公开(公告)号：CN113005124B

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202110479782.1

申请日：2021-04-30

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 白义春 ,  李宁 ,  姚三巧 ,  任文杰 ,  安珍 ,  姜碧杰 ,  李玉春 ,  赵英政 ,  李海斌 ,  董新文

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及靶向敲除ATG5基因的gRNA引物、表达系统、细胞株。本发明确定靶向ATG5基因的gRNA引物，第一靶点序列T1序列为AGTGGATAATCTTTATGGCATGG；第二靶点序列T2序列为TCATGACAACATGCTGACAGTGG。本发明构建的ATG5基因敲除的人血管内皮细胞株的总蛋白，检测自噬效应蛋白LC3‑Ⅰ/LC3‑Ⅱ、p62和Beclin‑1，结果显示自噬效应蛋白的表达增强，表明本发明构建的细胞株成功敲除ATG5基因，沉默ATG5基因的表达，能够应用于ATG5基因在引起内皮细胞向间充质的转化和凋亡的作用机制。

公开(公告)号：CN113005124A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110479782.1

申请日：2021-04-30

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 白义春 ,  李宁 ,  姚三巧 ,  任文杰 ,  安珍 ,  姜碧杰 ,  李玉春 ,  赵英政 ,  李海斌 ,  董新文

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及靶向敲除ATG5基因的gRNA引物、表达系统、细胞株。本发明确定靶向ATG5基因的gRNA引物，第一靶点序列T1序列为AGTGGATAATCTTTATGGCATGG；第二靶点序列T2序列为TCATGACAACATGCTGACAGTGG。本发明构建的ATG5基因敲除的人血管内皮细胞株的总蛋白，检测自噬效应蛋白LC3‑Ⅰ/LC3‑Ⅱ、p62和Beclin‑1，结果显示自噬效应蛋白的表达增强，表明本发明构建的细胞株成功敲除ATG5基因，沉默ATG5基因的表达，能够应用于ATG5基因在引起内皮细胞向间充质的转化和凋亡的作用机制。