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Patent Agency Ranking1.发明申请단백질 리간드를 이용하여 유도만능줄기세포의 분화를 유도하는 각막 줄기세포 유사 세포주를 배양하는 방법 및 시스템 审中-公开并且使用蛋白质配体来培养诱导诱导性多能干细胞分化的角膜干细胞样细胞系
公开(公告)号：WO2018030720A1
公开(公告)日：2018-02-15
申请号：PCT/KR2017/008466
申请日：2017-08-04
Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단
IPC: C12N5/079
Abstract: 본 발명은 유도만능줄기세포(Induced Pluripotent Stem Cell)의 분화를 유도하여 각막 줄기세포 유사 세포주를 배양하는 방법으로서, DMEM F12, L-아스코르브산, 아셀렌산 나트륨(Sodium selenite), 및 염화 나트륨을 포함하는 기본 배지를 준비하는 과정; 상기 기본배지에 유도만능줄기세포 배양용 첨가제를 첨가하는 과정; 상기 기본배지에 비트로넥틴 재조합 인간 단백질을 코팅하여 피더 비포함 배지(feeder free culture medium)를 제조하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에 유도만능줄기세포를 첨가하여 배양하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에 줄기세포 성장 환경 조성용 첨가제를 첨가하는 과정; 상기 유도만능줄기세포를 각막 줄기세포 유사 세포주로 분화하도록 유도하기 위해, 피더 비포함 배지에 BMP4 및 Wnt3a를 순차적으로 첨가하는 과정; 및 상기 유도만능줄기세포로부터 분화된 세포를 PI 배양액에서 배양하는 과정;을 포함하는 방법을 제공한다.
Abstract translation:
本发明是培养角膜干细胞的多能干细胞诱导方法类似细胞系诱导（诱导多能干细胞），DMEM F12，L-抗坏血酸和亚硒酸钠的分化（ 亚硒酸钠和氯化钠; 将用于多能干细胞培养的诱导剂添加至基础培养基; 通过用玻连蛋白重组人蛋白包被基础培养基来制备无饲养层培养基; 将诱导的多能干细胞加入到含有饲养细胞的培养基中; 将用于干细胞生长环境组合物的添加剂添加到含有饲养细胞的培养基中; 处理用于诱导分化的iPS细胞成类似细胞系中的角膜干细胞，随后添加BMP4和Wnt3a的，以包括非馈送器介质; 并在PI培养基中培养从诱导的多能干细胞分化的细胞。
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公开(公告)号：WO2018030719A1
公开(公告)日：2018-02-15
申请号：PCT/KR2017/008465
申请日：2017-08-04
Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단
IPC: C12N5/079
Abstract: 본 발명은 유도만능줄기세포(Induced Pluripotent Stem Cell)의 분화를 유도하여 각막 상피 세포를 배양하는 방법으로서, DMEM F12, L-아스코르브산, 아셀렌산 나트륨(Sodium selenite), 및 염화 나트륨을 포함하는 기본 배지를 준비하는 과정; 상기 기본배지에 유도만능줄기세포 배양용 첨가제를 첨가하는 과정; 상기 기본배지에 비트로넥틴 재조합 인간 단백질을 코팅하여 피더 비포함 배지(feeder free culture medium)를 제조하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에 유도만능줄기세포를 첨가하여 배양하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에 줄기세포 성장 환경 조성용 첨가제를 첨가하는 과정; 상기 유도만능줄기세포를 각막 상피 세포로 분화하도록 유도하기 위해, 피더 비포함 배지에 BMP4 및 KGF를 순차적으로 첨가하는 과정; 및 상기 유도만능줄기세포로부터 분화된 세포를 PI 배양액에서 배양하는 과정;을 포함하는 방법을 제공한다.
