公开(公告)号：KR100626157B1

公开(公告)日：2006-09-20

申请号：KR1020040044539

申请日：2004-06-16

Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단

Inventor： 이철영 ,  이동희 ,  김상훈

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/70 ,  C07K1/22

Abstract: 본 발명은 GST-ALS 융합 단백질에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 (1) ALS 코딩 DNA 서열을 제조하는 단계, (2) 상기 DNA 서열을 GST(Glutathione-S-Transferase) 코딩 DNA 서열을 포함하는 벡터에 작동가능하게 연결하여 재조합 발현 벡터를 제조하는 단계, (3) 상기 재조합 발현 벡터로 숙주를 형질전환 또는 형질감염시키는 단계, (4) 생성된 형질전환체 또는 형질감염체를 상기 DNA 서열이 발현되도록 하기에 적절한 배지 및 조건하에서 배양하는 단계 및 (5) 이의 배양물로부터 목적한 GST-ALS 융합 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 GST-ALS 융합 단백질의 제조방법에 관한 것이다.
아울러, 상기 제조방법으로 제조된 GST-ALS 융합 단백질을 절단하여 ALS 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 ALS 단백질의 제조방법에 관한 것이다.
ALS, GST(Glutathione-S-Transferase), GST-ALS 융합 단백질

公开(公告)号：KR1020050119441A

公开(公告)日：2005-12-21

申请号：KR1020040044539

申请日：2004-06-16

Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단

Inventor： 이철영 ,  이동희 ,  김상훈

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/70 ,  C07K1/22

CPC classification number: C07K14/47 ,  C07K2319/23 ,  C12N15/63 ,  C12N2510/02 ,  C12P21/00

Abstract: 본 발명은 GST-ALS 융합 단백질에 관한 것이다.
또한, 본 발명은 (1) ALS 코딩 DNA 서열을 제조하는 단계, (2) 상기 DNA 서열을 GST(Glutathione-S-Transferase) 코딩 DNA 서열을 포함하는 벡터에 작동가능하게 연결하여 재조합 발현 벡터를 제조하는 단계, (3) 상기 재조합 발현 벡터로 숙주를 형질전환 또는 형질감염시키는 단계, (4) 생성된 형질전환체 또는 형질감염체를 상기 DNA 서열이 발현되도록 하기에 적절한 배지 및 조건하에서 배양하는 단계 및 (5) 이의 배양물로부터 목적한 GST-ALS 융합 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 GST-ALS 융합 단백질의 제조방법에 관한 것이다.
아울러, 상기 제조방법으로 제조된 GST-ALS 융합 단백질을 절단하여 ALS 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 ALS 단백질의 제조방법에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR100444431B1

公开(公告)日：2004-08-21

申请号：KR1020030083111

申请日：2003-11-21

Applicant: 경남과학기술대학교 산학협력단

Inventor： 이동희 ,  이철영

IPC: C12Q1/68

Abstract: PURPOSE: A screening method of an amino acid residue of IGFBP-3 required for binding with ALS using an IGFBP-3 mutant is provided, thereby rapidly and easily screening the amino acid residue of IGFBP-3 in the absence of a ligand IFG. CONSTITUTION: The screening method of an amino acid residue of IGFBP-3 required for binding with ALS using an IGFBP-3 mutant comprises the steps of: (1) preparing mRNA encoding the IGFBP-3 mutant having one nucleotide sequence selected from SEQ ID NO:2 to SEQ ID NO:15 using a primer, and mRNA encoding a natural type ALS(acid labile subunit); (2) introducing the prepared two mRNAs and radiation-labeled amino acids into Xenopus oocyte; (3) incubating the Xenopus oocyte to form ALS/IGFBP-3 mutant complex; and (4) isolating the complex and measuring the amount of the complex, wherein the primer has one nucleotide sequence selected from SEQ ID NO:17 to SEQ ID NO:23.