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公开(公告)号：KR101815105B1
公开(公告)日：2018-01-05
申请号：KR1020150144875
申请日：2015-10-16
Applicant: 국방과학연구소
IPC: C12Q1/68
Abstract: 본발명은멀티플렉스 PCR-기반된차세대시퀀싱을이용한한타바이러스전장유전체서열획득방법및 이의용도에관한것이다. 본발명의방법, 키트및 조성물은목적바이러스의일부게놈서열을증폭할수 있는정방향및 역방향프라이머쌍들을포함하는멀티플렉스프라이머세트로이루어진멀티플렉스프라이머세트풀을이용하고, 이에따라시료내 목적바이러스의존재유무를간편하고빠르게확인할수 있다. 또한, 상기멀티플렉스프라이머세트에포함된프라이머쌍들에의해얻어지는 100 내지 200 bp 길이의서열단편들에서 5'-to-3' 방향으로서로인접하는 2개의단편들은중첩서열(overlapping sequence)을포함한다. 이에따라, 상기멀티플렉스프라이머세트풀에의해증폭되는단편들을모두취합하여 5'-to-3' 방향으로서로중첩/연결시키는경우목적바이러스의전장게놈서열을용이하게획득할수 있다. 따라서, 본발명의방법, 키트및 조성물은목적바이러스(예컨대, 한타바이러스)의전장게놈서열을높은분포도(high-depth coverage)로매우정확하고신속하게얻을수 있게해주며, 이를통해한타바이러스유발질환의진단에보다효과적으로적용할수 있다.
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4.发明公开멀티플렉스 PCR-기반된 차세대 시퀀싱을 이용한 한타바이러스 전장 유전체 서열 획득 방법 및 이의 용도 审中-实审使用基于多重PCR的下一代测序获得汉坦病毒的全长基因组序列的方法及其用途
公开(公告)号：KR1020170045019A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：KR1020150144875
申请日：2015-10-16
Applicant: 국방과학연구소
IPC: C12Q1/68
Abstract: 본발명은멀티플렉스 PCR-기반된차세대시퀀싱을이용한한타바이러스전장유전체서열획득방법및 이의용도에관한것이다. 본발명의방법, 키트및 조성물은목적바이러스의일부게놈서열을증폭할수 있는정방향및 역방향프라이머쌍들을포함하는멀티플렉스프라이머세트로이루어진멀티플렉스프라이머세트풀을이용하고, 이에따라시료내 목적바이러스의존재유무를간편하고빠르게확인할수 있다. 또한, 상기멀티플렉스프라이머세트에포함된프라이머쌍들에의해얻어지는 100 내지 200 bp 길이의서열단편들에서 5'-to-3' 방향으로서로인접하는 2개의단편들은중첩서열(overlapping sequence)을포함한다. 이에따라, 상기멀티플렉스프라이머세트풀에의해증폭되는단편들을모두취합하여 5'-to-3' 방향으로서로중첩/연결시키는경우목적바이러스의전장게놈서열을용이하게획득할수 있다. 따라서, 본발명의방법, 키트및 조성물은목적바이러스(예컨대, 한타바이러스)의전장게놈서열을높은분포도(high-depth coverage)로매우정확하고신속하게얻을수 있게해주며, 이를통해한타바이러스유발질환의진단에보다효과적으로적용할수 있다.
Abstract translation: 本发明涉及使用基于多重PCR的下一代测序及其用途获得ha病毒全长基因组序列的方法。 本发明的方法，试剂盒和组合物使用由多重引物组组成的多重引物组池，所述多重引物组包含能够扩增靶病毒基因组序列的一部分的正向和反向引物对， 可以方便快捷地检查。 另外，在由多重引物组中包含的引物对获得的100至200bp长的序列片段中，在5'至3'方向上彼此相邻的两个片段包括重叠序列 的。 因此，如果由多重引物组池扩增的片段全部被收集并且在5'至3'方向上重叠/连接，则可以容易地获得靶病毒的全长基因组序列。 因此，本发明的方法，试剂盒和组合物允许高度精确和快速获得具有高深度覆盖的靶病毒（例如Hanta病毒）的全长基因组序列， 它可以更有效地应用于诊断。
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