公开(公告)号：CN111849953B

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202010563346.8

申请日：2020-06-19

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 耿枫 ,  孙宇 ,  朱来宇 ,  朱美茹

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06 ,  C12P13/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种苏氨酸脱水酶突变体的构建及应用，其特征在于，所述的改造是将大肠杆菌来源的苏氨酸脱水酶中的441位脯氨酸替换为亮氨酸。本发明通过结构生物学的方法，预测了该位点的突变，通过将苏氨酸脱水酶进行位点突变，解除了异亮氨酸对苏氨酸脱水酶的反馈抑制。将上述突变的基因连接到表达质粒上，并在宿主菌如大肠杆菌中过量表达，显著提高了异亮氨酸的产量。与同样过量表达野生型苏氨酸脱水酶基因的质粒重组菌株相比，含有本发明苏氨酸脱水酶突变体的大肠杆菌产异亮氨酸能力提高一倍。

公开(公告)号：CN111849953A

公开(公告)日：2020-10-30

申请号：CN202010563346.8

申请日：2020-06-19

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 耿枫 ,  孙宇 ,  朱来宇 ,  朱美茹

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06 ,  C12P13/08 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种苏氨酸脱水酶突变体的构建及应用，其特征在于，所述的改造是将大肠杆菌来源的苏氨酸脱水酶中的441位脯氨酸替换为亮氨酸。本发明通过结构生物学的方法，预测了该位点的突变，通过将苏氨酸脱水酶进行位点突变，解除了异亮氨酸对苏氨酸脱水酶的反馈抑制。将上述突变的基因连接到表达质粒上，并在宿主菌如大肠杆菌中过量表达，显著提高了异亮氨酸的产量。与同样过量表达野生型苏氨酸脱水酶基因的质粒重组菌株相比，含有本发明苏氨酸脱水酶突变体的大肠杆菌产异亮氨酸能力提高一倍。