Abstract translation:
本发明的iPS细胞，以诱导（诱导多能干细胞）培养角膜上皮细胞，DMEM F12，L-抗坏血酸和亚硒酸钠的分化的方法（亚硒酸钠 ）和氯化钠; 将用于多能干细胞培养的诱导剂添加至基础培养基; 通过用玻连蛋白重组人蛋白包被基础培养基来制备无饲养层培养基; 将诱导的多能干细胞加入到含有饲养细胞的培养基中; 将用于干细胞生长环境组合物的添加剂添加到含有饲养细胞的培养基中; 依次将BMP4和KGF引入含有饲养细胞的培养基以诱导将多能干细胞诱导到角膜上皮细胞中; 并在PI培养基中培养从诱导的多能干细胞分化的细胞。
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3.发明公开miRNA를 이용하여 유도만능줄기세포의 분화를 유도하는 각막 상피세포를 배양하는 방법 및 시스템 有权通过诱导多的干细胞使用miRNA和系统为同一诱导分化为角膜培养上皮细胞miRNA的方法
公开(公告)号：KR20180017705A
公开(公告)日：2018-02-21
申请号：KR20160101955
申请日：2016-08-10
Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단
IPC: C12N5/079 , C12N15/113
Abstract: 본발명은유도만능줄기세포(Induced Pluripotent Stem Cell)의분화를유도하여각막상피세포를배양하는방법으로서, DMEM F12, L-아스코르브산, 아셀렌산나트륨(Sodium selenite), 및염화나트륨을포함하는기본배지를준비하는과정; 상기기본배지에유도만능줄기세포배양용첨가제를첨가하는과정; 상기기본배지에비트로넥틴재조합인간단백질을코팅하여피더비포함배지(feeder free culture medium)를제조하는과정; 상기피더비포함배지에유도만능줄기세포를첨가하여배양하는과정; 상기피더비포함배지에서배양된유도만능줄기세포를분화용배지에서배양하는과정; 상기배양된유도만능줄기세포를각막줄기세포로분화시키기위하여분화용배지에 BMP4 를첨가하는과정; 상기분화용배지에 BMP4를첨가하는과정이후, 각막상피세포로분화시키기위하여 Wnt3a 및 miRNA를순차적으로첨가하거나, 또는 Wnt3a 및 miRNA를동시에첨가하는과정; 및상기유도만능줄기세포로부터분화된세포를 PI 배양액에서배양하는과정;을포함하는방법을제공한다.
Abstract translation: 基本本发明的包括iPS细胞，以诱导微小化学（诱导多能干细胞）培养角膜上皮细胞，DMEM F12，L-抗坏血酸和亚硒酸钠（亚硒酸钠）和氯化钠的方法，以 准备介质的过程; 将用于多能干细胞培养的诱导剂添加至基础培养基; 通过用玻连蛋白重组人蛋白包被基础培养基来制备无饲养层培养基; 用多能干细胞培养多能干细胞的步骤; 将在含有成纤维细胞的培养基中培养的诱导性多能干细胞在分化培养基中培养; 将BMP4加入分化培养基以将培养的诱导多能干细胞分化成角膜干细胞; 添加BMP4到培养基中的分化的处理之后，该方法包括添加Wnt3a和miRNA或顺序的或同时以分化成上皮细胞中添加Wnt3a和miRNA的; 并在PI培养基中培养从诱导的多能干细胞分化的细胞。
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公开(公告)号：KR101927586B1
公开(公告)日：2018-12-10
申请号：KR1020160101955
申请日：2016-08-10
Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단
IPC: C12N5/079 , C12N15/113
Abstract: 본 발명은 유도만능줄기세포(Induced Pluripotent Stem Cell)의 분화를 유도하여 각막 상피세포를 배양하는 방법으로서, DMEM F12, L-아스코르브산, 아셀렌산 나트륨(Sodium selenite), 및 염화 나트륨을 포함하는 기본 배지를 준비하는 과정; 상기 기본배지에 유도만능줄기세포 배양용 첨가제를 첨가하는 과정; 상기 기본배지에 비트로넥틴 재조합 인간 단백질을 코팅하여 피더 비포함 배지(feeder free culture medium)를 제조하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에 유도만능줄기세포를 첨가하여 배양하는 과정; 상기 피더 비포함 배지에서 배양된 유도만능줄기세포를 분화용 배지에서 배양하는 과정; 상기 배양된 유도만능줄기세포를 각막 줄기세포로 분화시키기 위하여 분화용 배지에 BMP4 를 첨가하는 과정; 상기 분화용 배지에 BMP4를 첨가하는 과정 이후, 각막 상피세포로 분화시키기 위하여 Wnt3a 및 miRNA를 순차적으로 첨가하거나, 또는 Wnt3a 및 miRNA를 동시에 첨가하는 과정; 및 상기 유도만능줄기세포로부터 분화된 세포를 PI 배양액에서 배양하는 과정;을 포함하는 방법을 제공한다.
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