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公开(公告)号:CN108866009A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810934313.2
申请日:2018-08-16
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/94 , C12R1/91
Abstract: 一株甲霜灵单克隆抗体杂交瘤细胞株20170507及其应用,属于食品安全免疫检测技术领域。本发明甲霜灵完全抗原与等量弗氏佐剂混合乳化完全,通过背部皮下注射免疫BALB/c小鼠。首次免疫(100μg/只)用完全弗氏佐剂,多次加强免疫(50μg/只)用不完全弗氏佐剂,最后一次用甲霜灵完全抗原(25μg/只,不含佐剂)冲击免疫。取高效价的IC50小鼠的脾细胞,通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合,经过间接竞争酶联免疫法筛选和三次亚克隆,得到甲霜灵单克隆抗体杂交瘤细胞株20170507。此细胞株分泌的单克隆抗体,对甲霜灵具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为40 ng/mL),为食品中甲霜灵残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN107312083A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710566384.7
申请日:2017-07-12
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/765 , C07K1/107
CPC classification number: C07K14/765 , C07K19/00
Abstract: 一种氮哌酮人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以4-苯丁酸甲酯与4-氯丁酰氯反应得到具有羧基的产物为半抗原Azap,用碳二亚胺法将半抗原与载体蛋白偶联,即得到氮哌酮人工抗原,用紫外法测定偶联物的偶联比。本发明成功合成了氮哌酮人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析中,为以后人们的研究提供了必需的人工抗原。
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公开(公告)号:CN112322565B
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202011240682.5
申请日:2020-11-09
Applicant: 光明乳业股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高重组大肠杆菌中2’‑岩藻糖基乳糖产量的方法,属于基因工程技术领域。本发明采用柔性Linker将四种不同蛋白标签分别融合在α‑1,2‑岩藻糖基转移酶FutC的N端,构建的融合蛋白FP‑futC可以不同程度地提高α‑1,2‑岩藻糖基转移酶催化合成2'‑FL的产量。其中,采用TrxA‑futC融合蛋白合成2'‑FL的产量最高,达到2.94g/L,底物乳糖的消耗达到3.55g/L,乳糖转化率为0.58mol/mol。而在对照组中,不加蛋白标签构建的质粒pMA09‑futC获得的重组大肠杆菌合成2'‑FL的产量仅为1.71g/L,乳糖消耗量为2.88g/L,乳糖转化率仅为0.42mol/mol。进一步将TrxA‑futC融合蛋白基因整合至大肠杆菌MG1655基因组上的yjiP位点,获得一株无质粒的2'‑FL基因工程菌株MG‑26△yjiP::trxA‑futC,摇瓶发酵后2'‑FL的产量达到3.85g/L,乳糖转化率为0.68mol/mol。
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公开(公告)号:CN116732075A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310683330.4
申请日:2023-06-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产2′‑岩藻糖基乳糖的多层动态调控系统及其应用,属于生物技术领域。本发明构建的多层动态调控系统包括:组成型表达的靶向2′‑岩藻糖基乳糖合成相关基因的第一crRNA,组成型表达的靶向中心碳代谢相关基因的第二crRNA,组成型表达的调节因子LsrR,由诱导型启动子PlsrA调控的缺陷型核酸酶dCas12a,其中,上调2′‑岩藻糖基乳糖合成相关基因manB、manC、gmd、fcl、rcsA的表达,下调中心碳代谢相关基因pfkA的表达。本发明的动态调控系统有效缓解了中心碳代谢和2'‑FL从头合成途径对胞内营养物质的竞争性消耗而造成的细胞代谢压力,同时大大提高了目标产物的产量,对大肠杆菌细胞工厂合成2'‑FL的研究有着重要的意义。
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公开(公告)号:CN112266901B
公开(公告)日:2022-04-12
申请号:CN202011152808.3
申请日:2020-10-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , C07K14/77 , C07K14/795 , G01N33/53 , G01N33/577 , C07D239/52
Abstract: 一株嘧菌酯单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于免疫检测技术领域。本发明公开了一株分泌嘧菌酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株ABC04,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2019年11月28日,保藏编号CGMCC No.19175。本发明以嘧菌酯完全抗原免疫BALB/c小鼠,取高效价、低IC50小鼠脾细胞,通过PEG方法与骨髓瘤细胞融合,经过间接竞争酶联免疫法的筛选和三次亚克隆,得到杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体,对嘧菌酯具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为0.03 ng/mL),为食品中嘧菌酯残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN112779225A
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN202110286531.1
申请日:2021-03-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , C07K14/795 , C07K14/77 , C07C251/60 , C07C249/04 , G01N33/577 , G01N33/53 , C12R1/91
Abstract: 一株分泌醚菌酯单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于食品安全免疫检测领域。本发明分泌醚菌酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株AE,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2020年4月23日,保藏编号CGMCC No.19680。将醚菌酯的完全抗原免疫BALB/c小鼠,将高效价、低IC50小鼠的脾细胞,通过PEG方法与小鼠骨髓瘤细胞融合,采用选择培养基,筛选出两种细胞融合后的杂交细胞;再经间接竞争酶联免疫法筛选细胞并三次亚克隆,最终得到一株杂交瘤细胞株AE。AE分泌的单克隆抗体,对醚菌酯具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为0.5ng/mL),为食品中醚菌酯残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN112266901A
公开(公告)日:2021-01-26
申请号:CN202011152808.3
申请日:2020-10-26
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , C07K14/77 , C07K14/795 , G01N33/53 , G01N33/577 , C07D239/52
Abstract: 一株嘧菌酯单克隆抗体杂交瘤细胞株及其应用,属于免疫检测技术领域。本发明公开了一株分泌嘧菌酯单克隆抗体的杂交瘤细胞株ABC04,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2019年11月28日,保藏编号CGMCC No.19175。本发明以嘧菌酯完全抗原免疫BALB/c小鼠,取高效价、低IC50小鼠脾细胞,通过PEG方法与骨髓瘤细胞融合,经过间接竞争酶联免疫法的筛选和三次亚克隆,得到杂交瘤细胞株。此细胞株分泌的单克隆抗体,对嘧菌酯具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为0.03 ng/mL),为食品中嘧菌酯残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN106867971B
公开(公告)日:2020-05-05
申请号:CN201710285176.X
申请日:2017-04-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/44 , G01N33/577 , G01N33/94 , C12R1/91
Abstract: 一株氟尼辛葡甲胺单克隆抗体杂交瘤细胞株YY及其应用,属于食品安全免疫检测领域。本发明氟尼辛葡甲胺单克隆抗体杂交瘤细胞株YY,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,简称CGMCC,保藏编号为CGMCC No.13096。此细胞株分泌的单克隆抗体,对氟尼辛葡甲胺具有较好的特异性和检测灵敏度(IC50值为0.24 ng/mL),为食品中氟尼辛葡甲胺残留的免疫检测提供了原料,具有实际应用价值。
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公开(公告)号:CN117402804A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202311420604.7
申请日:2023-10-30
Applicant: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体及产2'‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌,属于生物技术领域。本发明借助生物信息学等方法,基于蛋白序列比对、丙氨酸扫描半理性选取多个氨基酸残基作为改造靶点,针对性地对α‑1,2岩藻糖基转移酶构建“小而精”的高质量突变体文库,对特定靶点进行组合突变等半理性改造方法,获得了高活性的α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体用于大肠杆菌中2'‑FL的合成,为富含2'‑岩藻糖基乳糖的食品开发奠定了基础。
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