特异性良好，仅特异性识别IBDV新型变异株VP2蛋白，可用于IBDV新型变异株的鉴别诊断。3）本发明制备的单克隆抗体VP2‑5B5所识别的抗原表位为构象表位，其所识别的关键氨基酸位于VP2第221位氨基酸K。
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公开(公告)号：CN118497134A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410694499.4
申请日：2024-05-31
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , C07K14/08 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及一种识别传染性法氏囊病毒VP2蛋白第343‑348位氨基酸的单克隆抗体制备，本发明提供了一种广谱的识别IBDV VP2高变区蛋白的单克隆抗体5G10，经鉴定重链亚型为IgG1，其识别的线性抗原表位位于343PGALRP348。与现有技术相比，本发明的有益技术效果在于：1）本发明以IBDV新型变异株VP2的高变区蛋白作为免疫原，该段序列抗原性和亲水性良好，制备的重组蛋白rVP2‑HVR以可溶性形式表达于上清中。2）本发明制备的单克隆抗体5G10与不同毒力IBDV毒株的VP2蛋白均有良好的反应性，可用于IBDV的检测。3）本发明制备的单克隆抗体5G10所识别的抗原表位为线性表位，其所识别的关键氨基酸位于VP2 343PGALRP348。
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公开(公告)号：CN117825704A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202410020201.1
申请日：2024-01-07
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/535 , C07K14/075 , C12N15/70 , C12N5/20 , C12N15/34 , C07K16/08
Abstract: 本发明涉及一种基于Fiber‑2蛋白和抗Fiber‑2蛋白单克隆抗体的检测鸭3型腺病毒抗体的竞争ELISA方法，首次使用单克隆抗体进行鸭3型腺病毒抗体的检测，与间接ELISA技术相比，本发明的特异性高，能够有效提高检测的准确性，且不依赖于商品化的酶标二抗，可以应用于不同物种（鸡、鸭和鹅）血清中鸭3型腺病毒抗体检测，是一种简便、快速、稳定、特异的检测鸭3型腺病毒抗体的ELISA方法。使用本发明只需采集鸭群的血清，即可快速准确地检测血清中是否含有鸭3型腺病毒抗体，本发明适合应用于基层鸭群的大批量检测。本发明为鸭3型腺病毒的感染检测以及免疫效果监测提供了技术支持，具有一定的市场应用价值。
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公开(公告)号：CN110483637B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201910659588.4
申请日：2019-07-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K16/10 , C07K16/40 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/16 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体、编码基因及其应用，属于生物医学技术领域。抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体特异性地识别禽流感病毒神经氨酸酶蛋白N2，具有抑制神经氨酸酶活性和中和病毒能力。本发明还克隆了抗禽流感病毒神经氨酸酶N2单克隆抗体的轻、重链可变区基因序列和氨基酸序列，确认了基因序列和氨基酸序列的唯一性。本发明涉及的单克隆抗体、可变区基因及氨基酸序列可用于N2的禽流感病毒的诊断和治疗药物研发等，具有广泛的临床应用价值。
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公开(公告)号：CN113005101A
公开(公告)日：2021-06-22
申请号：CN202110332197.9
申请日：2021-03-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，其载体骨架为野生型血清4型禽腺病毒SD株；本发明所述的一种基于CRISPR‑Cas9技术的F2部分缺失型重组血清4型禽腺病毒的构建及其应用，选择当下流行的血清4型禽腺病毒作为骨架，通过银染、质谱和免疫共沉淀等技术发现并鉴定FAdV‑4中F2基因与宿主蛋白互作的功能区，随后将功能区删除后成功获得了F2部分缺失型重组FAdV‑4病毒，在体内及体外实验结果均显示，FA4‑Del重组病毒毒力显著降低，能够为SPF鸡提供很好的免疫保护。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109082423A
公开(公告)日：2018-12-25
申请号：CN201810910732.2
申请日：2018-08-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种流感病毒HA融合肽+helix A蛋白表达载体的制备方法及其应用与引物。本发明的原理和最核心的关键技术是科学地设计扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及流感病毒HA融合肽-helix A基因片段的引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应，直接在体外快速重组克隆HA融合肽-helix A，转化大肠杆菌，经IPTG诱导表达、实现流感病毒HA融合肽-helix A蛋白与GST的融合表达，并获得纯化的HA融合肽-helix A融合蛋白。
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公开(公告)号：CN104450695A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410704520.0
申请日：2014-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法，具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法，用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体，然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆，并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程，解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。
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公开(公告)号：CN119101660A
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202410802456.3
申请日：2024-06-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/075 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种识别高致病性血清4型禽腺病毒Hexon蛋白第188位氨基酸的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用，该细胞株2C5的保藏编号为CGMCC NO.45829，并分泌一种特异性识别高致病性血清4型禽腺病毒六邻体Hexon蛋白单克隆抗体2C5，其识别的抗原表位的氨基酸序列为Hexon蛋白GPGRNP，其中Hexon蛋白中R188氨基酸是其识别的关键氨基酸。本发明制备的单抗2C5具有高致病性FAdV‑4的特异性，能够特异性识别高致病性FAdV‑4，而与非致病性FAdV‑4和其他血清型的FAdV没有交叉反应，可作为诊断试剂应用于区分高致病性FAdV‑4和非致病性FAdV‑4。
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公开(公告)号：CN118185885A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202410361207.5
申请日：2024-03-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术构建的表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其构建方法，H3N8禽流感病毒HA蛋白，其序列如SEQ ID NO.1所示；重组血清4型禽腺病毒，其中使用H3N8禽流感病毒HA基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因，替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸。本发明利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入H3N8禽流感病毒HA基因，成功获得了表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒，此重组病毒可作为免疫防控H3N8以及血清4型腺病毒的二联疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN113354717B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202110631147.0
申请日：2021-06-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K19/00 , C12N15/50 , C12N15/70 , C07K16/10 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原及其特异性中和抗体和应用，属于病毒免疫检测技术领域。一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，与SARS‑CoV‑2人阳性血清的反应，能够特异性与新冠病毒抗体结合。基于本发明的多肽序列，利用PCR、原核表达及蛋白纯化技术，制备了三重SARS‑CoV‑2广谱多肽串联融合蛋白，模拟SARS‑CoV‑2S蛋白自然状态下三聚体模式，以该融合蛋白作为抗原免疫小鼠，可以产生抗SARS‑CoV‑2特异性中和抗体，所述中和抗体在SARS‑CoV‑2抗感染治疗、疫苗研发和检测试剂盒研制中将具有良好的应用前景。
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