公开(公告)号：CN106939299A

公开(公告)日：2017-07-11

申请号：CN201710063908.0

申请日：2017-02-04

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王跃嗣

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  A61K35/30 ,  A61P25/00 ,  A61P25/28 ,  A61P25/16 ,  A61P25/14

CPC classification number: C12N5/0623 ,  A61K35/30 ,  C12N15/85 ,  C12N2500/38 ,  C12N2501/11 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/91 ,  C12N2501/999 ,  C12N2506/1307 ,  C12N2510/00 ,  C12N2800/107

Abstract: 本发明提供了一种诱导体细胞转分化为神经干细胞的方法及其应用。具体地，本发明涉及采用microRNA‑302、丙戊酸、polybrene、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子等组合，在正常生理环境下诱导人成纤维细胞、上皮细胞、血细胞、脂肪细胞等体细胞通过重编程技术诱导形成具有高产同时又具有良好多能性以及传代稳定性的神经干细胞。本发明方法采用单个microRNA转染体细胞，无需引入外源转录因子，制备形成克隆时间远远短于现有技术，有望开发成为治疗退行性神经系统疾病 (包括脊髓损伤等病变) 的治疗方法或药物，因此具有良好的临床应用前景。

公开(公告)号：CN115820563A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211592124.4

申请日：2022-12-13

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王跃嗣

IPC: C12N5/10 ,  C12N5/0793 ,  C12N15/861 ,  C12N15/867 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明提供了一种用于体细胞重编程为多巴胺神经元的培养基、试剂盒和培养方法，属于细胞技术领域。本发明相对于现有技术省略多个转录因子的情况下，使用单一miR‑34b结合诱导培养基和成熟培养基开发一种高效率重编程人和鼠体细胞为多巴胺神经元的方法。本发明利用microRNA不会整合到基因组上消除转录因子可能的基因组整合和插入突变的潜在风险，而且利用优化的重编程诱导培养基可提高多巴胺神经元的生成效率、缩短产生时间以及加快神经元的成熟，为细胞疗法治疗帕金森病等神经退行性疾病提供了细胞基础。

公开(公告)号：CN112608904B

公开(公告)日：2023-02-07

申请号：CN202011609828.9

申请日：2020-12-30

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王跃嗣

IPC: C12N5/10 ,  C12N5/0797 ,  C12N15/113 ,  A61K35/30 ,  A61P25/28 ,  A61P25/16 ,  A61P25/00 ,  A61P25/14 ,  A61P9/10

Abstract: 本发明的目的之一是提供一种高效快速重编程体细胞为神经干细胞的方法，包括：体细胞的分离、提取和扩增；基因敲降载体或基因敲除载体的转染；神经干细胞的扩增培养；所述的基因敲降载体或基因敲除载体包括阻断let‑7基因的shRNA、siRNA、CRISPR基因编辑载体或相关microRNA抑制剂。本发明使用敲降或敲除一个microRNA—let‑7b的表达而不引入任何外源基因，由成纤维胞成功诱导出神经干细胞，可在短时间内扩增产生能够足够移植所需的细胞量，并且是遗传稳定的，能分化形成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，可扩增超过20代以上的神经干细胞，移植给老鼠也未见诱导肿瘤形成。

公开(公告)号：CN106939299B

公开(公告)日：2022-11-15

申请号：CN201710063908.0

申请日：2017-02-04

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王跃嗣

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  A61K35/30 ,  A61P25/00 ,  A61P25/28 ,  A61P25/16 ,  A61P25/14

Abstract: 本发明提供了一种诱导体细胞转分化为神经干细胞的方法及其应用。具体地，本发明涉及采用microRNA‑302、丙戊酸、polybrene、表皮生长因子和成纤维细胞生长因子等组合，在正常生理环境下诱导人成纤维细胞、上皮细胞、血细胞、脂肪细胞等体细胞通过重编程技术诱导形成具有高产同时又具有良好多能性以及传代稳定性的神经干细胞。本发明方法采用单个microRNA转染体细胞，无需引入外源转录因子，制备形成克隆时间远远短于现有技术，有望开发成为治疗退行性神经系统疾病(包括脊髓损伤等病变)的治疗方法或药物，因此具有良好的临床应用前景。

公开(公告)号：CN112608904A

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN202011609828.9

申请日：2020-12-30

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王跃嗣

IPC: C12N5/10 ,  C12N5/0797 ,  C12N15/113 ,  A61K35/30 ,  A61P25/28 ,  A61P25/16 ,  A61P25/00 ,  A61P25/14 ,  A61P9/10

Abstract: 本发明的目的之一是提供一种高效快速重编程体细胞为神经干细胞的方法，包括：体细胞的分离、提取和扩增；基因敲降载体或基因敲除载体的转染；神经干细胞的扩增培养；所述的基因敲降载体或基因敲除载体包括阻断let‑7基因的shRNA、siRNA、CRISPR基因编辑载体或相关microRNA抑制剂。本发明使用敲降或敲除一个microRNA—let‑7b的表达而不引入任何外源基因，由成纤维胞成功诱导出神经干细胞，可在短时间内扩增产生能够足够移植所需的细胞量，并且是遗传稳定的，能分化形成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，可扩增超过20代以上的神经干细胞，移植给老鼠也未见诱导肿瘤形成。