公开(公告)号：CN107236700A

公开(公告)日：2017-10-10

申请号：CN201710445036.4

申请日：2017-06-12

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 吴卫东 ,  李海斌 ,  刘影影 ,  谢冬 ,  安珍 ,  李文 ,  曾样

IPC: C12N5/071 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

CPC classification number: C12N5/0625 ,  C12N2533/54 ,  G01N33/56966 ,  G01N33/577

Abstract: 支气管原代上皮细胞的培养与鉴定方法，包括如下步骤：S1、用胶原蛋白铺满器皿的表面，包被处理后备用；S2、经支气管镜，用一次性气管刷取支气管前壁上皮细胞，用一次性吸液管吹吸离心管内毛刷数次后，加入培养基内，点到包被好的培养皿中间培养至细胞铺满整个细胞孔；S3、用胰蛋白酶－EDTA消化液消化细胞孔，转移到细胞培养瓶细胞培养箱培养，1‑2天换液一次，至细胞铺满整个细胞瓶。本发明能够实现支气管原代上皮细胞的体外培养和鉴定，操作方便、细胞存活率高。

公开(公告)号：CN107129965A

公开(公告)日：2017-09-05

申请号：CN201710422969.1

申请日：2017-06-07

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 吴卫东 ,  李海斌 ,  刘影影 ,  谢冬 ,  安珍 ,  李文 ,  曾样

IPC: C12N5/071

CPC classification number: C12N5/0625 ,  C12N5/0688 ,  C12N2500/38

Abstract: 人支气管上皮细胞分化培养方法，包括如下步骤：将人原代支气管上皮细胞在普通细胞培养板上培养后，用胰蛋白酶‑EDTA消化液消化细胞孔；离心处理，首次加入BEGM培养基，混匀，再离心，加入BEGM培养基，吹打均匀；接种到培养板上，顶部加含BEGM培养基，基底部加含BEGM培养基，培养，细胞贴壁以后，顶部和基底部再次加入BEBM培养基，并分别添加500nM维甲酸，培养45‑50小时，然后吸出培养基；只向培养细胞的基底部添加加有100nM维甲酸的培养基。本发明同时提供了人支气管上皮细胞的鉴定方法。本发明体外培养得到人支气管细胞存活率高、减少混杂细胞干扰。