公开(公告)号：CN107779460A

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201610715466.9

申请日：2016-08-25

Applicant: 杨美宁

Inventor： 杨美宁

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02

CPC classification number: C12N9/1211 ,  C12Y207/01021 ,  G01N33/5011

Abstract: 一种逆转录病毒载体介导HSV1的方法，用DNA重组技术将单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV1tk）定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN，并用限制性内切酶进行酶切及测序鉴定；用PolyFect Transfection试剂介导重组逆转录病毒转染入包装细胞系PT67，通过G418筛选建立稳定产病毒的细胞株，将病毒感染人胃癌细胞，检测HSV1tk自杀基因治疗系统在体外的抗肿瘤效应。经酶切鉴定和DNA序列测定，HSV1tk基因成功定向插入到pLXSN载体中；重组病毒DNA转染包装细胞，筛选出对G418具稳定抗性的克隆PT67／tk，扩大培养，获取病毒滴度为4×１０４cfu/mL的重组逆转录病毒培养液；感染胃癌细胞SGC7901后再筛选出G418抗性克隆株SGC7901／tk。丙氧鸟苷（GCV）对SGC7901/tk有明显杀伤作用，对SGC7901无明显毒性，证明该病毒表达HSV1tk基因具有生物活性。

公开(公告)号：CN107782837A

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201610715467.3

申请日：2016-08-25

Applicant: 杨美宁

Inventor： 杨美宁

IPC: G01N30/89

CPC classification number: G01N30/89

Abstract: 一种检测化橘红中柚皮苷元含量的方法，采用反相高效液相色谱法（HPLC）测定不同化橘红中的柚皮苷元含量，流动相A：甲醇，流动相BV水：V乙酸＝６１∶４，进行梯度洗脱，流速为10mL/min，检测波长283nm。结果在0.088～0.880μg范围内，柚皮苷元与色谱峰面积呈良好的线性关系，r＝0.9999，平均加样回收率为95.49%，RSD＝200%（n＝５）；化橘红23个样品中柚皮苷元含量均在01～10mg・g－１之间。

公开(公告)号：CN107779449A

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201610715468.8

申请日：2016-08-25

Applicant: 杨美宁

Inventor： 杨美宁

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/54

CPC classification number: C12N15/1003 ,  C12N9/1085 ,  C12Y205/01021

Abstract: 一种青蒿鲨烯合酶基因及其cDNA的克隆方法，一种青蒿鲨烯合酶基因及其cDNA的克隆方法，DNA的提取，按植物DNA提取试剂盒说明书提取青蒿植株的DNA。RNA的提取，PCR 扩增以提取的青蒿DNA为模板，SSPri5、SSPri3为上下游引物，用Takara公司的One Shot LA PCR Mix扩增，扩增条件为：94℃，1min→94℃，30s，57℃，1min，72℃，5min，30个循环→72℃，10min→4℃RTPCR扩增以提取的青蒿RNA为模板，转化DH5α感受态细胞，涂板，蓝白斑筛选重组子。分别经PCR扩增和EcoRⅠ酶切进行鉴定。PCR扩增采用Promega公司的Tf1酶，反应条件为：94℃，1min→94℃，30s，57℃，1min，72℃，5min，30个循环→72℃，10min→4℃。最后在 ABI Prism310DNA测序仪上用T7启动子引物测序。

公开(公告)号：CN105708855A

公开(公告)日：2016-06-29

申请号：CN201410716009.2

申请日：2014-12-02

Applicant: 杨美宁

Inventor： 杨美宁

IPC: A61K33/24 ,  A61K31/337 ,  A61K31/475 ,  A61P35/00

Abstract: 一种晚期乳腺癌复发的化疗方法，DP组：多西紫杉醇(DOC)75mg/m2，静脉输注，第1天；联合顺铂(DDP)25mg/m2，静脉输注，第2、3、4天；NP组：诺维本(NVB)25mg/m2，静脉输注，第1、8天；联合顺铂(DDP)用法同DP组；每21天为1个治疗周期；每例至少完成2个周期。

公开(公告)号：CN105640944A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201410716376.2

申请日：2014-12-02

Applicant: 杨美宁

Inventor： 杨美宁

IPC: A61K31/405 ,  A61P9/10 ,  A61P3/06 ,  A61P3/10

Abstract: 一种降低2型糖尿病合并冠心病患者sVCAM-1的方法，sVCAM-1检测：ELISA法，试剂盒购自上海西唐生物科技有限公司（美国R&D公司生产），批内CV＜3%，批间CV＜5%；④80例2型糖尿病患者在原降糖治疗基础上予氟伐他汀钠40mg/d（商品名：来适可）干预治疗24周，治疗期间均无明显不良反应。